雨蛙素及脂多糖在小鼠急性胰腺炎建模中的应用

目的:利用雨蛙素(caerulein,CAE)及脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)复制典型的轻重型急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型.方法:C57小鼠50只,随机分为5组:正常对照组(CON组)、CAE 7次组(CAE 7组)、CAE 7次加LPS组(CAE 7+LPS组)、CAE 13次组(CAE 13组)及CAE 13次加LPS组(CAE 13+LPS组),检测血淀粉酶、脂肪酶水平,组织病理学及透射电镜观察.结果:各实验组酶学水平及病理评分明显高于对照组(淀粉酶含量最低的CAE 7组:27020U/dL±3443 U/dL vs CON组:2696 U/dL±400 U/dL,P<0.01;脂肪酶含量最低的CAE 7组:1379 U/L±283 U/L vs CON组:33 U/L±13 U/L,P<0.01;病理评分最低的CAE 7组:5.8±0.9 vs CON组:0.1±0.3,P<0.01);与CAE 7组相比,CAE 13+LPS组酶学水平及病理评分升高更明显(CAE 13+LPS组淀粉酶:46969U/dL±11852 U/dL vs CAE 7组淀粉酶:27020U/dL±3443 U/dL,P<0.01;CAE 13+LPS组脂肪酶:1962 U/dL±496 U/dL vs CAE 7组脂肪酶:1379 U/dL±283 U/dL,P<0.05;CAE13+LPS组病理评分:11.1±1.1 vs CAE 7组病理评分:5.8±0.9,P<0.05);CAE 13+LPS组较CAE 13组病理评分改变更明显(CAE 13+LPS组:11.1±1.1 vs CAE 13组:10.1±0.99,P<0.05);电镜示CAE 7组细胞线粒体和粗面内质网扩张水肿,CAE 13+LPS组细胞坏死、间质结构破坏.结论:单纯CAE腹腔注射7次可制典型急性水肿型胰腺炎模型,CAE 13次加末次LPS腹腔注射可制典型急性坏死型胰腺炎模型,是研究不同程度AP较理想的模型.

高血压大鼠主动脉血管壁细胞增殖和凋亡的原位检测

目的 观察原位检测高血压大鼠胸主动脉重构过程中血管壁细胞的增殖和凋亡.方法 利用腹主动脉缩窄手术建立肾性高血压大鼠模型,达到稳定高血压状态后取新鲜胸主动脉进行原位增殖和凋亡检测.结果 腹主动脉缩窄术后2～3d大鼠达到稳定的高血压状态.8周后胸主动脉出现血管重构,表现为壁厚增加,内径壁厚比缩小.溴化去氧尿苷（BrdU）渗入法提示血管壁中膜平滑肌细胞增殖水平上调[正常组（10.0±2.1）个/视野,高血压（18.O±3.0）个/视野];末端脱氧核苷酸转移酶脱氧尿苷三磷酸切口末端标记（TUNEL）法提示中膜平滑肌细胞和内膜内皮细胞凋亡水平上升[正常组（14±3）个/视野,高血压（50 ±8）个/视野].使用芝加哥蓝（Chicago蓝）染料能显著降低血管组织自发荧光,使荧光标记的增殖细胞或凋亡细胞清晰可见.结论 通过选择适当的染料和荧光标记,能够在不受血管自发荧光的干扰下原位检测血管壁细胞的增殖和凋亡水平.