猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及增殖规律

为了研究猪流行性腹泻病毒（PEDV）的生长规律，利用Vero细胞从四川腹泻仔猪小肠内容物中分离得到1株病毒，经RT—PCR检测、序列比对、病毒理化试验与微量中和试验证实该分离株为猪流行性腹泻病毒，命名为SC—P，以该毒株经口接种28日龄仔猪，5d后出现明显临床症状。以SC—P分离株感染Vero细胞，收集不同时间的细胞上清，利用建立的PEDV荧光定量检测方法对不同时间点样品中病毒RNA进行定量分析，绘制PEDV的一步生长曲线。结果显示，细胞外的病毒RNA含量呈S形曲线增长，感染后第2～6小时，病毒RNA含量的增长较慢，第6～24小时呈对数增长，第24～72小时增长速度减缓，维持在较高水平，进入稳定期。表明PEDV感染Vero细胞，病毒在细胞内增殖到达一定数量以后，便逐步向胞外释出。