苦参提取物通过JAK/STAT信号通路减轻缺血再灌注大鼠心肌损伤的实验研究

目的探讨苦参提取物减轻缺血再灌注大鼠心肌损伤的机制。方法建立大鼠缺血再灌注心肌损伤模型,给予氧化苦参碱处理,观察处理后心肌氧化应激指标变化、心肌细胞凋亡情况及JAK/STAT信号通路关键分子变化。结果缺血再灌注组p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3表达量显著高于假手术组(P<0.05)。氧化苦参碱组p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3表达量显著低于缺血再灌注组(P<0.05)。缺血再灌注组细胞凋亡指数显著高于假手术组(P<0.01)。给予氧化苦参碱处理后,细胞凋亡指数显著低于缺血再灌注组(P<0.05)。缺血再灌注组心肌NO、SOD、GSH-PX含量显著低于假手术组,MDA含量显著高于假手术组(P<0.05)。氧化苦参碱组NO、SOD、GSH-PX含量显著高于缺血再灌注组,MDA含量显著低于缺血再灌注组(P<0.05)。给予JAK抑制剂AG490+氧化苦参碱处理后p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3含量显著低于仅给予JAK抑制剂组。给予STAT抑制剂西罗莫司(sirolimus)+氧化苦参碱处理后,p-JAK2、p-STAT1、pSTAT3含量显著低于仅给予STAT抑制剂sirolimus处理组(P<0.05)。结论苦参提取物可通过抑制JAK/STAT信号通路,减轻缺血再灌注大鼠心肌氧化损伤。

G-蛋白偶联胆汁酸受体对高糖诱导大鼠冠状动脉内皮细胞功能的影响

目的探讨G-蛋白偶联胆汁酸受体(TGR5)对高糖诱导大鼠心脏动脉内皮细胞粥样硬化的影响。方法提取清洁级雄性SD大鼠冠状动脉内皮细胞于高糖培养基内传代培养,分为对照组、空载组和TGR5转染组。空载组细胞接受空载质粒转染,TGR5转染组接受TGR5质粒转染和INT-777激活。MTT法测定和比较各组内皮细胞增殖,Annexin-V/PE双染法测定和比较各组内皮细胞凋亡。RT-PCR法检测和比较各组内皮细胞ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达,Western blot法测定和比较各组内皮细胞ICAM-1和VCAM-1蛋白表达。测定和比较各组内皮细胞SOD活性、MDA、LDH和GSH-Px表达。结果 0h时,各组内皮细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05),12 h及24 h时,TGR5转染组细胞增殖速度显著高于对照组及空载组(P<0.05)。对照组细胞凋亡率33.76%及空载组细胞凋亡率27.77%显著高于TGR5转染组细胞凋亡率12.36%(P<0.05)。TGR5转染组ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达均显著低于对照组和空载组(P <0.001),TGR5转染组ICAM-1和VCAM-1蛋白表达均显著低于对照组和空载组(P<0.001),TGR5转染组内皮细胞SOD活性和GSH-Px表达高于空载组和对照组内皮细胞(P<0.05),TGR5转染组内皮细胞LDH和MDA表达低于空载组和对照组内皮细胞(P<0.05)。结论激活TGR5能够有效阻止大鼠心脏冠状动脉内皮细胞免于高糖诱导性损伤,可能为临床防治心脏冠状动脉粥样硬化提供指导。