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纳米颗粒Gd@C_(82)(OH)_(22)抑制哺乳动物细胞外排转运的研究
1
作者 黄奔 赵晓军 《四川动物》 CSCD 北大核心 2010年第1期37-40,共4页
目的探讨纳米颗粒Gd@C82(OH)22体外对哺乳动物细胞外排转运的影响,研究该外排转运抑制作用与MRP1蛋白和ATP酶活性间的关系,为Gd@C82(OH)22应用于耐药肿瘤治疗提供初步实验依据。方法通过Calcein-AM(C-AM)摄入法,以仓鼠肾细胞BHK-21、转... 目的探讨纳米颗粒Gd@C82(OH)22体外对哺乳动物细胞外排转运的影响,研究该外排转运抑制作用与MRP1蛋白和ATP酶活性间的关系,为Gd@C82(OH)22应用于耐药肿瘤治疗提供初步实验依据。方法通过Calcein-AM(C-AM)摄入法,以仓鼠肾细胞BHK-21、转染表达多药耐药相关蛋白MRP1的BHK-21/MRP1细胞以及肿瘤细胞PC-3为模型测定Gd@C82(OH)22对细胞外排转运的整体影响;用比色法测定Gd@C82(OH)22对MRP1蛋白截短体及BHK-21/MRP1质膜微囊的ATP酶活性的影响。结果经Gd@C82(OH)22处理后,3种细胞的C-AM摄入量均上调,BHK-21与BHK-21/MRP1摄入量增加相似;用MRP1抑制剂MK571处理BHK-21/MRP1后,细胞C-AM摄入增长趋势不变;Gd@C82(OH)22对MRP1蛋白截短体及质膜微囊的ATP酶活性没有抑制作用。结论表明Gd@C82(OH)22可抑制哺乳动物细胞的外排转运,其抑制作用并不是通过抑制MRP1蛋白或ATP酶活性来实现的。 展开更多
关键词 Gd@C82(OH)22 转运蛋白 MRP1 ATP酶活性
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超声后RADA16-I短肽纳米纤维支架重组装及成胶的研究 被引量:2
2
作者 罗涵琳 张航与 +1 位作者 郑青 赵晓军 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第4期42-45,共4页
RADA16-I自组装短肽水溶液中形成纳米纤维并在盐离子作用下触发成水凝胶。RADA16-I纤维被大功率超声打断为小的原纤维片段。用AFM、CD和流变仪研究超声后纤维的重组装及其成胶性质。实验发现,超声未破坏纳米纤维二级结构,纤维仍保持β-s... RADA16-I自组装短肽水溶液中形成纳米纤维并在盐离子作用下触发成水凝胶。RADA16-I纤维被大功率超声打断为小的原纤维片段。用AFM、CD和流变仪研究超声后纤维的重组装及其成胶性质。实验发现,超声未破坏纳米纤维二级结构,纤维仍保持β-sheet构型,超声4h后,小片段重组装为500nm的纤维,纤维虽未恢复到原长度,但仍未丧失其触发成胶的能力,只是在相同触发时间内达不到超声前的储能模量G′。还研究了超声对纳米纤维和成胶性能的影响,并提出相应的分子模型,这有助于短肽生物材料的应用,并对淀粉样蛋白病变的机理有一定的启示作用。 展开更多
关键词 生物材料 纳米纤维 自组装短肽 重组装凝胶
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新型纳米材料及与前成骨细胞联合培养的实验研究 被引量:2
3
作者 盛宇 陆永志 +2 位作者 孙丽娟 陈立艳 赵晓军 《北京生物医学工程》 2009年第1期55-60,共6页
自组装的纳米纤维肽作为一种新型材料,被广泛应用于细胞的三维培养以及组织缺损的修复。本研究在传统自组装多肽RADA16—1(RAD16)的基础上,为成骨细胞体外培养构建了一种支架材料,即把细胞黏附基序arginine—glycine—aspartic(RG... 自组装的纳米纤维肽作为一种新型材料,被广泛应用于细胞的三维培养以及组织缺损的修复。本研究在传统自组装多肽RADA16—1(RAD16)的基础上,为成骨细胞体外培养构建了一种支架材料,即把细胞黏附基序arginine—glycine—aspartic(RGD)连接到RAD16上,再与纯RAD16按比例混合,构成本实验的研究材料Hybrid。用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)观察材料的微观结构。通过相差显微镜、MTT、组织化学染色等工具或方法观察成骨细胞(MC3T3-E1)在材料中的生长、增殖和分化情况。结果显示,Hybrid可以形成良好的纳米纤维结构。与RAD16相比,这种改进的纳米材料可以促进细胞的增殖,且碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达呈强阳性,有明显的钙结节形成。实验表明该材料在骨组织工程方面有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 Arg—Gly—Asp(RGD) RADA16.1 生物材料 前成骨细胞 复合培养
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浸提分离法提取皂素清洁工艺研究 被引量:4
4
作者 毛楠 黄文 +2 位作者 籍国东 李华 王家文 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期937-940,共4页
提出一种通过溶剂提取将游离皂苷与淀粉、纤维等成分分离,从源头上减少用水量、耗酸量和污染物排放量的皂素清洁生产工艺。首先对溶剂提取条件进行优化,得出最佳工艺条件为:90%(体积比)乙醇溶液,料液比1∶7,沸腾回流提取3 h,重复提取3... 提出一种通过溶剂提取将游离皂苷与淀粉、纤维等成分分离,从源头上减少用水量、耗酸量和污染物排放量的皂素清洁生产工艺。首先对溶剂提取条件进行优化,得出最佳工艺条件为:90%(体积比)乙醇溶液,料液比1∶7,沸腾回流提取3 h,重复提取3次。然后通过气-质联用(GC/MS)分析了皂素废水的有机物组成。研究结果表明,清洁工艺皂素产率为1.51%(降低3.82%),用酸量比传统工艺减少了71%,头道液COD浓度降低了46%,每100 g原料排放的COD总量下降了84%;皂素废水的有机物污染物主要为糠醛及其衍生物,清洁工艺废水的有机物含量更低,更易降解。 展开更多
关键词 黄姜 皂素 废水
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纤维蛋白和高分子混合支架的研究及其对大鼠骨髓间充质干细胞增长的影响
5
作者 郑青 卢永波 +1 位作者 罗涵琳 赵晓军 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第3期372-376,共5页
通过混合纤维蛋白原和凝血酶溶液与不同量(0、1、2、4 mg)的PLGA无纺丝制得力学强度提高的生物混合支架,检测各组支架对大鼠骨髓间充质干细胞(rMSC)增长的影响。用扫描电镜观察各组支架都具有多孔且孔间相通的特性。根据收缩溶胀的测量... 通过混合纤维蛋白原和凝血酶溶液与不同量(0、1、2、4 mg)的PLGA无纺丝制得力学强度提高的生物混合支架,检测各组支架对大鼠骨髓间充质干细胞(rMSC)增长的影响。用扫描电镜观察各组支架都具有多孔且孔间相通的特性。根据收缩溶胀的测量,混入PLGA的纤维蛋白支架收缩率明显小于未混合PLGA的支架。检测各组的压缩模量,混合PLGA的支架压缩模量大于未混合的支架,其差异均具有统计学意义。选择具有多向分化潜能的rMSC在混合支架上的生长,进行DNA荧光检测法测得细胞增长值,在混合PLGA无纺丝1 mg的支架上rMSC增长效果最好。实验证明纤维蛋白混合三维支架维持原纤维蛋白支架内部多孔隙三维结构,而且增大了支架的力学强度,在一定程度上提高了骨髓间充质干细胞在支架上的增长,在组织工程中是具有潜力的细胞生长三维支架。 展开更多
关键词 纤维蛋白 生物相容性 三维支架 力学强度 骨髓间充质干细胞
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动物源杂合肽P18对白血病K562细胞的致死作用研究
6
作者 唐成康 赵晓军 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第3期324-328,共5页
通过其致死白血病K562细胞过程,对动物源杂合肽P18的分子结构与功能进行了研究。MTT实验表明P18显著致死K562细胞;Western blot实验和流式细胞分析提示P18导致K562细胞坏死,而非依赖于caspases的传统凋亡;荧光探针标记后,观察到P18显著... 通过其致死白血病K562细胞过程,对动物源杂合肽P18的分子结构与功能进行了研究。MTT实验表明P18显著致死K562细胞;Western blot实验和流式细胞分析提示P18导致K562细胞坏死,而非依赖于caspases的传统凋亡;荧光探针标记后,观察到P18显著增加K562细胞的膜通透性;圆二(CD)图谱分析,在模拟细胞膜环境的溶液中,P18分子出现α-螺旋。综上所述,P18肽分子可能在细胞膜微环境的介导下产生α-螺旋,产生或暴露了肽分子的破膜结构,导致膜通透性显著增加,最终导致K562细胞的坏死。 展开更多
关键词 肽P18 凋亡 坏死 质膜 通透性 二级结构
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大鼠HSPB7蛋白的表达、活性研究及抗体制备
7
作者 王竞 赵晓军 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期596-599,共4页
目的克隆SD大鼠热休克蛋白HSPB7基因,通过原核表达、纯化获得HSPB7蛋白,对其活性进行初步研究,并制备其多克隆抗体,为进一步研究HSPB7蛋白奠定基础。方法从SD大鼠心脏组织中提取总RNA,经逆转录PCR得到HSPB7基因,亚克隆入pET-43.1a(+)载... 目的克隆SD大鼠热休克蛋白HSPB7基因,通过原核表达、纯化获得HSPB7蛋白,对其活性进行初步研究,并制备其多克隆抗体,为进一步研究HSPB7蛋白奠定基础。方法从SD大鼠心脏组织中提取总RNA,经逆转录PCR得到HSPB7基因,亚克隆入pET-43.1a(+)载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,获得可溶性表达产物。经纯化、质谱鉴定后进行生物学活性研究,并用纯化蛋白免疫新西兰兔,分离血清,Westernblot法测定抗体效价和特异性。结果原核表达载体pET-43.1a-HSPB7成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相对分子质量(Mr)约18600的HSPB7蛋白,纯化蛋白经质谱鉴定正确。HSPB7具有分子伴侣活性,这种活性具有温度依赖性。用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔,制备的多克隆抗体效价达1∶16000,且具有较强免疫特异性。结论得到具有生物学活性的大鼠HSPB7蛋白,成功制备了兔抗大鼠HSPB7蛋白的多克隆抗体,为后续研究提供了重要的实验材料。 展开更多
关键词 热休克蛋白HSPB7 原核表达 抗体制备
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荧光光谱对自组装多肽作为药物载体的初步研究 被引量:5
8
作者 林娟 周庆翰 赵晓军 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第10期2792-2797,共6页
为解决疏水性药物普遍存在的因水中溶解度低而给药困难、生物利用度低的问题,采用了新型两亲性自组装多肽RGA16(Ac-RADAGAGARADAGAGS-NH2)作为载体包裹和释放疏水性模型药物。以芘为模型疏水性药物,以鸡蛋卵磷脂脂质体模拟细胞膜,通过... 为解决疏水性药物普遍存在的因水中溶解度低而给药困难、生物利用度低的问题,采用了新型两亲性自组装多肽RGA16(Ac-RADAGAGARADAGAGS-NH2)作为载体包裹和释放疏水性模型药物。以芘为模型疏水性药物,以鸡蛋卵磷脂脂质体模拟细胞膜,通过稳态荧光光谱表征和测定芘的存在形式和浓度。两亲性自组装多肽RGA16能够在水溶液中稳定模型疏水性药物芘的晶体。扫描电镜图像显示多肽RGA16与芘晶体相互吸引,两者形成10μm以上大小的复合体。在机械搅拌下多肽RGA16与水溶液中的芘相互作用5d左右形成稳定的胶体混悬液(多肽-芘复合体)。被多肽包裹时,芘以晶体的形式存在。而当与EPC脂质体溶液混合时,芘可从多肽的包裹中以分子形式释放到EPC的双层膜中。芘从自组装多肽所稳定的胶态晶体向EPC脂质体释放的过程采用连续时间扫描稳态荧光光谱加以观察。通过将释放过程中芘单体的荧光强度与标准曲线相比较,确定了特定时间点EPC脂质体中芘的转移量。以上结果表明:该两亲性自组装多肽RGA16具有作为小分子量疏水性药物载体的潜力。 展开更多
关键词 两亲性多肽 药物载体 荧光光谱 EPC脂质体
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自组装短肽对角膜碱烧伤的作用 被引量:4
9
作者 陈立艳 张颖慧 +4 位作者 赵珍 盛宇 赵颖异 孙丽娟 赵晓军 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第1期69-72,共4页
目的研究自组装短肽材料1%RADA16-I水溶液对大鼠和兔角膜碱烧伤的作用。方法用1mol/LNaOH溶液造SD大鼠和兔角膜碱烧伤模型,左眼每日滴加短肽水凝胶10μl(2次/d),右眼为空白对照。在烧伤后的不同时间段(7、10、14d)处死大鼠,第7d处死兔,... 目的研究自组装短肽材料1%RADA16-I水溶液对大鼠和兔角膜碱烧伤的作用。方法用1mol/LNaOH溶液造SD大鼠和兔角膜碱烧伤模型,左眼每日滴加短肽水凝胶10μl(2次/d),右眼为空白对照。在烧伤后的不同时间段(7、10、14d)处死大鼠,第7d处死兔,取角膜行HE染色,光学显微镜观察结果。结果短肽水凝胶治疗组角膜上皮重生较快,皮下纤维排列较好,空白对照组皮下仍有较大空洞,皮下纤维排列紊乱,说明短肽材料能促进角膜恢复。 展开更多
关键词 角膜 碱烧伤 自组装短肽
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自组装短肽在脊髓急性创伤早期减少细胞凋亡的研究 被引量:3
10
作者 吕斐 王松涛 +2 位作者 王婷 刘燕飞 赵晓军 《四川动物》 CSCD 北大核心 2010年第2期180-183,F0002,共5页
目的为研究在脊髓急性损伤中,自组装短肽溶液对创伤后神经组织的保护作用及创伤后早期神经组织细胞凋亡的时间分布规律。方法实验使用了手术切断大鼠脊髓胸段T8至T10作为脊髓损伤动物模型,使用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记(TUNEL... 目的为研究在脊髓急性损伤中,自组装短肽溶液对创伤后神经组织的保护作用及创伤后早期神经组织细胞凋亡的时间分布规律。方法实验使用了手术切断大鼠脊髓胸段T8至T10作为脊髓损伤动物模型,使用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记(TUNEL)技术,检测实验后不同时间点的损伤脊髓组织细胞凋亡情况。结果伤后2h,损伤区及邻近段开始出现末端标记阳性细胞;伤后8h,凋亡阳性细胞数达高峰;同时,自组装短肽实验组细胞凋亡较空白对照组少。结论自组装短肽溶液对急性脊髓创伤组织具有保护作用。 展开更多
关键词 自组装短肽 RADA16—1 脊髓损伤 细胞凋亡
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RADA16-I纳米短肽水凝胶力学强度的调控 被引量:1
11
作者 张航与 罗涵琳 +1 位作者 郑青 赵晓军 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期33-35,共3页
研究了RADA16-I纳米短肽的二级结构和微观形态及其在不同溶液触发下形成的水凝胶的力学强度。试验结果表明,该短肽在水溶液中形成典型的β-sheet结构,这对其形成纳米纤维十分重要。此外,研究发现采用不同的溶液触发得到的水凝胶的力学... 研究了RADA16-I纳米短肽的二级结构和微观形态及其在不同溶液触发下形成的水凝胶的力学强度。试验结果表明,该短肽在水溶液中形成典型的β-sheet结构,这对其形成纳米纤维十分重要。此外,研究发现采用不同的溶液触发得到的水凝胶的力学强度可在一定范围内变化,符合DLVO理论。这可为组织工程提供强度可调控的纳米纤维支架材料。 展开更多
关键词 自组装 短肽 水凝胶 纳米纤维 生物材料
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纳米自组装肽作为液体栓塞剂在大鼠动脉瘤模型中的应用 被引量:1
12
作者 何昱 刘敬平 +1 位作者 鲁立 赵晓军 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第21期4073-4076,共4页
背景:使用液体栓塞剂栓塞动脉瘤是治疗动脉瘤的一种有效的方法。理想的栓塞剂应具有无毒,组织相容性好,并能有效诱导相应的细胞向材料内生长而达到永久性栓塞动脉瘤的特性。目的:探讨纳米自组装材料RADA16-Ⅰ在大鼠颈总动脉瘤中作为液... 背景:使用液体栓塞剂栓塞动脉瘤是治疗动脉瘤的一种有效的方法。理想的栓塞剂应具有无毒,组织相容性好,并能有效诱导相应的细胞向材料内生长而达到永久性栓塞动脉瘤的特性。目的:探讨纳米自组装材料RADA16-Ⅰ在大鼠颈总动脉瘤中作为液体栓塞剂的可行性。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-03/09在四川大学华西医院科技园完成。材料:RADA16-Ⅰ粉末由上海波泰生物公司合成,醋酸纤维素聚合物购自国药集团化学试剂有限公司。方法:①体外实验:流变仪频率扫描测量短肽10g/L RADA16-Ⅰ水溶液与PBS等体积混合前后的流变学特性。②动物手术:15只Wistar大鼠随机分为3组,10g/L RADA16-Ⅰ组,醋酸纤维素聚合物组,假手术组各5只。麻醉后,小心剥离右侧颈总动脉,并向颈总动脉结扎处2mm近心端注入RADA16-Ⅰ或醋酸纤维素聚合物溶液。假手术组只结扎动脉,不进行栓塞治疗。主要观察指标:①应用TA Instruments Advantage软件分析10g/L RADA16-Ⅰ流变学特性。②术后14d取右侧颈总动脉,制备切片进行苏木精-伊红染色和Masson染色;同时10g/L RADA16-Ⅰ组进行抗平滑肌α-actin抗体免疫组织化学检测。结果:①加入PBS的10g/L RADA16-Ⅰ水凝胶更接近标准的弹性体行为。②假手术组大鼠颈总动脉血管壁明显增厚;醋酸纤维素聚合物组血管壁变薄,管腔内为呈粉色(苏木精-伊红染色)或蓝色(Masson染色);RADA16-Ⅰ组血管壁增厚,血管壁新生内膜细胞向管腔内生长,栓塞材料降解,长入动脉瘤管腔的细胞主要为α-actin阳性的血管平滑肌细胞。结论:RADA16-Ⅰ作为一种液体栓塞剂是可行的。 展开更多
关键词 颈总动脉瘤 液体栓塞剂 纳米自主装材料 RADA16-Ⅰ
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天蚕素A-爪蟾素2杂合肽P18对MDA-MB-435s乳腺癌细胞的作用研究 被引量:2
13
作者 孙彬斌 赵晓军 《四川动物》 CSCD 北大核心 2010年第1期41-44,共4页
目的研究天蚕素A-爪蟾素2杂合肽P18对体外培养的人类乳腺癌细胞株MDA-MB-435s的活性作用。方法采用MTT法检测P18对体外培养的MDA-MB-435s细胞增殖的影响;使用Live/Dead Viability/Cytotoxicity试剂盒对细胞进行染色,并在荧光显微镜下观... 目的研究天蚕素A-爪蟾素2杂合肽P18对体外培养的人类乳腺癌细胞株MDA-MB-435s的活性作用。方法采用MTT法检测P18对体外培养的MDA-MB-435s细胞增殖的影响;使用Live/Dead Viability/Cytotoxicity试剂盒对细胞进行染色,并在荧光显微镜下观察细胞的存活状态;通过DiBAC4(3)染色,以荧光分光光度计检测给肽时细胞膜的膜电位变化;在透射电子显微镜下观察P18作用24h后细胞超微结构的变化。结果MTT试验表明P18对MDA-MB-435s细胞的增殖具有浓度依赖性的抑制作用;荧光显微镜下可观察到P18可以使MDA-MB-435s细胞膜破损,细胞死亡;P18作用时,荧光分光光度计检测到MDA-MB-435s的细胞膜发生了去极化现象;透射电子显微镜下可见大量细胞崩解坏死。结论杂合肽P18能够引起MDA-MB-435s细胞膜的通透性改变而导致细胞坏死。 展开更多
关键词 P18 天蚕素A 爪蟾素2 乳腺癌细胞MDA—MB-435s 细胞膜通透性
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原子力显微镜下丝素纤维及丝素蛋白的形态结构研究 被引量:1
14
作者 赵珍 陈立艳 赵晓军 《四川动物》 CSCD 北大核心 2008年第6期974-977,共4页
利用原子力显微镜(AFM)、透射电镜(TEM)、圆二色谱仪(CD)等手段,研究了家蚕丝素纤维及丝素蛋白的形态结构,并尝试通过改变丝素蛋白溶液的酸碱性来观测其形态变化。结果表明,丝素纤维表面有许多沟槽和条纹,具有原纤结构特征;许多直径为20... 利用原子力显微镜(AFM)、透射电镜(TEM)、圆二色谱仪(CD)等手段,研究了家蚕丝素纤维及丝素蛋白的形态结构,并尝试通过改变丝素蛋白溶液的酸碱性来观测其形态变化。结果表明,丝素纤维表面有许多沟槽和条纹,具有原纤结构特征;许多直径为20~50nm的圆形或椭圆形颗粒分子形成丝素蛋白的微观形态。在不同的酸碱条件下,球状颗粒分子具有不同的聚集方式,形成不同的微观形态。 展开更多
关键词 丝素纤维 丝素蛋白 形态结构 原子力显做镜
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利用斑马鱼胚胎快速鉴定真核质粒中目的基因表达的研究
15
作者 范建超 赵成建 +2 位作者 王晓飞 任斌 杨寒朔 《四川动物》 CSCD 北大核心 2011年第6期871-875,共5页
目的建立利用斑马鱼胚胎快速鉴定真核质粒中目的基因表达的实验体系。方法选20枚斑马鱼受精卵,在显微镜下每隔1h记录胚胎的发育情况。另选250枚单细胞期斑马鱼胚胎,平均分成5组,一组胚胎作为对照,剩余4组分别向胚胎的单细胞内注射pEGFP-... 目的建立利用斑马鱼胚胎快速鉴定真核质粒中目的基因表达的实验体系。方法选20枚斑马鱼受精卵,在显微镜下每隔1h记录胚胎的发育情况。另选250枚单细胞期斑马鱼胚胎,平均分成5组,一组胚胎作为对照,剩余4组分别向胚胎的单细胞内注射pEGFP-N1(真核表达质粒)、pCMV-DsRed-Express2(真核表达质粒)、pET28-GFP(原核表达质粒)、pET28-RFP(原核表达质粒)质粒,在不同时间点连续观察绿色荧光及红色荧光的表达情况。另选600枚单细胞期斑马鱼胚胎,平均分成3组,一组胚胎作为对照,一组向胚胎单细胞内注射pEGFP-N1质粒,另外一组向胚胎单细胞内注射pEGFP-N1-MUC1外源基因融合重组质粒,注射4h后在荧光显微镜下观察绿色荧光的表达情况,并用RT-PCR的方法检测目的基因MUC1mRNA的转录情况。结果注射pEGFP-N1、pCMV-DsRed-Express2真核表达质粒的胚胎,注射4h后分别观察到很强的绿色荧光及红色荧光;注射pET28-GFP、pET28-RFP原核表达质粒的胚胎,10h内都未观察到绿色荧光及红色荧光;注射pEGFP-N1-MUC1外源基因融合质粒,注射4h后同样观察到很强的绿色荧光,且用RT-PCR方法检测到目的基因MUC1很强的表达。结论利用斑马鱼胚胎鉴定真核重组质粒中目的基因的表达情况是一种快速、有效的实验体系。 展开更多
关键词 斑马鱼 快速鉴定 真核质粒 基因表达
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一种蛛丝短肽自组装形成的分形结构纳米材料(英文)
16
作者 袁峰 王顺康 赵晓军 《高分子材料科学与工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第10期171-174,共4页
文中将会描述一种来源于蜘蛛丝MiSp1蛋白序列的九肽经过自组装过程所形成的树枝状分形结构材料。通过原子力显微镜(AFM)和透射电子纤维镜(TEM)分别观测到了该分形结构,通过KCl的添加与否和调节溶液的pH值可以控制该分形结构的形成... 文中将会描述一种来源于蜘蛛丝MiSp1蛋白序列的九肽经过自组装过程所形成的树枝状分形结构材料。通过原子力显微镜(AFM)和透射电子纤维镜(TEM)分别观测到了该分形结构,通过KCl的添加与否和调节溶液的pH值可以控制该分形结构的形成。圆二色谱仪(CD)的检测结果表明,在KCl存在的条件下,九肽组装体的二级结构为无规则卷曲结构,并且在20℃-80℃的范围内比较稳定。该发现不仅提供了一种新型材料,也使人们对于蜘蛛丝的形成过程有了更进一步的理解,这对于微观结构材料的构建有重要的参考价值,其应用方面的研究正在进行。 展开更多
关键词 蛛丝短肽 自组装 分形 分形维数 纳米材料
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三维丝素蛋白/羟基磷灰石支架的生物学性能 被引量:2
17
作者 赵勇 曾泉 +1 位作者 陈静 陈治清 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期859-863,共5页
综合运用丝素蛋白纤维网的非编织制作方法和仿生矿化法,构建三维多孔丝素蛋白/纳米羟基磷灰石复合支架.通过体外蛋白酶降解和成骨细胞培养,对支架材料的生物学性能进行初探.发现蛋白酶对丝素蛋白降解的作用大小依次为,蛋白酶K>胰蛋白... 综合运用丝素蛋白纤维网的非编织制作方法和仿生矿化法,构建三维多孔丝素蛋白/纳米羟基磷灰石复合支架.通过体外蛋白酶降解和成骨细胞培养,对支架材料的生物学性能进行初探.发现蛋白酶对丝素蛋白降解的作用大小依次为,蛋白酶K>胰蛋白酶>α-糜蛋白酶>Ⅰ型胶原酶.所构建的支架显示出良好的生物相容性并能促进成骨细胞生长和分化.三维多孔丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架可望成为新型有机/无机复合生物材料,为骨组织工程支架的设计提供了新的思路. 展开更多
关键词 骨组织工程 仿生矿化 细胞培养 降解 丝素蛋白
原文传递
光照与温度对拟南芥tak基因表达与LHC磷酸化的影响 被引量:6
18
作者 蒋佳宏 王东 +2 位作者 胡源 高秀 杜林方 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1202-1207,共6页
TAK1和TAK2是拟南芥核基因编码的蛋白激酶,TAK1可能参与植物状态转换中LHCⅡ蛋白磷酸化的调控.根据TAK1蛋白序列,合成了一段含12个氨基酸残基的亲水短肽,与牛血清白蛋白(BSA)偶联并免疫家兔得到TAK1抗体.经免疫双扩散和蛋白质印迹检测,... TAK1和TAK2是拟南芥核基因编码的蛋白激酶,TAK1可能参与植物状态转换中LHCⅡ蛋白磷酸化的调控.根据TAK1蛋白序列,合成了一段含12个氨基酸残基的亲水短肽,与牛血清白蛋白(BSA)偶联并免疫家兔得到TAK1抗体.经免疫双扩散和蛋白质印迹检测,该多肽抗体效价和特异性较高.借助TAK1抗体以及磷酸化抗体进行杂交试验,结合特异引物进行半定量PCR,研究了光照与温度对拟南芥tak1和tak2基因表达的影响.结果表明,光强与温度调节LHCⅡ蛋白磷酸化,也会在转录水平和蛋白质水平上影响tak1和tak2基因表达.LHCⅡ蛋白磷酸化对光响应趋势与TAK1蛋白水平变化相同.此外,低光照促进tak2基因表达,tak2基因转录表达受温度的影响较小.tak1和tak2基因表达调控方式不同,可能与启动子响应元件的不同相关. 展开更多
关键词 TAK1 TAK2 LHC Ⅱ磷酸化 合成多肽 基因表达 光照与温度影响
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拟南芥TAK蛋白激酶的结构预测与功能分析 被引量:3
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作者 蒋佳宏 王东 +1 位作者 胡源 杜林方 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期610-614,共5页
TAK1、TAK2和TAK3属于TAK蛋白激酶家族,由拟南芥核基因编码,其中TAK1参与了主要捕光色素复合物LHCⅡ蛋白磷酸化调控与光系统的状态转移.本文使用生物信息学手段对TAK1、TAK2和TAK3蛋白进行了较为系统的分析,发现TAK1、TAK2和TAK3为单次... TAK1、TAK2和TAK3属于TAK蛋白激酶家族,由拟南芥核基因编码,其中TAK1参与了主要捕光色素复合物LHCⅡ蛋白磷酸化调控与光系统的状态转移.本文使用生物信息学手段对TAK1、TAK2和TAK3蛋白进行了较为系统的分析,发现TAK1、TAK2和TAK3为单次跨膜蛋白,具有保守的激酶活性域、疏水性强的N端跨越类囊体膜、亲水性高的C端处于基质中等特点.在PDB中找到了不少与TAK1、TAK2和TAK3同源性大于30%的蛋白序列,其中大部分也带有酪氨酸激酶保守域,使用同源建模的方法,建立了拟南芥蛋白激酶TAKs核心结构域的三维结构,围绕蛋白激酶的结构和作用机制关系进行了探讨,设计出多肽抗体,并进行蛋白印迹检测抗体的专一性,为TAKs蛋白激酶进一步的功能研究奠定了基础. 展开更多
关键词 TAK 磷酸化 LHCII 核心结构域 同源建模 抗体
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藻酸盐凝胶三维培养条件下牛胰岛素-转铁蛋白-硒钠对兔关节软骨细胞表型的影响 被引量:4
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作者 宋鸿 张兰兰 赵晓军 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期159-162,共4页
目的探讨牛胰岛素-转铁蛋白-硒钠(ITS)对藻酸盐凝胶三维培养条件下兔关节软骨细胞表型的影响。方法分离培养兔关节软骨细胞,将单层培养的P2代细胞接种于藻酸盐凝胶中,分别在DMEM培养液中加入10%胎牛血清(FBS)、0.2%FBS+1%ITS、1%ITS即设... 目的探讨牛胰岛素-转铁蛋白-硒钠(ITS)对藻酸盐凝胶三维培养条件下兔关节软骨细胞表型的影响。方法分离培养兔关节软骨细胞,将单层培养的P2代细胞接种于藻酸盐凝胶中,分别在DMEM培养液中加入10%胎牛血清(FBS)、0.2%FBS+1%ITS、1%ITS即设为FBS组、ITS/FBS组,ITS组行DNA、蛋白聚糖(GAG)含量测定及组织化学检测。结果软骨细胞在藻酸盐凝胶中始终保持球形样外观,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色呈阳性。3组GAG合成无显著性差异(P>0.05)。培养的第6天ITS组DNA含量低于FBS组(P<0.05),第12天低于ITS/FBS组和FBS组(P<0.05)。结论ITS可促进藻酸盐凝胶中软骨细胞的增殖,并保持其表型。 展开更多
关键词 牛胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸盐 软骨细胞 关节 藻酸盐
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