miR-324-5p靶向调控CARD9对急性胰腺炎腺泡细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨微小RNA-324-5p(miR-324-5p)靶向调控胱天蛋白酶募集域蛋白(CARD)9对急性胰腺炎(AP)腺泡细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法采用雨蛙肽处理大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J构建急性胰腺炎模型。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)与Western印迹技术分别检测miR-324-5p、CARD9 mRNA及蛋白表达。应用脂质体转染技术分别将miR-NC、miR-324-5p mimic、si-NC、si-CARD9转染入AP腺泡AR42J细胞,噻唑蓝(MTT)与流式细胞仪分别检测AR42J细胞增殖及凋亡。双荧光素酶报告实验验证CARD9与miR-324-5p的作用关系。Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、Bcl-2、Bax、酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3蛋白表达。结果雨蛙肽素处理后AR42J细胞中miR-324-5p表达水平显著低于对照组,而CARD9 mRNA及蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05);分别转染miR-324-5p mimic、si-CARD9后,由雨蛙肽素诱导的AR42J细胞凋亡明显受到抑制,而细胞增殖能力明显增强,CyclinD1、Bcl-2蛋白表达上调,p21、p27、Bax、酶切caspase-3蛋白表达下调(均P<0.05);CARD9是miR-324-5p的靶基因;CARD9过表达逆转了miR-324-5p过表达对雨蛙肽诱导的胰腺炎腺泡细胞AR42J增殖和凋亡的作用。结论miR-324-5p可通过抑制CARD9表达进而促进AR42J细胞增殖,抑制细胞凋亡。

丙泊酚对重症急性胰腺炎大鼠模型肺损伤的保护作用

目的 观察丙泊酚对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型肺损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组) 20只,重症急性胰腺炎组(SAP组) 20只和丙泊酚组(P组) 20只。通过胰管逆行注入5%牛磺胆酸钠构建SAP模型,P组在构建SAP模型前0. 5 h经股静脉持续注射丙泊酚(5 mg/kg),Sham组仅注射等量生理盐水。造模成功后12 h,处死各组大鼠并取材。比较各组大鼠肺脏大体病理变化,光镜下肺组织病变,肺湿/干重比,支气管肺泡灌洗液中性粒细胞百分比,肺组织炎症因子[细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平以及丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)或有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)(ERK1/2)蛋白表达情况。结果 相对于Sham组,SAP组大鼠肺湿/干重比、中性粒细胞水平明显升高(P <0. 05),肺组织ICAM-1、IL-18和TNF-α水平明显升高(P <0. 05),AKT和MAPK(ERK1/2)蛋白表达明显升高(P <0. 05)。相对于SAP组,P组大鼠肺脏大体病理变化和光镜下肺组织病变均较轻,肺湿/干重比、中性粒细胞百分比明显较小(P<0. 05),肺组织ICAM-1、IL-18和TNF-α水平明显较低(P <0. 05),AKT和MAPK(ERK1/2)蛋白表达明显较弱(P <0. 05)。结论 丙泊酚对SAP大鼠模型肺损伤具有保护作用,其作用机制可能与阻断AKT或MAPK(ERK1/2)信号通路、降低炎症因子水平有关。

MASP-2基因多态性与肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎住院短期预后的关联

目的探讨甘露糖醇结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)基因多态性与肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎(SBP)住院短期预后的关联性。方法选择四川省人民医院肝胆外科2017年12月-2020年12月收治肝硬化合并SBP患者80例为研究对象,根据患者入院后30 d临床结局,将其分为存活组和死亡组。患者均在入院当天清晨抽取外周血,采用聚合酶链式扩增反应对MASP-2基因rs61735600位点目的片段进行扩增,采用酶联免疫吸附法检测血清中MASP-2、甘露糖醇结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP-1)、甘露糖醇结合凝集素(MBL)蛋白水平。结果死亡组肝硬化病程、腹水持续时间高于存活组(P<0.05);哈迪-温伯格遗传平衡检验结果显示,存活组和死亡组SBP患者MASP-2基因rs61735600位点理论值和实际值分布比较差异无统计学意义;死亡组MASP-2基因rs61735600位点AA基因型、A等位基因频率高于对照组,GG基因型、G等位基因频率低于存活组(P<0.05);死亡组SBP患者入组当天血清MASP-2、MASP-1以及MBL水平高于存活组(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果发现肝硬化病程、腹水持续时间和MASP-2基因rs61735600位点多态性均为影响肝硬化合并SBP患者入院30 d预后的影响因素(P<0.05)。结论MASP-2基因rs61735600位点AA基因型增加肝硬化SBP患者住院30 d死亡风险,其机制可能与影响血清MASP-2、MASP-1以及MBL水平有关。