泸州医学院附属医院小儿烧伤流行病学分析

笔者对2002年1月-2006年12月本单位收治的烧伤患儿流行病学情况进行回顾性分析，旨在了解小儿烧伤的流行病学特征。

中药喷浸治疗顽固性烧伤残余创面

目的 探讨中药治疗烧伤残余创面。方法 用黄连等13味中药煎熬戍液，创面清洁后。用中药液纱布半暴露，不定时用中药液喷浸创面，以保持创面浸湿。结果 用该法治疗烧伤残余创面22例，面积40％～5％，经12～21d治疗，创面愈合。结论 黄连等13味中药液喷浸是治疗烧伤残余创面行之有效的方法。

物理治疗方法促进牵引成骨新骨形成的研究进展

牵引成骨术（distractionosteogenesis，D0）是利用一定的牵引力刺激，使骨的裂隙或切开的骨组织被逐渐牵开而在牵引间隙内形成新骨，从而达到延长骨骼长度及修复骨骼缺损的目的^[1]，因其能在原位快速成骨，因而是一种复杂的分子生物学过程^[2]。

内毒素/脂多糖及烧伤血清对豚鼠肠道平滑肌细胞离子通道的影响

目的观察内毒素/脂多糖(LPS)及烧伤血清对豚鼠结肠带平滑肌细胞钙激活钾通道(KCa)的影响,探讨烧伤后发生胃肠动力障碍的分子电生理机制。方法用急性酶分离法获取单个健康豚鼠结肠带平滑肌细胞,在对称性高钾溶液中采用细胞膜片钳单通道记录技术,分别记录细胞贴附式膜片(电极位于细胞膜外面)和内面向外式膜片(电极位于细胞膜内面)上的电流。引出的电流信号经转换器转换,输入计算机,用离子通道计算机分析系统进行数据处理,并测定以下指标：(1)电流幅值(CA)；(2)开放概率(PO)；(3)开放时间(OT)；(4)关闭时间(CT),以检测其特性并鉴定是否为KCa。确定为KCa后,向浴液中分别加入20、40、60、80、100 mg/L的LPS,观察LPS对两种膜片方式上KCa的影响。在浴液中分别加入正常血清和烧伤血清,观察血清对KCa的影响。结果在对称性高钾溶液中,豚鼠结肠带平滑肌细胞内面向外式膜片上的KCa电导值为(271±7)ps,是高电导的离子通道。随着膜去极化及细胞内Ca^(2+)增加,通道PO增加,该通道可被细胞外低浓度的钾通道阻断剂四乙胺(TEA,1 mmol/L)所阻断,而膜内面较高浓度的TEA(40 mmol/L)对该通道无阻断作用,证实为KCa。当Ca^(2+)为0 mol/L时,向浴液中分别加入20、40、60、80、100 mg/L的LPS,两种膜片方式KCa活性随LPS浓度的增加而增加。40 mg/L以上的LPS对KCa具有明显激活作用,通道PO显著增加(P＜0．05或0．01),用不含LPS的浴液灌流后亦不能回转。两种膜片方式下烧伤血清对KCa有激活作用,而正常血清无此作用。结论LPS和烧伤血清可通过激活肠道平滑肌细胞KCa抑制肠道蠕动。

局部应用重组水蛭素对家兔耳静脉淤血皮瓣成活的影响

目的观察局部应用重组水蛭素对家兔耳静脉淤血皮瓣成活的影响。方法选取健康普通大耳白兔18只，按照随机数字表法分为对照组、低分子肝素治疗组、重组水蛭素治疗组，每组6只。各组家兔麻醉后在左耳背制作静脉淤血皮瓣模型：皮瓣大小为6cm×3cm，以耳中心动脉为惟一血供、1cm宽蒂部为惟一静脉回流途径。术后分别于皮瓣下多点均匀注射1mL生理盐水、低分子肝素（625U）、重组水蛭素（1U），皮瓣原位缝合。观察皮瓣外观并计算成活率；术后1、3、5、7d取皮瓣远端组织检测血栓素B2含量。对数据行单因素方差分析、t检验。结果各组家兔皮瓣完全坏死区域毛发脱落明显；术后皮瓣均肿胀明显，远端淤血形成，对照组颜色明显深于2个治疗组。术后1d重组水蛭素治疗组1只家兔、低分子肝素治疗组2只家兔、对照组4只家兔出现明显血肿。低分子肝素治疗组、重组水蛭素治疗组家兔皮瓣成活率分别为（92．3±1．7）％、（94．8±1．9）％，均高于对照组[（77．9±1．2）％，F=191．29，P〈0．05]。2个治疗组家兔皮瓣成活率接近（t=2．75，P〉0．05）。术后3、5d，2个治疗组家兔血栓素B2含量均明显低于对照组（t值为6．68～30．55，P值均小于0．01），而2个治疗组家兔血栓素B2含量接近（t值分别为1．22、6．44，P值均大于0．05）。结论局部应用低分子肝素或重组水蛭素，可明显改善家兔皮瓣的静脉淤血，提高皮瓣成活率。

大黄对烫伤大鼠胃肠激素变化的影响

目的了解严重烫伤大鼠早期血浆中胃肠激素的变化及大黄对胃肠激素水平的影响。方法88只Wistar大鼠随机分为正常对照组（8只）、烫伤对照组（40只，Ⅲ度烫伤后管饲蒸馏水）、烫伤治疗组（40只，Ⅲ度烫伤后管饲大黄水提液）。于烫伤后6、12、24、48、72h取大鼠腹腔静脉血，用放射免疫法检测血浆胃动素（MTL）、P物质、血管活性肽（VIP）、生长抑素（SS）的含量。结果（1）正常对照组大鼠MTL和P物质分别为（198±28）、（61±10）ng／L；烫伤对照组明显下降，最低值分别为（110±15）、（30±5）ng／L，而后缓慢上升，72h达高峰，但仍未恢复正常（P〈0．05）；烫伤治疗组MTL和P物质下降趋势明显变缓，各时相点均高于烫伤对照组，伤后48h已达正常水平，72h分别为（232±32）、（73±11）ng／L，明显高于正常对照组（P〈0，05）。（2）正常对照组大鼠VIP和ss分别为（35±6）、（30±5）ng／L；烫伤对照组呈明显上升趋势，伤后6h分别为（70±12）、（49±9）ng／L（P〈0．01），而后缓慢下降但72h时仍高于正常水平（P〈0．05）；烫伤治疗组VIP和SS上升趋势幅度较小，各时相点均低于烫伤对照组，48h恢复至正常水平；VIP达最高值的时间推迟至伤后12h。结论大黄对严重烫伤大鼠早期血浆中胃肠激素的分泌和释放有明显的调控作用。

烫伤对大鼠结肠平滑肌细胞骨架的影响

目的观察烫伤后早期大鼠结肠平滑肌细胞骨架(CSL)含量及形态学的改变,初步探讨烧伤后胃肠动力障碍的发生机制及其临床意义。方法将70只成年健康Wistar大鼠随机分为正常对照组(10只,不烫伤);烫伤组(60只,于背部造成10 cm×7 cm的深Ⅱ度创面)。烫伤组大鼠于伤后1、3、6、12、24、48 h处死,另处死正常对照组大鼠,取结肠起始段组织,分作2份,一份于透射电镜下观察CSL的形态学变化;一份经急性酶分离法获得平滑肌细胞悬液,加入异硫氰酸荧光素标记的抗大鼠肠道平滑肌CSL微丝肌动蛋白抗体,采用流式细胞仪检测荧光强度以反映平滑肌细胞内CSL含量的变化。结果透射电镜显示:烫伤组大鼠伤后1-3 h结肠平滑肌细胞内丝状纤维分布混乱、稀疏,密斑分布不均,6-12 h CSL形态、分布等逐步趋于平稳,24 h则逐步恢复正常,48 h时与正常对照组相似。烫伤组大鼠肠道平滑肌CSL含量于伤后1 h明显升高(610±23),此后逐渐降低, 3 h已明显低于正常对照组(92±17),约12 h开始逐渐回升,24 h已超过正常对照组,且呈上升趋势持续至48 h,组间比较差异有统计学意义(P<0．05或0．01)。结论烫伤后早期可出现明显的肠道平滑肌CSL含量及形态学的改变,此过程体现了机体的修复与损伤力量抗衡的动态变化。此外,肠道平滑肌CSL含量的变化可能是导致伤后其细胞动力功能出现异常、肠道功能紊乱、肠壁结构受损的重要机制之一。

烫伤血清对大鼠结肠平滑肌细胞骨架的影响

目的 了解烫伤血清对体外培养的大鼠结肠平滑肌细胞骨架的影响,初步探讨伤后胃肠动力障碍的可能机制. 方法 分离培养健康成年Wistar大鼠结肠平滑肌细胞.另取2只健康成年Wistar大鼠,其中1只不致伤,另一只致深Ⅱ度烫伤,采集2只大鼠血液分离血清,用培养液配成体积分数20%的烫伤血清和体积分数20%的正常血清.采用随机数字表法将大鼠平滑肌细胞分为烫伤血清组和正常血清组,分别用2种血清培养.于处理1、3、6、12 h时（每组每时相点样本数均为10）,用流式细胞仪检测细胞肌动蛋白表达水平,并采用蛋白质印迹法检测β微管蛋白的相对含量.对数据行t检验. 结果 （1）烫伤血清组细胞处理1、3、6、12 h时,肌动蛋白荧光强度分别为59±4、26±6、39±6、42±6,正常血清组分别为95±10、91±10、102±9、97±9,组间比较,差异均有统计学意义（t值分别为10.528、18.069、18.748、16.647,P＜0.05或P＜0.01）;烫伤血清组组内比较,处理3 h时降至最低点,6、12 h持续回升.（2）烫伤血清组处理1、3、6、12 h时,β微管蛋白的相对含量分别为14.44±0.26、8.61±0.19、11.76±0.31、12.13±0.29;正常血清组分别为22.37±1.15、21.87±1.79、23.24±1.55、21.99±2.02,组间比较差异有统计学意义（t值分别为21.176、23.365、23.000、15.273,P值均小于0.01）;烫伤血清组组内比较,处理3 h时达最低,6、12 h有所回升但势头缓慢.结论 烫伤血清作用初始阶段,可使体外培养的大鼠肠道平滑肌细胞骨架含量减少,随后细胞骨架含量呈回升趋势,这可能与平滑肌细胞对烫伤血清刺激的耐受、适应和自我修复有关.

两种生长因子联合应用对大鼠缺血皮瓣成活的影响

血管内皮生长因子（VEGF）可调节血管生长中的内皮细胞外基质溶解和内皮细胞迁移、增生及管腔形成。碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）能够诱导内皮细胞萌芽、增殖，增加血管通透性。二者按一定方式联合使用能否起到促血管生长的协同作用？为此，笔者将二者联合应用，观察其对大鼠缺血皮瓣血供恢复及血管重建的影响。

烫伤大鼠结肠动力基本功能单位细胞损害和内质网应激研究

目的了解严重烫伤大鼠结肠壁内神经运动末梢-肌间丛cajal间质细胞（ICC）-平滑肌细胞超微结构改变以及葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12（caspase-12）表达情况，探讨其在烫伤大鼠结肠动力损伤中的可能机制。方法采用简单随机法将50只SD大鼠分为烫伤组（40只）：大鼠造成30％TBSAⅢ度烫伤，伤后腹腔注射乳酸林格液（50mg／kg）复苏。于伤后3、6、12、24h处死大鼠，在距盲肠约5cm处剪取近端结肠4cm肠管，取中间各1cm分别用体积分数3％戊二醛及体积分数10％甲醛固定。对照组（10只）除不烫伤外，其余处理同烫伤组。取戊二醛固定的标本，透射电镜下观察大鼠肠道细胞变化情况。取甲醛固定的标本，采用免疫组织化学法检测结肠壁中GRP78和caspase-12的表达。结果透射电镜下，对照组大鼠结肠平滑肌细胞排列整齐，肌细胞内细胞器丰富，核居中，常染色质均匀，线粒体嵴较多、滑面内质网较少，肌间丛神经元细胞器丰富，紧邻肌间丛神经元可见ICC；烫伤组肠道平滑肌细胞形状不规则，排列紊乱，核周隙增宽，细胞内有溶解性大空泡，线粒体空泡样变，嵴溶解、固缩，粗面内质网扩张并部分溶解，ICC核周细胞质明显减少。烫伤组伤后3、6、12h GRP78评分分别为（4．3±0．9）、（6．0±0．7）、（4．8±1．1）分，均高于对照组[（2．4±0．7）分，P〈0．05]；烫伤组伤后6～24h caspase-12评分均高于对照组（P〈0．05）。对照组细胞均有GRP78表达，烫伤组强度染色主要出现在黏膜和肌间神经丛、间质细胞，而平滑肌细胞多呈轻中度染色。烫伤后3、12hGRP78呈阳性表达，伤后6h呈强阳性。caspase-12在伤后3h阳性表达不明显，伤后6、24h表达呈弱阳性，伤后12h表达呈阳性；对照组未见caspase-12表达。结论严重烫伤后大鼠结肠壁内神经运动末梢-肌间丛ICC-平滑肌细胞存在明显病理改变，这与内质网过度应激启动caspase—12凋亡通路致细胞损伤可能有关。