切除大网膜对阿尔茨海默病小鼠的神经保护作用

目的 探讨大网膜对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)认知障碍及β淀粉样蛋白(amyloid β,Aβ)负荷的影响。方法 选取3月龄转基因和野生型雌鼠各6只分别为转基因组和野生型组,选取6只3月龄转基因雌鼠,手术切除大网膜,建立转基因-大网膜切除(OR)组,各组小鼠9月龄时采用Morris水迷宫进行定位航行和空间探索实验,采用6E10抗体免疫组织化学染色和刚果红染色检测脑内Aβ,采用刚果红染色检测小鼠脑淀粉样血管病(CAA)。采用普鲁士蓝染色检测小鼠脑内微出血。采用抗神经元核抗原(NeuN)+神经元轴突抗体(MAP2)抗体双重标记免疫荧光检测小鼠脑内神经元与轴突。结果 转基因-OR组逃逸潜伏期和逃逸距离明显低于转基因组,但明显高于野生型组,穿越平台时间明显高于转基因组(P<0.05)。转基因-OR组刚果红和6E10抗体免疫组织化学染色阳性总面积、刚果红和6E10抗体染色阳性颗粒数明显低于转基因组[(0.20±0.02)%vs(0.50±0.04)%,(0.85±0.05)%vs(1.65±0.04)%,(21.65±1.52)个/mm^(2)vs(39.05±1.65)个/mm^(2),(56.75±4.21)个/mm^(2)vs(74.94±2.92)个/mm^(2),P<0.05],但明显高于野生型组(P<0.05)。转基因-OR组CAA面积和CAA计数、脑微出血计数明显低于转基因组,NeuN、MAP2抗体总面积明显高于转基因组(P<0.05)。结论 切除大网膜减轻AD小鼠空间学习记忆能力损害,减少脑内Aβ负荷,抑制AD特征性病理改变,提示大网膜在AD发生发展中可能起着重要作用。

油樟叶挥发油的镇痛活性研究

采用水蒸汽蒸馏法提取四川宜宾产油樟叶中挥发油,气相色谱-质谱联用仪鉴定油樟叶挥发油的主要化学成分,然后根据电热板和醋酸扭体实验研究不同剂量的油樟叶挥发油对小鼠疼痛阈值的影响。GC-MS结果显示,油樟叶挥发油主要含1,8-桉叶油素、α-萜品醇和香桧烯等26个主要化学成分,其中1,8-桉叶油素含量占58.55%。油樟叶挥发油中、低剂量组可延长小鼠对热致痛的痛阈时间,高、中剂量组可显著减少小鼠醋酸致痛扭体次数,镇痛百分率分别为74.69%和73.11%,与对照组呈极显著差异。

初诊系统性红斑狼疮患者血清25羟维生素D与炎性细胞因子的相关性

目的探讨25羟维生素D(25-OH-VitD)在中国汉族初诊系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血的水平及其与α2干扰素(IFN-α2)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10和IL-17A的相关性。方法收集86例初诊SLE患者和73例健康对照组血清。分别采用ELISA检测25-OH-VitD,Luminex液相芯片技术检测IFN-α2、IL-6、IL-10和IL-17A水平。采用Spearman检验分析25-OH-VitD与细胞因子、临床表现及C3、24 h尿蛋白定量的相关性。结果 SLE患者血清25-OH-VitD水平明显低于对照组。SLE患者血清25-OH-VitD水平与补体C3水平正相关,与IL-17A水平和24 h尿蛋白定量水平负相关;而与IFN-α2、IL-6和IL-10无相关性。结论初诊SLE患者血清25-OH-VitD水平降低,并与IL-17A有负相关关系。

呼吸道合胞病毒对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响

目的探讨 RSV 感染诱导哮喘发作的新的免疫机制。方法选用40只清洁级 Balb/c 小鼠,随机分组。分别采用不同的方法制备哮喘组(OVA)、哮喘合并 RSV 感染组(OVA/RSV)、单纯 RSV 感染组(RSV)及对照组(NS)动物模型。所有小鼠于末次激发后24 h 取右肺中叶标本作病理切片,观察炎症改变;部分通过mRNA 原位杂交鉴定肺部 RSV 感染情况;同时收集外周抗凝血,通过流式细胞仪分析及酶联免疫吸附试验(ELISA)测定 CD4^+CD25^+调节性 T 细胞占 CD4^+T 细胞的百分比和血浆中 IL-10和 TGF-β_1水平。结果①OVA、RSV 组外周血 CD4^+CD25^+调节性 T 细胞百分率明显降低(P<0.01),OVA/RSV 组降低更加明显。②与 NS 组相比,IL-10水平在 OVA 组明显降低(P<0.005),RSV 组无明显变化(P=0.65),OVA/RSV 组则明显升高(P<0.005)。③TGF-β_1水平在 OVA 组较对照组明显降低(P<0.01),OVA/RSV 组降低更加明显。④各组外周血CD4^+CD25^+调节性 T 细胞百分率与 IL-10、TGF-β_1无相关性(P>0.005)。结论①哮喘小鼠体内 CD4^+CD25^+调节性 T 细胞和 IL-10、TGF-β_1数量和分泌水平降低,可能是导致哮喘发生的原因之一。②在哮喘基础上合并 RSV感染可进一步减少 CD4^+CD25^+调节性 T 细胞数量和 TGF-β_1分泌水平,可能是病毒感染诱发和加重哮喘的原因之一。③外周血中 CD4^+CD25^+调节性 T 细胞仅部分由 IL-10、TGF-β诱导产生,其相互间的变化水平是综合因素影响的结果。[临床儿科杂志,2008,26(10):885-889]

2型糖尿病患者血清RBP4与颈动脉内膜中层厚度的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清RBP4与颈动脉内膜中层厚度(IMT)的关系。方法将54例2型糖尿病患者根据颈动脉内膜中层厚度分成轻度组(IMT<1.0mm,33例)和重度组(IMT≥1.0mm或存在硬化斑块,21例),测定血清RBP4、空腹血糖、糖化血红蛋白、空腹胰岛素、血脂,并与健康体检者进行比较。分析颈动脉IMT与RBP4及其他危险因素的相关性。结果2型糖尿病患者血清RBP4水平显著高于对照组,重度组RBP4水平明显增高。血清RBP4与IMT呈显著正相关。结论在T2DM患者中,血清RBP4增高与动脉粥样硬化的形成有关,血清RBP4增加可望作为评估动脉粥样硬化的血清学标志。

硫酸镁对食道癌根治术患者全麻苏醒期躁动的影响

目的观察硫酸镁用于食道癌根治术患者全麻苏醒期躁动的有效性及安全性。方法采用随机双盲对照设计,2015年10月~2016年3月行择期食道癌根治术的全麻患者,随机分为硫酸镁组(试验组)和生理盐水组(对照组)。所有患者均采用全凭静脉麻醉,诱导结束后,硫酸镁组以0.1 m L/(kg·h)(2.5 g硫酸镁加入50 m L生理盐水,泵注速度为5 mg/(kg·h))持续泵注硫酸镁,而对照组以相同的速度持续泵注生理盐水,直至手术结束。记录患者躁动,疼痛,肌张力评分,拔管时间,恢复室停留时间以及术后不良反应,术后Mg^(2+),Ca^(2+),K+浓度。采用SPSS17.0软件进行统计分析。结果共纳入108例患者,其中硫酸镁组57例,对照组51例。硫酸镁组在恢复室(PACU)的躁动评分、疼痛评分、肌张力评分明显低于对照组,停药后拔管时间明显长于对照组(P<0.05)。两组患者术前Ca^(2+)浓度明显高于术后,且对照组术前Mg^(2+)浓度明显高于术后,硫酸镁组术后Mg^(2+)浓度明显高于对照组术后(P<0.05)。硫酸镁组术前及术后Mg^(2+)浓度无明显差异(P>0.05)。两组在PACU停留时间、入PACU即时苏醒期躁动评分,术前术后K+浓度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论食道癌根治术中泵注5 mg/(kg.h)硫酸镁,能明显减少患者苏醒期躁动的发生且不会出现肌力恢复延迟,电解质紊乱等并发症。

糖皮质激素对哮喘小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞和TLR4表达的影响

目的探讨糖皮质激素对哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Tr)及Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法将雌性BALB/c小鼠30只按随机数字表法分成正常对照组(NS)、哮喘组(OVA)和哮喘糖皮质激素治疗组(OVA/GC)制备动物模型,每组10只。取小鼠左肺组织作病理切片观察炎症改变;同时应用流式细胞检测技术检测各组小鼠脾单个核细胞CD4+CD25+Tr占CD4+T细胞的百分率及CD4+CD25+Tr上的TLR4平均荧光强度。结果哮喘小鼠脾单个核细胞CD4+CD25+Tr百分率明显降低(P<0.01),但该细胞上表达的TLR4平均荧光强度值与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05);经糖皮质激素治疗后哮喘小鼠CD4+CD25+Tr百分率和该细胞上表达的TLR4平均荧光强度均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论糖皮质激素可促进哮喘小鼠CD4+CD25+Tr数量的增加及TLR4的表达,可能是治疗哮喘的免疫学机制之一。

罗格列酮联合二甲双胍治疗2型糖尿病对部分炎症因子及降糖作用的影响

目的观察罗格列酮联合二甲双胍对2型糖尿病的降糖作用以及炎症因子的影响。方法 48例符合入选条件的患者接受罗格列酮联合二甲双胍12周治疗。治疗前后测定患者空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)、标准餐后2 h血糖(2hPPG)和胰岛素(2hPINS)、高敏C反应蛋白(hCRP)、白介素6(IL-6),采用HOMA2model公式评价胰岛素敏感性。结果 12周时FPG、HbA1c和CRP均较治疗前基线时下降,差异有统计学意义(P<0.05);IL-6下降水平无统计学差异;胰岛素抵抗指数(HOMA2IR)显著低于治疗前(P<0.05)。结论罗格列酮联合双胍类药物治疗2型糖尿病在有效降低血糖水平,提高胰岛素敏感性的同时,能降低血中hCRP水平,IL-6无改变。

白介素17及单核细胞趋化因子-1与长程类风湿关节炎患者血管病变的相关性研究

目的研究长程类风湿关节炎(RA)患者血清白介素17(IL-17)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)与血管病变之间的相关性,进而探讨RA血管病变的发病机制。方法选择长程RA患者(RA组)及健康体检者(对照组)各94例,收集两组红细胞沉降率、C反应蛋白、类风湿因子、抗环瓜氨酸肽抗体、DAS-28等实验室指标,检测两组血清的IL-17和MCP-1浓度,采用动脉硬化测定仪检测肱-踝动脉脉搏波传导速度(ba PWV),分析各项指标与ba PWV的相关性。结果 RA组ba PWV、IL-17和MCP-1显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。多元回归分析显示ba PWV与年龄、心率、IL-17及MCP-1呈正相关(P<0.05),四种影响因素对多元回归方程贡献率分别为8.04%、1.36%、23.39%和14.97%。结论 RA患者的ba PWV、IL-17和MCP-1水平均显著高于对照组,且IL-17及MCP-1可能与RA的血管病变机制有关,IL-17有望成为一种筛查RA患者血管病变的指标。

三种一致性分析法在糖化血红蛋白测定系统临床评价中的应用

目的对国产和进口的两种糖化血红蛋白(Hb A1c)测定系统检测结果的一致性进行评估。方法 110份抗凝全血样本同时在美国Bio-Rad D-10型和某国产TH3600型Hb A1c分析仪进行检测。对两组测定结果分别采用回归分析、Kappa检验和Bland-Altman分析法比较一致性。结果回归分析显示两组结果有很好的线性相关;以回归方程作医学决定水平的偏倚分析,结果明显小于CAP室间质评允许的误差。Kappa检验显示两组结果几乎完全一致。两组结果差值的BlandAltman分析显示:在95%一致性界限以外,最大差值和最大相对误差可为临床接受。结论研究表明该国产设备与进口测试系统的Hb A1c检测结果具有很好的一致性,可作为临床实验室常规使用的选择。

Ⅱ型糖尿病合并脂肪肝患者血清淀粉样蛋白A水平的临床研究

目的探讨血清淀粉样蛋白A(SSA)在新诊断的Ⅱ型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者中的临床意义。方法将79例新诊断T2DM的分为NAFLD组患者39例,非NAFLD组患者40例,分别测定体质量指数(BMI)、腰臀比(W/H)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、血清淀粉样蛋白A(SSA)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI)。结果 NAFLD组患者的血清SSA以及BMI、W/H、ALT、AST、FINS、TG及HOMA-IR较非NAFLD组患者显著增高(P<0.01),NAFLD组的年龄I、SI、HDL显著降低(P<0.01)。新诊断的T2DM是否合并NAFLD与年龄、BMI、FINS及SSA有相关性(P<0.05)。SSA与BMI,FINS,W/H呈正相关(P<0.05)。结论 BMI、空腹胰岛素及SSA水平是新诊断的T2DM合并NAFLD的危险因素,并且BMI、腰臀比、空腹胰岛素水平与SSA水平具有相关性。

HLA-G分子在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨结直肠癌患者组织中HLA-G的表达及在结直肠癌诊断和预后中的作用。方法用免疫组织化学法检测201例结直肠癌患者组织,比较HLA-G分子表达及其与临床病理指标和生存率的关系。结果 HLA-G分子在结直肠癌患者的表达率为65%(130/201),HLA-G表达在肿瘤部位、肠壁浸润深度、淋巴结转移、疾病分期以及宿主免疫反应方面的差异有统计学意义(P <0. 05)。HLA-G阴性患者的生存率明显高于HLA-G阳性患者,HLA-G的表达是影响结直肠癌患者预后的独立因素(P <0. 05)。结论结直肠癌组织中HLA-G分子有较高表达,HLA-G表达与结直肠癌的预后有关。

Dectin-1 mRNA在寻常型银屑病患者皮损中的表达

目的检测寻常型银屑病患者皮损组织中dectin-1 mRNA的表达,探讨dectin-1在银屑病发病中的可能机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)检测15例寻常型银屑病患者皮损组织及15例正常皮肤组织中dectin-1 mRNA的表达。结果寻常型银屑病患者皮损中dectin-1 mRNA的表达为(0.01020±0.00686),较正常皮肤组织(0.00232±0.00073)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Dectin-1 mRNA表达水平在寻常型银屑病患者皮损中明显升高,其可能在寻常型银屑病患者皮肤局部免疫反应中起作用。

吡格列酮对Ⅱ型糖尿病并发冠心病患者血清视黄醇结合蛋白4的影响

目的观察吡格列酮对Ⅱ型糖尿病并发冠心病(T2DM)患者血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)的影响,并探讨其可能机制。方法随机选取T2DM合并冠心病患者60例,正常对照组30例。分别检测血清RBP4、肿瘤坏死因子(TNF-α)、脂联素、空腹血糖(FPG)和胰岛素(Ins)、体重指数(BMI)、血压(BP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)等指标,计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。再将60例T2DM并发冠心病患者分成吡格列酮治疗组28例和常规治疗组32例,吡格列酮治疗组用吡格列酮治疗8周,治疗前后均测定上述指标。结果①T2DM合并冠心病患者与对照组比较,血清RBP4水平增高(P<0.01);吡格列酮治疗组与常规治疗组比较,血清RBP4无差异(P>0.05)。②应用吡格列酮治疗后,患者血清RBP4水平显著降低(P<0.01),TNF-α、胰岛素水平下降(P<0.05),脂联素水平升高(P<0.05),IR明显改善。结论吡格列酮能降低T2DM并发心血管病患者血清RBP4水平,改善IR。

西格列汀对初诊2型糖尿病氧化应激水平的研究

目的观察单独使用二甲双胍或联合应用西格列汀对初诊2型糖尿病患者血糖波动和氧化应激水平的影响。方法初诊2型糖尿病患者60例,按随机数字表法分为2组,单药组30例,单纯给予二甲双胍治疗,联合组30例,给予西格列汀联合二甲双胍治疗。健康体检者26例为健康对照组。比较三组观察治疗前后糖化血红蛋白(HbA1C)、血丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,平均血糖波动幅度(MAGE)、日间血糖平均绝对值(MODD)。结果与健康对照组比较,治疗前单药组、联合组HbA1C、MDA均升高,SOD均降低(P<0.05);治疗后两组HbA1C、MDA、MAGE、MODD均较治疗前降低,SOD较治疗前升高(P<0.05),且联合组较单药组更明显(P<0.05)。结论西格列汀联合二甲双胍治疗初诊2型糖尿病,可减少血糖波动,减轻2型糖尿病患者体内的氧化应激水平。

UPLC/Q-TOF/MS分析研究P.petiolosa抑菌提取物

建立超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱检测有柄石韦抑菌成分的方法,用乙酸乙酯和水获取有柄石韦粗提物,Intersustain C18色谱柱、流动相A乙腈溶液和流动相B 0.1%甲酸水溶液等为色谱条件,正、负离子质量扫描范围均为50~1000,应用UPLC-XevoTM TQ MS进行物质鉴定。采用倍比稀释法进行山奈酚与圣草酚对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC测定。在柄石韦乙酸乙酯提取物中鉴定出19种化合物,其中山奈酚为高含量化合物之一,水提取物中鉴定出17种化合物,圣草酚为高含量化合物之一。山奈酚对S.aureus的MIC和MBC值分别是0.625 mg/mL和1.25 mg/mL,圣草酚分别是0.25 mg/mL和0.50 mg/mL。该UPLC/Q-TOF/MS法灵敏、准确、通量化,能为天然产物分析与应用提供研究基础。

BriCyte E6和Cytomics FC500流式细胞仪在T淋巴细胞亚群分析中的对比研究

目的对Bri Cyte E6流式细胞仪(简称E6)和Cytomics FC500流式细胞仪(简称FC500)的相关性、一致性和精密度进行比较及评价。方法选取202份新鲜抗凝静脉血,分别用两台流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群百分比及绝对计数值,观察相关性和一致性;另检测Immuno-Trol cells质控血,观察两台仪器的精密度。结果两台流式细胞仪测得的CD3^+细胞、CD3^+CD4^+细胞和CD3^+CD8^+细胞百分比和绝对计数值相关性均较好(R2均>0.98),但也都存在显著性差异(P值均<0.05)。Bland-Altman分析显示,两台仪器测得的CD3^+细胞、CD3^+CD4^+细胞和CD3^+CD8^+细胞百分比的偏倚较小,分别为0.52%、-0.50%、2.28%;绝对计数值的偏倚较大,分别为13.24%、12.21%、16.09%。E6的绝对计数值高于FC500。精密度实验显示,E6的精密度优于FC500,特别是两仪器绝对计数值的日间变异系数(CV)差异最大。结论在检测T淋巴细胞亚群百分比中,E6和FC500一致性较好。E6检测T淋巴细胞亚群绝对计数值精密度更高,操作简单且成本更低,可优先选择。

流式细胞术检测中性粒细胞CD64指数在鉴别早期感染性疾病中的临床价值分析

目的分析流式细胞术检测中性粒细胞CD64指数在鉴别早期感染性疾病中的临床价值。方法选取我院2015年10月至2017年4月期间收治的感染性疾病患者200例,根据感染严重程度分为早期局部感染组(n=120)和脓毒血症组(n=80),另选同期入院体检的健康志愿者50例作为对照组。所有研究对象均于入院后24~48h内及治疗前进行血常规WBC检测和CRP测定,采用流式细胞仪多参数分析中性粒细胞CD64(MESF)及中性粒细胞CD64指数,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线计算中性粒细胞CD64指数鉴别早期感染性疾病的灵敏度和特异性。结果对照组、早期局部感染组、脓毒血症组中性粒细胞CD64及血清CRP、WBC水平依次显著升高,各组差异有统计学意义(P<0.05)。早期局部感染组中性粒细胞CD64指数与血浆CRP、WBC水平呈正相关(P<0.05)。中性粒细胞CD64指数、CRP、WBC的曲线下面积分别为0.896、0.757、0.629(P均<0.05);与CRP、WBC相比,中性粒细胞CD64指数鉴别早期感染性疾病的灵敏度、特异性为97.39%、90.59%明显升高。结论分析外周血中性粒细胞CD64指数对于早期感染性疾病的鉴别诊断有重要价值,其诊断效能明显优于血常规WBC和CRP检测。

超声响应型纳米材料在抗炎治疗中的分类与应用

超声波作为一种具有优秀的组织穿透力的高频机械波,因其无创性和高效性,近年来不仅广泛应用于医学诊断成像中,也被证实在疾病治疗领域有着广阔的应用前景。小尺寸和高反应活性是超声响应型纳米材料的独特优势。该类材料具有在超声刺激下精准控制药物释放的能力,为提升药物治疗效率提供了新途径,因而受到了广大学者的关注。炎症是机体为应对损伤而产生的一种防御性反应,然而,炎症反应过度可能会导致多种机体组织损伤,甚至危及患者的生命。许多研究已证实利用超声响应型纳米材料控制炎症反应是一种可行的治疗方式。目前,超声响应型纳米材料在抗炎治疗中仍有瓶颈,如纳米材料的设计与合成过程复杂,纳米材料生物体内相容性与安全性等问题仍有待进一步验证等。本篇综述针对抗炎领域常见的超声响应型纳米材料进行了归纳与分类,并系统介绍了不同纳米材料的特性。另外,对于超声响应型纳米材料在骨骼疾病、皮肤与肌肉疾病、自身免疫性疾病与呼吸系统疾病等不同疾病中的抗炎应用也进行了阐述,以期为未来超声响应型纳米材料在抗炎领域的精准治疗、靶向递送、临床试验等方向的进一步研究和临床应用提供参考。

哮喘患儿CD4^+ CD25^+调节性T细胞及IL-10和TGF-β_1的变化

目的通过测定和分析哮喘急性发作期与缓解期儿童外周血中CD4+ CD25+调节性T淋巴细胞及其相关细胞因子白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β1)在哮喘发病中的变化情况,探讨哮喘发作的新的免疫机制。方法分别采集74例哮喘发作期和28例哮喘缓解期患儿及20例健康儿童外周静脉血,通过流式细胞仪分析及酶联免疫吸附试验(ELISA)测定CD4+ CD25+调节性T细胞占CD4+ T细胞的百分比和血浆中IL-10和TGF-β1水平。结果①哮喘发作期患儿外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞百分率及IL-10水平较缓解期及对照组明显降低(P<0.01),而哮喘缓解期明显升高接近正常水平;②哮喘急性发作期患儿TGF-β1水平较缓解期及对照组明显升高(P<0.05)。哮喘缓解期患儿TGF-β1水平明显降低,仍高于对照组水平;③哮喘发作期、缓解期及对照组各组之间CD4+ CD25+ T细胞百分率与IL-10、TGF-β1无相关性(P>0.05)。结论哮喘发作期患儿CD4+ CD25+调节性T细胞和IL-10数量和分泌水平降低、TGF-β1水平增高,导致了全身和局部对炎症反应的抑制作用减弱,可能是导致哮喘发作的原因之一。