川芎嗪调控miR⁃31⁃5p/Ednrb通路抑制人肺泡上皮细胞BEAS⁃2B凋亡和炎症反应

目的探讨川芎嗪(TMP)调控miR⁃31⁃5p/内皮素受体B(Ednrb)通路对人肺泡上皮细胞BEAS⁃2B凋亡和炎症反应的影响。方法采用1μg/mL脂多糖(LPS)处理BEAS⁃2B细胞构建炎症模型。将BEAS⁃2B细胞分为对照组、LPS组、LPS+川芎嗪5μmol/L组、LPS+川芎嗪20μmol/L组、LPS+川芎嗪80μmol/L组、LPS+miR⁃con组、LPS+miR⁃31⁃5p组、LPS+si⁃con组、LPS+si⁃Ednrb组、LPS+川芎嗪+pcDNA组、LPS+川芎嗪+pcDNA⁃Ednrb组。酶连免疫吸附实验(ELISA)试剂盒检测细胞培养液中白介素IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α(肿瘤坏死因子)的含量;RT⁃qPCR和Western blot检测miR⁃31⁃5p(炎性相关微小RNA)和Ednrb(内皮素受体B)表达。双荧光素酶报告实验和Western blot验证miR⁃31⁃5p对Ednrb的靶向调控关系。结果与对照组比较,LPS组BEAS⁃2B细胞Ednrb蛋白、凋亡率以及IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的水平增加,miR⁃31⁃5p表达降低(P<0.01);与LPS组比较,LPS+川芎嗪5μmol/L组、LPS+川芎嗪20μmol/L组、LPS+川芎嗪80μmol/L组BEAS⁃2B细胞Ednrb蛋白表达、凋亡率以及IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的水平降低,miR⁃31⁃5p表达升高(P<0.05,P<0.01)。miR⁃31⁃5p靶向负性调控Ednrb表达。与LPS+miR⁃con组比较,LPS+miR⁃31⁃5p组BEAS⁃2B细胞凋亡率以及IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的水平降低(P<0.01);与LPS+si⁃con组比较、LPS+si⁃Ednrb组BEAS⁃2B细胞凋亡率以及培养液中IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的水平降低(P<0.01);与LPS+川芎嗪+pcDNA组比较,LPS+川芎嗪+pcDNA⁃Ednrb组BEAS⁃2B细胞凋亡率、培养液中IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的浓度升高(P<0.05)。结论川芎嗪通过上调miR⁃31⁃5p/Ednrb通路抑制人肺泡上皮细胞BEAS⁃2B凋亡和炎症反应。