依托咪酯对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞损伤的影响

目的 探讨依托咪酯对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响。方法 将人CHON-001软骨细胞分为空白组(常规培养基培养)、模型组(用10 ng·mL^(-1) IL-1β培养)、高剂量实验组(用5μmol·L^(-1)依托咪酯+10 ng·mL^(-1) IL-1β培养)、抑制药组[用5μmol·L^(-1)无翅型MMTV整合位点家族成员3a(Wnt3a)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路抑制药IWR-1-endo+10 ng·mL^(-1) IL-1β培养]、抑制药+高剂量实验组(用10 ng·mL^(-1) IL-1β+5μmol·L^(-1)依托咪酯+5μmol·L^(-1) IWR-1-endo培养)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞的增殖情况,用膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)染色法检测细胞凋亡情况;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中促炎因子的含量;用蛋白质印迹法测定基质金属蛋白酶(MMP)-13、Ⅱ型胶原(COL2A1)、聚集蛋白聚糖(ACAN)、Dickkopf相关蛋白1(DKK-1)的蛋白表达水平。结果 空白组、模型组、高剂量实验组、抑制药组、抑制药+高剂量实验组的细胞活力分别为(100.20±5.40)%、(51.33±3.62)%、(77.28±4.87)%、(80.10±5.21)%和(88.42±6.37)%,细胞凋亡率分别为(3.21±1.14)%、(28.09±4.51)%、(15.60±3.85)%、(13.76±2.31)%和(8.09±0.98)%,TNF-α水平分别为(58.80±4.73)、(143.23±11.39)、(96.71±10.50)、(89.27±7.86)和(71.42±5.43)pg·mL^(-1),IL-6水平分别为(99.70±6.51)、(202.55±14.88)、(131.33±12.40)、(123.42±9.31)和(102.07±6.78)pg·mL^(-1),MMP-13蛋白表达水平分别为0.26±0.03、0.88±0.05、0.51±0.02、0.43±0.05和0.22±0.03,COL2A1蛋白表达水平分别为0.90±0.04、0.17±0.03、0.54±0.06、0.67±0.03和0.81±0.08,ACAN蛋白表达水平分别为0.85±0.06、0.15±0.02、0.42±0.05、0.58±0.04和0.83±0.06;DKK-1蛋白表达水平分别为0.89±0.05、0.16±0.02、0.39±0.05、0.49±0.03和0.71±0.05。模型组上述指标与空白组比较,高剂量实验组上述指标与模型组比较,抑制药+高剂量实验组上述指标与高剂量实验组、抑制药组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 依托咪酯可能通过Wnt3a/β-catenin通路对IL-1β损伤的人CHON-001软骨细胞发挥保护作用。