微小RNA-378a对皮肤鳞癌细胞侵袭、迁移和CD226表达的影响

目的探讨微小RNA-378a(miR-378a)对皮肤鳞癌(CSCC)细胞侵袭、迁移和CD226表达的影响。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测CSCC细胞A431和人角质形成细胞HaCaT的miR-378a水平;将体外常规培养的A431细胞进行转染,根据转染物不同分为增强转染组(转染miR-378a mimics)、抑制转染组(转染miR-378a inhibitor)和空白转染组(无转染)。采用QPCR、活细胞计数(CCK)-8、AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术、Transwell细胞迁移和侵袭实验以及Western blotting检测miR-378a水平、增殖活力、凋亡率、穿膜细胞数和CD226水平;构建荧光素酶报告质粒psiCHECK-2,并采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-378a与CD226基因的靶向关系。结果与HaCaT细胞(1.089±0.197)相比,A431细胞的miR-378a水平升高至4.435±0.807(P<0.05)。与空白转染组的1.031±0.173相比,增强转染组的miR-378a水平升高至11.846±2.179,而抑制转染组则降低至0.162±0.040;与空白转染组相比,增强转染组转染48、72 h后的增殖活力升高,而抑制转染组则降低;与空白转染组的(7.464±1.281)%相比,增强转染组的凋亡率降低至(3.799±1.279)%,而抑制转染组则升高至(15.435±2.112)%;细胞侵袭实验中,与空白转染组的(62.704±5.639)个相比,增强转染组的穿膜细胞数升高至(89.401±6.358)个,而抑制转染组则降低至(17.346±2.954)个;细胞迁移实验中,与空白转染组的(84.227±5.478)个相比,增强转染组的穿膜细胞数升高至(102.139±7.930)个,而抑制转染组则降低至(54.448±13.068)个;与空白转染组的0.428±0.033相比,增强转染组的CD226水平降低至0.173±0.056,而抑制转染组则升高至0.695±0.020。以上组间差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-378a mimics和携带CD226野生型3’端非翻译区(3’UTR)质粒共转染时,荧光素酶活性显著下降(P<0.05);而当miR-378a mimics与携带CD226突变型3’UTR质粒共转染时,荧光素酶活性无显著变化(P>0.05)。结论CSCC细胞中miR-378a高表达并发挥促癌作用,下调该miRNA水平可抑制CSCC细胞增殖、迁移和侵袭能力并诱导凋亡,可能通过靶向CD226来发挥促癌作用,在CSCC靶向治疗中有一定的应用前景。

头皮浅表型基底细胞癌误诊1例

患者女,57岁。右侧顶部头皮反复破溃渗液5年。皮损组织病理示:核大、浆少的基底样细胞聚集成大小不等的团块状,周边细胞呈栅栏状排列,瘤体与周围组织间存在裂隙。诊断:浅表型基底细胞癌。予头皮肿瘤扩大切除术及植皮术,现已随访4月,恢复良好,无复发。