高锶矿泉水的细胞毒性研究

目的比较不同浓度的高锶矿泉水对人肝细胞(LO2)、肾小管细胞(HK-2)和人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,以了解高锶矿泉水的细胞毒性,探索对人体有益的锶矿泉水浓度及作用。方法将LO2、HK-2、HUVEC分为2、4、6、8 mg/L锶矿泉水组和对照组,先以4×104.mL-1的浓度接种于培养板中,18 h后,分别换成2、4、6、8 mg/L的锶矿泉水和双蒸水配制的DMEM高糖培养基继续培养。根据不同细胞的增殖周期,分别于1、2、3、4、5和7 d时,以CCK-8法观察细胞的增殖情况,用细胞相对增殖率按美国药典标准评价细胞毒性。用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验检测培养3 d后的HUVEC培养基中血管内皮生长因子(VEGF)的分泌量。结果 2、4、6 mg/L锶矿泉水组中锶矿泉水对LO2、HK-2、HUVEC的毒性均为0～1级,8 mg/L锶矿泉水组中锶矿泉水在上述细胞增殖的早期或晚期对细胞的毒性为2～3级。LO2在4、6 mg/L锶矿泉水组中提前出现增殖峰,并较长时间地保持旺盛的增殖状态(P<0.05);HK-2在4、6、8 mg/L锶矿泉水组中生长周期延长(P<0.05),尤以4 mg/L锶矿泉水组的效果最突出(P<0.05)。HUVEC在2、4 mg/L锶矿泉水组中培养3 d后增殖速度加快(P<0.05),明显快于对照组和其他锶矿泉水组(P<0.05),而8 mg/L锶矿泉水组细胞增殖速度总体慢于对照组(P<0.05)。锶矿泉水组细胞分泌VEGF的总量均较对照组减少(P<0.05),但锶矿泉水组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论高锶矿泉水在锶浓度不超过8 mg/L时对肝、肾和血管内皮细胞无明显毒性,对细胞增殖有益,其中锶浓度为4 mg/L的效果最突出,以延长其增殖周期为主。VEGF可能并不是高锶矿泉水促HUVEC增殖的主要作用。

锶矿泉水对人血管内皮细胞的增殖和功能的影响

目的观察不同浓度的锶矿泉水对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖及分泌的影响,研究其对血管内皮细胞功能的作用。方法 HUVEC细胞分为2、4、6、8 mg/L锶矿泉水(SMW)组和双蒸水(DDW)组,以4×104个/ml的浓度接种于培养板中,18 h后,换成条件培养基培养至96 h。分别于24、48、72和96 h时,以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法观察细胞的增殖情况。培养72 h的细胞分别用苏木素染色后,观察细胞生长状态,以及用BCA蛋白化验试剂盒测蛋白含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养基中血管内皮生长因子(VEGF)、一氧化氮(NO)和内皮素(ET)的含量。结果培养72 h后,2和4 mg/L SMW组细胞增殖速度快于DDW组(P<0.05);8 mg/LSMW抑制HUVEC增殖(P<0.05);培养至72 h时,各浓度的SMW组细胞分泌VEGF的量较DDW组均降低(P<0.05),其组间差异无统计学意义(P>0.05);2和4 mg/L SMW组分泌ET和NO减少(P<0.05),而6和8 mg/LSMW组分泌增多(P<0.05),但同一浓度下,ET和NO分泌变化呈正相关。4 mg/L SMW组NO/ET值增大(P<0.05),其余各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论一定浓度的锶矿泉水可促进血管内皮细胞增殖,影响内皮细胞ET和NO分泌,降低血管紧张性。VEGF并不直接参与锶矿泉水促进血管内皮细胞的增殖。