7种微小RNA检测试剂的多中心评估

目的评估某品牌7种微小RNA(miRNA)检测试剂盒的检测性能。方法采用多中心横向联合评价方法,在全国范围内选择10家检测中心在同一时间使用同一批样本,对同一批号试剂进行性能评估。检测项目为miR-21、miR-26a、miR-27a、miR-122、miR-192、miR-223和miR-801,以miR-1228为内参。评估参数包括精密度、符合率、检出限和抗干扰能力。结果10家检测中心检测8种miRNA的循环阀值(Ct)的批内变异系数(CV)均<5.00%,批间CV均<6.50%。10家检测中心检测20例临床血浆样本的总符合率均为100.00%(20/20),对50拷贝/μL标准参考品的检出率均为100.00%(20/20)。血红蛋白200 g/L、胆红素1000μmol/L和三酰甘油100 mmol/L对检测结果无明显干扰。结论该试剂盒检测7种miRNA的精密度、符合率、检出限和抗干扰能力表现良好,可满足不同地区、不同实验室和不同检测系统的使用需求和预期用途,具有一定的临床应用价值。

m6A去甲基化酶ALKBH5在形觉剥夺性近视豚鼠中的表达变化及其意义

目的探讨形觉剥夺性近视(FDM)豚鼠视网膜中m6A去甲基化酶AlkB同源蛋白5(ALKBH5)表达变化及其参与近视的作用机制。方法采用随机数字表法将30只健康SPF级3周龄三色豚鼠分为正常对照组和实验组,每组15只。实验组中眼罩遮盖右眼作为FDM组,暴露左眼为自身对照组。分别于实验前及实验1、2、3和4周时进行豚鼠眼生物学参数测量。采用带状光检影镜测量屈光度,采用A型超声仪测量眼轴长度。实验4周,通过免疫组织化学染色和免疫荧光染色检测ALKBH5在豚鼠视网膜中的表达分布。采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测豚鼠视网膜中ALKBH5 mRNA和蛋白表达情况。结果与正常对照组和自身对照组相比,实验2、3和4周,FDM组豚鼠近视屈光度明显增加,眼轴显著增长,差异均有统计学意义(均P<0.001)。免疫组织化学染色和免疫荧光染色显示,ALKBH5分布在视网膜神经纤维层、视锥视杆细胞层和视网膜色素上皮(RPE)层,其中以神经纤维层和RPE层为主。正常对照组、自身对照组和FDM组豚鼠ALKBH5蛋白相对荧光强度值分别为1.000±0.204、0.874±0.076和0.571±0.053,FDM组视网膜中ALKBH5蛋白荧光强度值明显小于正常对照组和自身对照组,差异均有统计学意义(t=4.069,P=0.006;t=5.176,P=0.014)。造模后4周,FDM组豚鼠视网膜中ALKBH5 mRNA和蛋白相对表达量明显低于正常对照组和自身对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论FDM组豚鼠视网膜中m6A去甲基化酶ALKBH5表达下降,ALKBH5及相关m6A甲基化修饰可能参与了近视的发生和发展。

叶酸受体阳性循环肿瘤细胞结合肿瘤标志物对肺癌诊断的研究

目的探讨叶酸受体阳性循环肿瘤细胞(FR^(+)-CTC)单独及联合肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)辅助诊断肺癌的有效性。方法收集2019年12月至2022年10月于四川省人民医院就诊的肺部结节患者的临床资料,根据结节的病理性质分为良性组188例和恶性组412例。分析FR^(+)-CTC与肺癌之间的关系,探讨联合检测肿瘤标志物对肺癌的诊断价值。结果恶性组FR^(+)-CTC水平高于良性组;恶性组中不同病理类型、TNM分期、临床分期患者的FR^(+)-CTC水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。FR^(+)-CTC在单独诊断肺癌的灵敏度、特异性均显著优于两种肿瘤标志物,联合诊断后FR^(+)-CTC在诊断肺癌的特异性方面有提升(P<0.05)。结论FR^(+)-CTC对于肺癌的诊断能力突出,可对患者病情进展、预后评估提供参考;联合肿瘤标志物能够提升诊断肺癌的特异性。

Ⅳ型菌毛可视化方法及其在菌毛功能研究中的应用

Ⅳ型菌毛(type Ⅳ pili,TFP)作为细菌表面的重要蛋白结构,是细菌的感知器官及运动器官,在细菌生理学、细胞黏附、宿主细胞入侵、DNA摄取、蛋白质分泌、生物被膜形成、细胞运动和电子传递等方面发挥着多种作用。近年来,随着研究方法的深入和技术设备的发展,尤其是随着多种菌毛可视化工具的开发,越来越多的研究揭示了它在生命活动中的各种功能,大大加快了微生物单细胞领域的研究步伐。本文重点讨论了TFP可视化方法及在菌毛功能研究中的应用,为更好地研究和利用TFP功能提供更多的思路,为其未来在生物学、医学以及生态学中的应用提供一定的理论基础。