猪干扰素-γ基因在大肠杆菌中的克隆表达及其活性测定

目的在大肠杆菌中高效表达重组猪干扰素γ(porcineinterferongamma,poIFN-γ),并对其抗病毒活性进行初步研究。方法选择大肠杆菌偏爱密码子人工合成了猪干扰素-γ成熟蛋白编码基因,克隆至原核表达载体pQE30中,IPTG诱导表达,表达产物经变性、复性、纯化后,测定其抗病毒活性。结果目的蛋白以包涵体的形式在大肠杆菌中获得高表达,表达量占总菌体蛋白的84.5%,纯化后的纯度达到95%以上,在PK15细胞上抗滤泡性口炎病毒比活性为6.2×105U/mg。结论PoIFN-γ基因在大肠杆菌中得到了高效表达,表达产物具有抗病毒活性。

小鼠肝细胞胰岛素与EGF信号转导磷蛋白质组的动力学行为对比分析

目的分析小鼠肝细胞内胰岛素与表皮生长因子(EGF)信号转导磷蛋白质组的动力学行为差别,以此找出两者关键性的信号蛋白。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,进行分析比较EGF与胰岛素分别介导的磷酸化蛋白质组的动力学行为。结果参与两者信号转导的磷蛋白质种类没有多大差异,大多数信号磷蛋白磷酸化水平的动力学行为也表现为一致性,但有4个蛋白点其磷酸化水平随时间变化趋势明显不同。结论胰岛素与EGF虽然在多方面有许多相似之处,但在同一细胞内参与信号转导的个别信号蛋白其磷酸化水平的动力学行为差别较大,估计这些蛋白就是导致EGF与胰岛素最终生物学活性有所不同的关键蛋白。

分化抑制因子蛋白家族研究进展

Id蛋白（Id）即分化抑制因子或DNA结合抑制因子，属于螺旋-环-螺旋（helix-loop-helix，HLH）转录因子家族，它显性负调控碱性螺旋-环-螺旋（bHLH）转录因子活性。从而抑制细胞分化，促进细胞增殖。Id蛋白广泛存在于哺乳动物细胞中，包括Id1、Id2、Id3、Id4四种亚型。Id蛋白在人类多种肿瘤中异常表达。并参与肿瘤细胞的增生、分化、凋亡、侵袭，在肿瘤的发生、发展及转移中有重要作用。