人胚神经干细胞的培养与基因修饰后体内的表达

目的分离培养人胚神经干细胞（human neural stem cells,hNSCs）,建立人胚神经干细胞株；体外通过逆转录病毒转染人胚神经干细胞,观察其生物学特性及在脊髓损伤（spinal cord Injury,SCI）模型体内的表达。方法分离孕10-20周（平均13周）人胚脑皮层来源的神经干细胞并连续传代培养,通过克隆试验、免疫组织化学等方法检测其生长特性与增殖能力；用构建了增强绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）基因的逆转录病毒转染神经干细胞并检测其生物学特性；制备兔T9全横断脊髓损伤模型,观察携带EGFP基因的人胚神经干细胞在体内的表达情况。结果从胎龄10-20周的人胚脑皮层中成功分离出人胚神经干细胞,该细胞具有连续克隆能力及多分化潜能,能表达干细胞及分化细胞的特异性抗原；逆转录病毒转染后,仍然保持未分化状态并能自我更新形成新的神经球；移植入兔脊髓损伤模型后,可在体内存活较长时间,高效表达转基因蛋白。结论人胚脑皮层中存在能连续传代培养的神经干细胞,转基因及移植入体内后能高效表达目的基因蛋白并保留干细胞的基本属性,发挥治疗作用。

膝关节骨关节炎并髌骨骨折不同手术疗效评价

髌骨骨折的最佳疗法是保留髌骨且张力带坚强内固定。但膝关节骨关节炎并髌骨骨折的治疗方法现未曾有报道。对我院近8年收治的35例患者采用四种疗法的回顾性分析,报告如下: 临床资料 1.一般资料:Ⅰ组(张力带钢丝内固定组):8例中男5例,女3例,年龄54～70岁,平均63.4岁,左侧6例,右侧2例,骨折类型:横形1例,下段粉碎5例,星状粉碎2例。术前病程3小时～10天,平均6.3天。Ⅱ组(髌骨部分切除组):12例中男5例,女7例,年龄58岁～72岁,平均64.7岁,左侧6例,右侧6例,骨折类型:均为髌骨下极粉碎性骨折。术前病程2小时～13天,平均7天。Ⅲ组(髌骨全切除组):5例中,男2例,女3例,年龄62～76岁,平均年龄66.5岁,左侧1例,右侧4例,骨折类型:星状粉碎3例。

Halo背心治疗颈椎失稳的护理

观察护理Halo背心治疗多种原因所致颈椎不稳定病人14例。详细介绍Halo背心的结构及固定方法,治疗过程中做好心理护理。术前进行皮肤准备。检查头环背心适应性,协助医生查体,配戴Halo背心。术后严密观察生命体征,神经系统变化。加强对并发症的观察。做好康复指导,保证病人顺利达到颈椎骨性融合,重建颈椎功能。

肩周炎病因病理研究概况

肩周炎(Periarthritis of theShoulder,Frozen shoulder、Checkereinshoulder、Chronic adhesiveperiarthritis、painful Shoulder、fifty shoulder)是骨科常见疾病之一,有人调查了14679人,其中40岁以上的中年人发病率为狗20.6％,每5个人中就有一个患者。

恒河猴骨髓间充质干细胞体外培养及诱导分化成骨细胞的实验研究

[目的]体外分离培养非人类灵长类动物恒河猴骨髓MSCs,研究其生长、扩增及诱导分化为成骨细胞的特性。[方法]梯度离心法分离、纯化恒河猴骨髓源MSCs,观察不同接种密度和换液时间对细胞生长的影响;在体外应用成骨添加剂（含地塞米松10-7mol/L、β-甘油磷酸钠10 mmol/L、维生素C 50 mg/L）或rhBMP-2（100 ng/L）定向诱导分化,对分化后的细胞进行免疫组化染色和ALP、BGP定量测定以鉴定成骨细胞,并比较两种定向诱导分化方法的效果。[结果]梯度离心法分离、纯化得到的恒河猴骨髓源MSCs具有分裂和克隆增殖的能力,种植细胞密度为10×104~30×104/cm2,48 h后半量换液,以后每3 d全量换液的方法较合理,MSCs能少量表达ALP活性,分泌的钙量较少;诱导分化后的细胞具有和体内成骨细胞相同的形态学特征,ALP染色阳性,能表达Ⅰ型胶原,不表达Ⅱ型胶原,细胞融合后3 d,ALP和BGP分泌明显增加,融合后14 d细胞ALP、BGP的分泌水平略有升高,但无明显增加;采用成骨添加剂和rhBMP-2诱导分化MSCs后相同时期成骨细胞ALP活性、BGP含量无明显差异。[结论]密度梯度离心法分离得到的非人类灵长类动物骨髓源MSCs,体外培养具有分裂、克隆增殖的能力,在加有成骨细胞诱导剂或rhBMP-2的培养基里能诱导分化为成骨细胞,化学药物在定向诱导分化过程中具有和生长因子相一致的作用。