用PCR法检测某化工厂患足癣工人皮损处真菌的实验研究

[目的]评价聚合酶链反应(PCR)技术直接从临床诊断为足癣的化工厂工人皮损处检测真菌的方法。[方法]采用蛋白酶K消化法和煮沸法处理标本,从中提取真菌DNA,然后用以源于医学机会性致病性真菌18srDNA保守区的一对寡核苷酸序列B2F(5′-ACTTTCGTAGGATAG-3′)和B4R(5′-TGATCGTCTTCGATAAATA-3′)为通用引物进行PCR扩增检测,并与直接镜检和培养法进行对比。[结果]在208例临床诊断为足癣的某化工厂工人皮损处皮屑中,用PCR检出真菌阳性者193例(92.79%),检出的真菌菌种为红色毛癣菌、絮状表皮癣菌和须癣毛癣菌;用培养法检测真菌阳性者186例(89.42%),检出的真菌菌种为红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌和犬小孢子菌;真菌直接镜检检出阳性者141例(67.79%)。[结论]用PCR法检测化工厂工人的足癣具有快速诊断的价值,并且具有较好的敏感性、特异性和准确性,可用于化工企业工人患足癣后进行真菌的常规检测和诊断。

人巨细胞病毒抑制粒-单及红系祖细胞的体外增殖及干预研究

探讨人巨细胞病毒 (HCMV)抑制脐血粒 -单系祖细胞的 (CFU GM)、红系爆式祖细胞 (BFU E)及红系祖细胞 (CFU E)的体外增殖和黄芪注射液与更昔洛韦(GCV)对此的干预作用 ,采用造血祖细胞体外培养、聚合酶链反应 (PCR)技术 ,培养、观察、计数CFU GM、BFU E及CFU E集落产率、抑制率、提高率 ,集落峰值时间和集落维持时间 ,并用PCR检测集落细胞内HCMV DNA。结果显示 :①HCMVAD169对CFU GM、BFU E及CFU E均有抑制作用 ,其抑制作用与HCMV浓度有关 ,高浓度 ( 1∶1 0 ,1 1 0 0 )感染组与对照组比较集落产率明显下降 (P <0 0 1 ) ,集落维持的时间明显缩短 (P <0 0 1 ) ,集落峰值时间无明显差异 (P >0 0 5) ,而低浓度组 ( 1∶1 0 0 0 )无此作用 ;②PCR检测发现在HCMV感染的造血祖细胞内存在HCMV DNA ;③在 1∶1 0感染组中 ,加入黄芪注射液与更昔洛韦后 ,HCMVAD169感染的CFU GM、BFU E及CFU E集落产率明显增加 (P <0 0 1 )。结论 :①造血祖细胞是HCMVAD169的宿主细胞之一 ,HCMVAD169能直接感染造血祖细胞 ;②在体外HCMVAD169对CFU GM、BFU E、CFU E的生长 ,集落形成有明显的抑制作用 ;③黄芪与更昔洛韦有抗HCMV作用 。