辣木叶抗氧化活性研究及活性成分含量测定

目的:确定辣木叶抗氧化有效部位,建立HPLC测定辣木叶中新绿原酸和异槲皮苷含量的方法。方法:采用体外方法评价辣木叶提取物四个部位石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、总奎宁酸和总黄酮的抗氧化活性;采用HPLC,选择Sepax Sapphire C_18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长330 nm,柱温30℃。结果:以异槲皮苷为代表的黄酮类成分和新绿原酸等奎宁酸类成分清除能力最强,二者浓度大于800μg/m L时,对DPPH清除率达80%以上,且对DPPH和羟自由基清除率均高于石油醚和乙酸乙酯萃取物;新绿原酸和异槲皮苷在检测范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.84%、98.70%,RSD均小于3.0%。结论:辣木叶抗氧化有效部位为总奎宁酸和总黄酮;该方法简便可靠,可作为辣木叶中新绿原酸和异槲皮苷的定量分析方法。

橙盖鹅膏菌子实体化学成分研究

目的:研究橙盖鹅膏菌子实体的化学成分。方法:利用正反相硅胶柱层析等色谱方法进行分离纯化,根据理化性质、波谱方法进行结构鉴定。结果:从橙盖鹅膏菌子实体中分离得到8个化合物,分别鉴定为:麦角甾醇(1)、过氧麦角甾醇(2)、9,11-脱氢过氧麦角甾醇(3)、油酸甘油酯(4)、油酸乙酯(5)、1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(2S,3R,4E,8E,2'R)-2-N-(2'-羟基十八烷酰)-9-甲基-4,8-脱氢鞘氨醇(6)、正十四烷胺(7)、小檗碱(8)。结论:所有化合物均为首次从该真菌中分离得到。

鸦胆子不同药材及部位中鸦胆子苦醇含量分析

目的:建立中药鸦胆子苦醇的高效液相色谱检测方法,测定鸦胆子不同药材及同一药材不同部位中鸦胆子苦醇的含量。方法:采用Sepax Sapphire C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-水溶液(体积比为40∶60)为流动相,流速为1.0mL·min^(-1),检测波长235nm,柱温30℃。结果:鸦胆子苦醇在质量浓度为61.6~1 060μg·mL^(-1)呈良好的线性关系,(r=0.9994,n=5),平均回收率为100.87%,RSD为2.01%(n=5)。同一药材不同部位,仁中鸦胆子苦醇最高,壳中最少;对不同药材,大药材中的鸦胆子苦醇是小药材中的2.6倍。结论:本研究建立的方法重复性好,准确可靠;结果表明鸦胆子同一药材不同部位及不同质量的药材中,鸦胆子苦醇含量差异比较大。

橙盖鹅膏菌中过氧麦角甾醇对人卵巢癌A2780S细胞增殖的影响

为了解橙盖鹅膏菌中分离得到的过氧麦角甾醇对人卵巢癌A2780S细胞增殖的影响及其可能的机制,取对数生长期的A2780S细胞,经1.10、2.19、4.38、8.75、17.5、35μmol/d L等浓度下的过氧麦角甾醇作用,以CCK-8法测试24、48和72 h后细胞增殖;经2.19、4.38、8.75μmol/d L浓度的过氧麦角甾醇作用24 h后,倒置显微镜下观察细胞形态,DAPI染色法观察细胞核形态,Annexin V/PI双染流式细胞术测定细胞的早期凋亡率,PI单染流式细胞术测定细胞周期.结果显示,过氧麦角甾醇作用于人卵巢癌A2780S细胞后,17.5μmol/d L、35μmol/d L浓度组48 h、72 h出现大量细胞死亡,贴壁存活细胞数目明显减少,细胞核呈现核浓缩的高量区域及月牙状的特征,细胞早期凋亡率、细胞S期比例显著增加.本研究表明过氧麦角甾醇对A2780S细胞增殖具有明显抑制作用,可能与其阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡有关.

诃子抑菌活性成分筛选和总鞣质含量测定新方法

为了建立一种HPLC检测抑菌活性成分诃子总鞣质含量的新方法,在HPLC条件:流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液梯度洗脱,检测波长为270 nm,流速为1 m L/min,柱温为30℃,色谱柱为Sepax Sapphire C18(250 mm×4.6 mm,5μm)下利用诃子鞣质中含量最高的成分诃子酸对药材中总鞣质进行含量测定。诃子酸在相应浓度内与色谱峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率在97.22%~101.38%之间,RSD为1.62%。研究结果表明,该方法与比色法相比操作更简单,结果更准确。利用HPLC法来测定抑菌成分诃子总鞣质含量,可以更准确地对诃子进行质量控制。