间充质干细胞制剂临床试验注册现状研究

目的总结和分析间充质干细胞(MSCs)制剂临床试验注册现状。方法在美国国家卫生研究院(NIH)临床试验登记注册网站上检索2014年12月15日前登记的MSCs临床试验项目,使用SPSS 17.0软件对研究项目数据作统计分析。结果全球共开展430项MSCs临床试验,中国101项,数量均呈逐年增长趋势。主要的研究疾病为移植物抗宿主病、骨关节炎、肝硬化和多发性硬化等。MSCs临床试验的细胞主要来源于骨髓、脐带和脂肪组织,分别占44.4%、20.0%和12.8%。MSCs临床试验以Ⅰ、Ⅰ/Ⅱ和Ⅱ期临床试验为主,共计351项,占81.6%,处于早期临床试验阶段,且试验设计参差不齐。结论间充质干细胞制剂临床试验适应证广,发展迅速但仍处于前期发展水平。

肺功能监测是否在哮喘当前控制评估中起重要作用?

目的 2009年版全球哮喘防治创议(GINA)中哮喘控制包括哮喘当前临床控制和未来风险。2015年版GINA指南将哮喘"当前临床控制"更名为哮喘"症状控制",且将肺功能从其中剥离出来,评估内容仅包括日间症状、夜间症状、缓解药物使用及活动受限四个方面。本研究旨在评价2009年版和2015年版GINA哮喘控制标准在评估哮喘当前控制间的一致性,并探索肺功能监测是否在哮喘当前控制评估中起重要作用。方法采用横断面研究设计,纳入138例稳定期哮喘患者。分别应用2009版和2015版GINA哮喘控制评估标准,比较同一控制水平组间的人口学资料、临床特征、肺功能、过去12个月哮喘急性发作、外周血细胞分类计数及诱导痰细胞计数等情况。采用Kappa检验评价两版标准的一致性。采用Spearman相关分析比较不同版本GINA哮喘控制水平与过去12个月哮喘急性发作间的相关性,亦分析肺功能与过去12个月哮喘急性发作情况之间的相关性。结果基于2009版GINA哮喘控制评估标准,138例受试者分为未控制组52例、部分控制组58例、控制组28例。而以2015版GINA哮喘控制评估标准,则分为未控制组33例、部分控制组59例、控制组46例。Kappa检验结果显示两标准呈中等一致性(Kappa=0.595,P<0.001)。与2009版比较,2015版评估的控制组哮喘患者肺功能更差[FEV_1%pred:(89.9±12.9)%vs.(79.9±18.2)%,P=0.013],2015版评估的部分控制组患者哮喘控制水平更差,其中ACQ-6评分(0.8±0.7 vs.1.1±0.7,P=0.028)和ACT评分(20.7±2.5 vs.19.4±2.5,P=0.007)差异均有统计学意义。两版哮喘控制标准均与过去12个月哮喘急性发作情况相关(2009版:r=–0.212;2015版:r=–0.268),且与2015年版GINA版标准关系更为密切。同一控制水平组间未发现在诱导痰、外周血炎症细胞分类计数和Ig E水平的差异。结论 2009版与2015版GINA哮喘控制评估标准间存在中等程度一致性。相较于2009版,经肺功能监测缺如的2015版GINA评估为控制组的哮喘患者存在更差的肺功能,部分控制组则存在更差的哮喘控制得分,2015年版GINA哮喘控制标准与哮喘急性发作间关系更为密切。因此,研究支持2015年版GINA哮喘控制标准在哮喘当前控制临床评估的应用。

运用改良的CRISPR/Cas9系统建立HtrA2敲除细胞株

能识别特定基因组DNA序列的核酸酶是基因编辑的重要工具。在单链RNA引导下,来源于一种产脓链球菌的成簇规律间隔短回文重复(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)关联蛋白(CRISPR-associated protein 9,Cas9)能够发挥其核酸酶功能对基因组特定序列进行剪切。这种功能依赖于单链引导RNA(single-guide RNAs,sg RNAs或g RNAs)中20 nt的核心靶向序列。在该研究中,作者对已有的CRISPR/Cas9系统载体进行了优化,简化了g RNA表达载体的构建。运用优化后的CRISPR/Cas9系统,我们敲除了HEK293T细胞中HtrA2基因的第一个外显子。这一改进大幅度降低了CRISPR/Cas9技术的使用成本。