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甘蓝型油菜植物防御素基因的克隆与原核表达 被引量:5
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作者 王轶 罗勤 +3 位作者 吴俊 郭经宇 杨毅 李旭锋 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期831-834,共4页
根据Genbank上已知的植物防御素基因设计引物,以甘蓝型油菜中的品种”蜀杂九号”种子总RNA反转录成的cDNA为模板,进行PCR扩增,获得了243bp的片段.将该片段回收,连接到pMD18-T载体测序.将测序片段经酶切回收后克隆到GTK表达载体中,在0.1m... 根据Genbank上已知的植物防御素基因设计引物,以甘蓝型油菜中的品种”蜀杂九号”种子总RNA反转录成的cDNA为模板,进行PCR扩增,获得了243bp的片段.将该片段回收,连接到pMD18-T载体测序.将测序片段经酶切回收后克隆到GTK表达载体中,在0.1mmolIPTG诱导下表达出与理论值相符的34kD的融合蛋白条带.用GST单克隆抗体做第一抗体进行Western-blot检测,获得阳性结果.这为甘蓝型油菜植物防御素基因功能的进一步研究提供了基础. 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 植物防御素 融合蛋白 原核表达
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