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甘蓝型油菜植物防御素基因的克隆与原核表达
被引量:
5
1
作者
王轶
罗勤
+3 位作者
吴俊
郭经宇
杨毅
李旭锋
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期831-834,共4页
根据Genbank上已知的植物防御素基因设计引物,以甘蓝型油菜中的品种”蜀杂九号”种子总RNA反转录成的cDNA为模板,进行PCR扩增,获得了243bp的片段.将该片段回收,连接到pMD18-T载体测序.将测序片段经酶切回收后克隆到GTK表达载体中,在0.1m...
根据Genbank上已知的植物防御素基因设计引物,以甘蓝型油菜中的品种”蜀杂九号”种子总RNA反转录成的cDNA为模板,进行PCR扩增,获得了243bp的片段.将该片段回收,连接到pMD18-T载体测序.将测序片段经酶切回收后克隆到GTK表达载体中,在0.1mmolIPTG诱导下表达出与理论值相符的34kD的融合蛋白条带.用GST单克隆抗体做第一抗体进行Western-blot检测,获得阳性结果.这为甘蓝型油菜植物防御素基因功能的进一步研究提供了基础.
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关键词
甘蓝型油菜
植物防御素
融合蛋白
原核表达
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职称材料
题名
甘蓝型油菜植物防御素基因的克隆与原核表达
被引量:
5
1
作者
王轶
罗勤
吴俊
郭经宇
杨毅
李旭锋
机构
四川大学生命科学学院植物遗传实验室
出处
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期831-834,共4页
文摘
根据Genbank上已知的植物防御素基因设计引物,以甘蓝型油菜中的品种”蜀杂九号”种子总RNA反转录成的cDNA为模板,进行PCR扩增,获得了243bp的片段.将该片段回收,连接到pMD18-T载体测序.将测序片段经酶切回收后克隆到GTK表达载体中,在0.1mmolIPTG诱导下表达出与理论值相符的34kD的融合蛋白条带.用GST单克隆抗体做第一抗体进行Western-blot检测,获得阳性结果.这为甘蓝型油菜植物防御素基因功能的进一步研究提供了基础.
关键词
甘蓝型油菜
植物防御素
融合蛋白
原核表达
Keywords
Brassica Napus
plant defensins
fusion protein
prokaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘蓝型油菜植物防御素基因的克隆与原核表达
王轶
罗勤
吴俊
郭经宇
杨毅
李旭锋
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005
5
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