药物非临床研究应关注实验动物福利

为获得药物在生物机体的反应,推断人类用药是否安全有效,实验对象是实验动物,药物非临床研究工作者已认识到实验动物对实验结果的影响很重要。但实际工作中许多人仍没建立关注实验福利的理念,树立这种理念对我们的研究结果,以及人类对待实验动物的态度是很重要的。

含吐温-80中药注射液对犬致过敏的研究

目的:探讨含吐温 80的热可宁注射液引起犬过敏的原因。方法:受试药给Beagle犬前肢静脉滴注,观察分别给与含与不含0 .3 %吐温 80的生理盐水和热可宁注射液所致犬过敏反应、体温变化和心电图变化。结果:0 .3 %吐温 80生理盐水和含0 .3 %吐温 80的热可宁注射液各犬均出现3级以上过敏反应,并有体温下降和心率加快,在停药后10 0～3 0 0分钟内消失。结论:吐温80可引起犬过敏,体温下降,心率增快。

实验Beagle犬血液学及血液生物化学参考值的探讨

目的了解不同产地、不同年龄Beagle犬血液学及血液生物化学的参考值,使实验结果更加准确。方法利用法国产BSAIC半自动血液生化分析仪和德国产全自动血球计数仪Medicon4000对不同产地、两个年龄段Beagle犬10项血液生化值和9项血液常规值进行测定。结果与文献报道的结果一致;与正常人参考值比较,除ALP较高外,结果均在正常范围内波动。结论建议在实验选择动物时,要密切注意实验动物的来源及年龄的一致性。

鼻康胶囊抗炎、镇痛作用研究

目的 :观察鼻康胶囊的抗炎、镇痛作用。方法 :通过小鼠耳廓肿胀、小鼠棉球肉芽肿、小鼠腹腔毛细血管通透性等实验观察其抗炎作用 ;通过热板法和醋酸扭体法观察其镇痛作用。结果 :鼻康胶囊能显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和小鼠棉球肉芽肿 ,并能抑制小鼠醋酸致炎引起的毛细血管通透性亢进 ;同时 ,鼻康胶囊能减轻热刺激所致的疼痛 ,提高小鼠痛阈值 ,能显著抑制醋酸所致的扭体反应。结论 :鼻康胶囊对炎症急性期及慢性炎症增生期具有抗炎作用 ,对物理致痛及化学致痛均有明显地镇痛作用。

中药注射剂长期毒性试验研究问题探讨

近年来中药注射剂临床应用中不良反应的增加 ,引起人们对中药注射剂安全性的重视 ,中药新药研究技术要求对中药注射剂毒理学研究提出了严格的要求。本文提出中药注射剂长期毒性试验研究中常见问题———溶血性、刺激性、过敏反应等制剂安全性问题对毒理学试验研究的影响 ,长期毒性试验剂量与用药周期的设计、给药方法及对实验结果分析方面的问题 。

活体骨髓细胞镜检在新药长期毒性试验研究中的应用

1993年以来的中药新药非临床研究技术指导原则中,均要求长期毒性试验研究中组织病理检查应做骨髓检查,笔者8年来共进行上百个中药新药长期毒性实验,抽取Beagle犬3000余只、SD大鼠数千只、藏酋猴26只活体骨髓,镜下计数有核细胞,观察细胞形态学,评价新药对造血系统是否有影响,在血液系统检验中有实际意义。

药物长期毒性实验中犬心电图检测存在问题的探讨

检查心电图是新药犬长期毒性试验中必需指标,清醒状态下检测,经常出现不规律的心率不齐,T波倒置,低平,双向,R波电压变化等,按人临床诊断方法应为异常,但这是犬的生物学特性所致,非病理改变。

SCARB1介导异种肝移植术后受体凝血功能调节障碍的研究

目的探讨清道夫受体B组1型分子(SCARB1)在异种肝移植手术前、后移植肝组织内的表达变化及其与受体凝血功能调节障碍的关系。方法以α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)五指山小型猪为供体,藏酋猴为受体,建立异种异位辅助性肝移植模型,并收集移植手术前、后移植肝脏组织标本。以胶原酶消化法提取原代猪肝细胞,免疫磁珠分离人外周血单核细胞,将两者混合培养并加入人血浆,建立异种肝移植术后凝血功能调节障碍的细胞模型。以实时定量逆转录聚合酶链反应(q RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测并对比组织及细胞标本中SCARB1的信使核糖核酸(mR NA)及蛋白质表达情况。最后在细胞水平以慢病毒载体干预SCARB1的表达,并检测凝血时间以验证其对凝血功能的影响。结果与术前组织标本比较,术后移植肝组织内SCARB1的mR NA和蛋白表达均显著下调(均为P<0.05)。在细胞模型中,与未干预猪肝细胞比较,经人单核细胞共培养后的猪肝细胞内SCARB1的mR NA和蛋白表达也出现显著下调(均为P<0.05)。与干预组比较,应用慢病毒过表达猪肝细胞内SCARB1的表达后,凝血时间显著延长(均为P<0.05)。结论移植肝组织内SCARB1的下调是介导受体凝血功能调节障碍的重要原因之一,对其干预有助于纠正异种肝移植术后受体凝血功能调节障碍。

药物非临床研究常规检测指标与计算机系统直连

药物非临床研究中常用检验检测数据与计算机系统无缝直连,对研究资料的保真性,不易更改性,减轻工作量,资料存储都显示出其计算机信息系统的优越性。

头痛宁胶囊对家犬实验性脑缺血的影响

犬36只,雌雄各半,体重8～12kg,购于当地农村.腹腔注射1ml/kg戊巴比妥钠溶液麻醉(30mg/kg戊巴比妥钠),试验在有空调条件的手术室内进行,温度24～26℃,腹部切口 ,十二指肠表面荷包穿线后备用,在犬右外眼角与右耳根部2/1处(中点),用手术刀切开皮肤,分离肌肉,用手术专用颅骨钻钻开颅骨以咬骨钳扩大颅骨孔,切开硬脑膜,找到大脑中动脉,大脑中动脉结扎前,抽取静脉血3ml,作ALP、CK检测.取血后用手术线将大脑中动脉结扎使造成脑缺血,此时十二指肠切口处将不同受试物,头康宁胶囊内容物2.4、1.2、0 .6g/kg,正天丸6.0g/kg,空白对照(生理盐水)用注射器由导管推入小肠内,提紧切口扎结,并缝合腹部切口.结扎6小时,再次取股静脉血3.0ml,作上述酶学测定,颈部皮肤切口,分离双侧颈总动脉并夹闭,立即从右侧颈总动脉夹闭处的离心端推注10ml龙胆紫饱和溶液,对脑组织进行染色,推注完后,见犬舌、牙龈处已有蓝色立即剪断两侧颈总动脉,放血处死,颅骨锯锯开颅骨,取出全脑,称全脑重,遂切下未染色的脑组织(即缺血(苍白)区脑缚织)称重,并求出其占全脑重量的百分率.缺血脑组织10%甲醛固定,石蜡包埋切片,HE染色镜检.

计算机信息系统应用与药物非临床研究(GLP)

信息技术应用在管理过程中,充分体现了GLP管理思想,保证产生的研究资料全息性,真实、完整、可靠,不易消除,可追朔性和多重关联性,有足够的证据来证明药物非临床研究过程和研究资料的证据价值,也可独立进行资料的证据性校验,收到了事半功倍的效果,比传统的管理方法具有优越性。

当归饮子对复合型慢性荨麻疹致敏小鼠模型细胞因子的影响

目的研究当归饮子对气血两虚型慢性荨麻疹治疗机理。方法 KM小鼠,雌雄各半,采用利血平+乙酰苯肼,联合IV型变态反应模拟荨麻疹模型,选择模型制作成功的动物,随机分为模型组、氯雷他定组、当归饮子加减方高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组8只动物,另取8只作为空白对照组。实验结束时,各组动物眼眶取血,分离血清,光镜检测外周血嗜酸性粒细胞(EOS)变化;采用双抗夹心ELISA法测试血清IgE含量;剖取血管壁组织,免疫组织化学检测血管壁组织中IL-4、IFN-γ表达量。结果与模型组比较,当归饮子各剂量组可显著降低动物外周血嗜酸性粒细胞(P<0.01);降低血清IgE含量(P<0.01);降低血管壁组织IL-4(P<0.01),升高IFN-γ(P<0.01)。结论当归饮子可通过干预T细胞异常分泌相关细胞因子抑制荨麻疹发病。

含吐温-80的中药注射剂对2例猴血压、心电图影响的初步观察

目的:观察含吐温-80的中药注射液对麻醉猴血压和心电图的影响。方法:给两个品种麻醉猴静脉滴注含吐温-80的青银注射液,监测血压和心电图的变化。结果:含吐温-80的青银注射液对麻醉猴的血压和心电图无明显影响。结论:猴对吐温-80引起过敏反应可能不敏感。

Beagle犬静脉血储血方式不同和存放时间不同对生化值变化的影响

为了解Beagle犬静脉血储血方式及存放时间不同对生化值变化的影响,选取10只年龄在4～6月龄的Beagle犬,前肢静脉采血,测定血液中的生化成分,结果显示:采血后立即检测,血清组检测值高于血浆组检测值,血清组存放72 h后,检测结果与立即检测组有较大差异,血浆组存放72 h后,检测结果与立即检测组比较差异较小.所以认为,血清采集后应立即进行检测,如需延后检测,可用血浆保存,这样才能保证结果的准确可靠.

康普瑞丁磷酸二钠在体内外的抗肿瘤作用

目的观察化合物康普瑞丁磷酸二钠（CA-4P）对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞的体外抑制作用及对裸小鼠腹腔移植HL-60细胞的体内抗肿瘤作用。方法分别用MTT法、细胞生长曲线及细胞集落形成试验，研究CA-4P对HL-60细胞增殖的抑制作用，台盼蓝染色观察细胞形态变化；HL-60细胞腹腔移植裸小鼠，iv给予CA-4P，qd，5d，观察裸小鼠的腹水形成情况及生存时间，计算生命延长率。结果MTT法提示，0．5～64．0μg·ml^-1 CA-4P对HL-60细胞48h的抑制率为15％-79％，平均IC如约为6．579μg·ml^-1；生长曲线提示，CA-4P对HL-60细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系；台盼蓝染色后细胞出现凋亡形态的变化。CA-4P对裸小鼠腹腔移植HL-60细胞的治疗作用呈量效关系，随剂量增大，裸小鼠的生命延长率也增加。结论CA-4P对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞的增殖具有抑制作用，对HL-60细胞裸小鼠腹腔移植瘤具治疗作用。

芎归胶囊对小鼠缺血心肌的保护作用

目的 :观察芎归胶囊对异丙肾上腺素所致小鼠缺血心肌的保护作用。方法 :采用异丙肾上腺素ip致小鼠心肌缺血模型 ,应用生化法观察芎归胶囊的治疗作用。结果 :芎归胶囊能明显抑制异丙肾上腺素引起的小鼠血清肌酸激酶 (CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性升高 ,与模型组比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :芎归胶囊对异丙肾上腺素所致小鼠心肌损伤有明显的保护作用。

戊巴比妥钠麻醉持续时间对犬的血压、体温、呼吸和心电的影响

目的：观察在戊巴比妥钠麻醉剂量下，犬的血压、体温、呼吸频率和心电图（标准Ⅱ导联）随麻醉持续时间的变化情况。方法：10只犬用戊巴比妥钠按30mg·kg^-1静脉注射全身麻醉，颈动脉插管测血压，电子温度计量肛温，呼吸波传感器系于胸部测呼吸频率，四肢接标准Ⅱ导联检测心电图，连续观察6小时（以初始剂量的1／5-1／4维持麻醉）。结果：随麻醉时间的延长，犬的体温明显下降、呼吸频率先抑制后回升，心率减慢、QT间期延长，血压变化不明显。结论：该麻醉方法对犬的体温和心电有明显影响，在麻醉初期对呼吸也有影响，对血压的影响不明显。