规模化猪场大肠杆菌β-内酰胺类药物耐药性检测及其超广谱β-内酰胺酶调查

为阐明我国规模化猪场大肠杆菌(E.coli)对抗菌药物的耐药现状和耐药机制,本研究于2006年2月至2008年12月从19个省市97个规模化猪场分离鉴定602株E.coli,进行了4大类16种抗菌药物耐药性检测和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的筛选,采用PCR方法检测了9种常见β-内酰胺酶耐药基因,对产ESLBs菌株进行了脉冲电场凝胶电泳(PFGE)分析。结果显示:E.coli分离株对抗菌药物产生了不同程度的耐药性,602株E.coli中共有57株产ESBLs,产ESBLs菌株普遍耐受第二及第三代头孢药物。分别有35株和20株E.coli为blaCTX-M型和blaSHV型ESBLs,尚未发现blaOXA型和blaKPC型。PFGE结果显示,产ESBLs菌株间同源性低,推测我国猪源E.coli产ESBLs多为零星发生或以质粒介导的形式传播。本研究为了解我国猪源E.coli对β-内酰胺类药物的耐药现状和ESBLs变化趋势提供了实验依据。

鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研究

为研究鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗免疫效果的影响,根据GenBank登录的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR方法从四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆IL-1β和IL-16基因,与真核表达质粒pcDNA3.1(+)连接构建了pDNAIL-1β和pDNAIL-16。分别将两种重组质粒与IBVDNA联合免疫SPF雏鸡并进行攻毒试验。结果表明,pDNAIL-1β和pDNAIL-16均能促进血清中特异性抗体水平和外周血T淋巴细胞亚群数量的增加(p<0.05),增强IBV DNA疫苗对同型强毒的保护率15%～25%,pDNAIL-1β提升DNA疫苗的抗体水平的时间比pDNAIL-16多7d。试验表明,鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫具有增强作用。

市售15种猪场消毒剂消毒效果的比较

为评价市售的15种消毒剂的消毒效果,采用悬液定量杀菌试验对15种消毒剂的杀灭能力进行实验室评价,从中选择最有效的3种进行喷雾消毒,检测其杀菌率。结果:15种消毒剂中百毒杀S、百胜-30和新大卫均能够在10 min内100%的杀灭大肠杆菌、金黄色葡萄球菌,而作用10 min对枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢的杀灭率分别能达到82.9%,56.8%和59.3%,喷雾消毒后30 min和48 h的杀菌率分别为81.5%,65.1%,80.9%和54.2%,43.5%,55.2%。表明:15种消毒剂中百毒杀S、百胜-30和新大卫的杀灭能力最强,现场消毒后以百胜-30和百毒杀S的杀菌和持续的效果最好。

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒人工感染荣昌猪的试验研究

为了评价中国地方猪种对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)的易感性,使用1×106TCID50/m L的SCwhn09CD毒株人工感染中国地方品种荣昌猪,记录荣昌猪在试验期间的临床症状、体温变化、体重和死亡率。采用q PCR方法检测感染后第4、7、11和14天血清中的病毒拷贝数。病理切片观察感染后第14天肺部组织的损伤情况。结果显示:感染后荣昌猪表现为精神沉郁、饮食废绝、腹式呼吸、末梢皮肤发绀、持续高温、死亡、鼻腔内有黏性液体等典型猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)症状。感染后第3天直肠温度上升至40℃并一直持续到第14天,并在第12天达到峰值41.2℃。试验期间荣昌猪死亡率达66.7%。第4天血清中的病毒拷贝数达到峰值1.63×106拷贝/m L,随后缓慢下降至4.12×105拷贝/m L,但第4、7、11、14天间血清中的病毒拷贝数不存在显著性差异(P>0.05)。肺部组织出现了严重的支气管肺炎病变,肺泡壁显著增厚,致多数肺泡腔闭锁。