肠道微生物与中枢神经系统疾病研究进展

肠道微生物是人体微生物最大储存库[1],时刻与宿主进行着信息交换。微生物及其代谢产物在胎儿时期已对人体产生作用,微生物定植的序贯性、多样性、稳定性及平衡性均会对人体生长发育产生重大影响[2],并影响宿主生理病理等多个方面,在人体健康和疾病中起重要作用。本文将对肠道微生物(主要指细菌)与中枢神经系统及其疾病相关性的研究进展进行综述。

肠道菌群调节中枢神经系统的机制研究进展

数亿计的肠道微生物定植于人体胃肠道形成肠道微生物群。肠道菌群是肠道微生物的主要组成部分,其定植最先受到母体遗传和分娩的影响。在人体随后的生长发育过程中,肠道菌群种属逐渐趋于丰富多样,而且随着饮食习惯和环境因素的变化而逐渐改变[1]。肠道菌群时刻与机体进行着信息交换,参与机体的生长发育和衰老过程,具有调节人体新陈代谢、肠道炎症及功能稳态等功能。

基于CGGA数据库的胶质瘤临床预测模型的构建与验证

目的基于中国脑胶质瘤基因组图谱数据库(CGGA)资料,构建有效预测胶质瘤患者预后的Nomogram模型,以期为临床治疗提供帮助。方法从CGGA数据库中,收集胶质瘤患者的相关临床资料作Lasso回归分析;筛选重要的预后因素构建Nomogram模型,通过ROC曲线、C-index、校准曲线验证模型的预测能力及准确度。结果共搜集到训练集553例和验证集289例患者资料,Lasso回归分析显示年龄、性别、肿瘤类别、肿瘤分级、化疗、放疗、IDH突变状态、1p19q共缺失情况是胶质瘤重要的预后因素。基于以上因素构建的Nomogram模型训练集及验证集的C-index分别为0. 790±0. 012、0. 794±0. 014,内外部验证的1、3、5年ROC曲线AUC值分别为0. 855、0. 870、0. 850和0. 833、0. 877、0. 886,校正曲线观察值与预测值之间有良好的一致性。该模型显示出较好的预测能力及准确度。结论本研究验证了肿瘤分子标志物1p19q、IDH在胶质瘤预后评估中的重要性,且基于以上因素构建了适用范围更广的胶质瘤Nomogram模型。

LASP1在胶质母细胞瘤组织中的表达及其对肿瘤耐药和患者预后的影响

目的探究LASP1蛋白(LIM and SH3 protein 1)在胶质母细胞瘤组织中的表达及其与患者临床病理特征、耐药和预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测LASP1在140例胶质母细胞瘤组织和15例正常脑组织中的表达,分析其表达及与患者临床和预后的关系。结果与正常脑组织相比,LASP1在胶质母细胞瘤组织中表达明显升高(P <0.01),并且与肿瘤Ki67的表达、肿瘤大小、囊性改变相关(均P <0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,LASP1高表达患者中位生存时间、无复发中位生存时间较低表达患者均明显缩短(均P <0.01);替莫唑胺化疗在高表达患者中无明显生存获益(P> 0.05)。单因素及Cox多因素分析提示,LASP1的表达及替莫唑胺化疗是胶质母细胞瘤独立危险因素(均P <0.05)。结论 LASP1在胶质母细胞瘤中高表达,与患者预后及替莫唑胺敏感性相关,其可能是胶质母细胞瘤潜在的治疗靶点和预后评估的分子标志物。

脑肿瘤病人主要照顾者经验性回避现状及相关影响因素分析

目的:了解脑肿瘤病人主要照顾者的经验性回避水平,并分析其相关的影响因素,为临床心理干预提供理论指导。方法:采用便利抽样的方法选取了2019年7月—2020年7月泸州市某三级甲等医院住院治疗的120名脑肿瘤病人主要照顾者为研究对象,采用一般资料调查表、接纳与行动问卷第2版、汉密尔顿焦虑量表、汉密尔顿抑郁量表和简易应对方式问卷进行问卷调查。结果:脑肿瘤病人主要照顾者的经验性回避得分为(20.03±5.39)分。多重线性逐步回归分析显示,照顾者焦虑、抑郁情绪和家庭人均月收入是脑肿瘤病人主要照顾者经验性回避的主要影响因素。结论:脑肿瘤病人的主要照顾者经验性回避处于中等水平。建议临床工作者关注收入较低的家庭,及时识别照顾者的负性情绪,结合我国的文化背景和国外的干预方式,采取相应的经济支持策略的指导和心理治疗措施,从而降低照顾者的经验性回避水平。

地震灾害性颅脑损伤患者长期预后情况调查及分析

目的了解汶川地震期间收治的地震灾害性颅脑损伤患者灾后康复情况及现状,为在突发事件中对颅脑损伤患者进行救治及后期预后评估提供参考。方法2019年3月收集该院收治的36例2008年“5·12汶川地震”灾害性颅脑损伤患者的临床资料,对比地震灾害性颅脑损伤患者康复治疗前后日常生活能力量表评分及认知功能分级,并对患者临床症状及功能康复情况进行调查。结果36例患者年龄2~82岁,平均(41.2±5.3)岁;大部分患者出现不同程度临床症状和功能障碍,经后期康复治疗后日常生活能力量表评分和认知功能分级均较康复治疗前明显提高,差异均有统计学意义(P<0.05)。但有83.33%(30/36)的患者表现出不同程度的精神障碍。结论汶川地震灾后大部分颅脑损伤患者病情得到一定程度的恢复,但生活质量仍不尽满意,除提高地震灾害性颅脑损伤患者的康复治疗条件、加强康复意识以外,还应增加对地震灾害性颅脑损伤患者心理健康的关注,采取综合措施促进患者康复,提高其生活质量。

双糖链蛋白聚糖对小鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中神经元凋亡的影响

目的探讨双糖链蛋白聚糖(BGN)对小鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)中神经元凋亡的影响。方法采用改良血管内穿刺法构建C57BL/6J雄性野生型小鼠SAH模型。(1)将48只小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH 6 h组、SAH 12 h组、SAH 24 h组、SAH 48 h组、SAH 72 h组,每组8只。采用Western blotting及荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测各组小鼠脑组织中BGN蛋白及mRNA的表达水平。(2)将16只小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH 48 h组,每组8只。采用免疫荧光双标染色检测各组小鼠脑组织中BGN在神经元中的表达情况。(3)将24只小鼠按随机数字表法分为假手术组、假手术+空载病毒组、假手术+BGN慢病毒组,每组8只,其中BGN慢病毒及空载病毒于假手术前7 d经侧脑室注射。采用qRT-PCR检测各组小鼠脑组织中BGN mRNA的表达水平。(4)将48只小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH+空载病毒组、SAH+BGN慢病毒组,每组16只,其中BGN慢病毒及空载病毒于造模前7 d经侧脑室注射。采用改良加西亚评分及平衡木实验评估各组小鼠的神经功能,采用TUNEL染色检测各组小鼠脑组织中神经元凋亡情况,采用Western blotting检测各组小鼠脑组织中磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)及核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达水平。结果(1)SAH 48 h组小鼠脑组织中BGN蛋白及mRNA的表达水平达高峰,与假手术组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)SAH 48 h组小鼠脑组织中BGN大量表达于神经元中。(3)与假手术+空载病毒组比较,假手术+BGN慢病毒组小鼠脑组织中BGN mRNA的表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)与SAH+空载病毒组比较,SAH+BGN慢病毒组小鼠的改良加西亚评分、平衡木实验评分均明显升高[(6.125±1.246)分vs.(13.000±1.309)分;(1.125±1.126)分vs.(2.875±0.835)分],神经元凋亡比例明显降低[(51.950±11.166)%vs.(31.938±7.705)%],p-NF-κB/NF-κB比值明显降低(1.161±0.156 vs.0.886±0.142),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制BGN表达可有效减轻小鼠SAH后EBI中神经元凋亡,从而改善其神经功能。

双水征:一种用于评估原发性三叉神经痛神经血管压迫的新影像学征象

目的探讨一种新的影像学征象——"双水征"在评估原发性三叉神经痛(TN)患者神经血管压迫关系中的应用。方法纳入西南医科大学附属医院神经外科自2017年3月至2019年3月收治的85例TN患者进入研究。所有患者术前均行MRI平衡射频重聚脉冲三维快速自旋回波(3D-T2W-DRIVEN)序列检查,并采用多平面重组(MPR)技术进行后处理,将重组平面上依次出现的神经(较低信号)-脑脊液(高信号)-血管(低信号)-脑脊液(高信号)-神经(较低信号)征象命名为"双水征"。结合显微血管减压术(MVD)中情况,计算"双水征"预测神经血管压迫关系的敏感性、特异性并比较存在/不存在"双水征"征象患者神经血管压迫程度的差异。结果85例TN患者中,46例(54.12%)患者出现"双水征",其敏感性为57.14%,特异性为75.00%,阳性预测值为95.65%,阴性预测值为15.38%。存在/不存在"双水征"征象患者神经血管压迫程度差异有统计学意义(P<0.05),存在"双水征"征象患者的血管神经压迫程度更重。结论"双水征"征象可评估TN患者神经血管压迫关系并提示神经血管压迫程度。

小鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤期转运蛋白的表达

目的评估小鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后72 h内(早期脑损伤期)脑组织中转运蛋白(translocator protein,TSPO)的表达。方法将44只C57BL/6J小鼠随机分成两组,Sham组17只,SAH组27只。SAH组通过血管内穿刺法构建SAH模型,Sham组不刺破血管。造模前(0 h),造模后6 h、24 h、48 h、72 h,两组采用改良加西亚评分对小鼠进行神经功能评分,造模后各时点处死SAH组小鼠(Sham组仅取造模后24 h处死),以Western blot、正电子发射计算机断层显像(positron emission tomography-computed tomography,PET-CT)和免疫荧光染色评价TSPO在脑组织中的表达,免疫荧光染色评估TSPO与小胶质细胞的共定位。结果 SAH组小鼠神经功能评分造模后随时间先降低后增加,脑组织中TSPO表达量造模后随时间先增加后降低,两者呈负相关(r=-0.615 6,P<0.01)。PET-CT提示SAH后小鼠脑组织示踪剂摄取量较Sham组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色提示SAH组出血侧顶叶皮层和基底皮层均有TSPO表达增加,且与小胶质细胞标记物Iba-1共定位。结论 SAH后早期脑损伤期,TSPO在脑组织中的表达部位广泛增加,表达量呈现先增加后减少的趋势,可能参与小胶质细胞的激活,并调控SAH后脑损伤的发生与发展。

颅内动脉瘤的相关信号通路基因集富集及免疫浸润分析

目的:基于基因芯片技术,对颅内动脉瘤(IA)mRNA表达谱芯片数据进行基因集富集分析(GSEA)和免疫浸润分析,为深入了解IA的形成机制提供理论依据。方法:从基因表达数据库(GEO)中获取GSE75436芯片数据,利用R软件对基因表达谱进行基因本体论(GO)中生物学过程(BP)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路的GSEA;采用CIBERSORT反卷积方法对表达谱中22种免疫细胞浸润比例进行分析;应用COREMINE数据库对显著富集过程进行中药预测。结果:GSEA结果显示,IA样本的基因表达改变主要涉及细胞因子的调节、白细胞激活及分化、炎症免疫应答等过程。对免疫细胞的浸润矩阵分析结果表明,静息肥大细胞和中性粒细胞在IA样本中显著减少。配对样本的分析结果显示,同一个体的IA样本中肥大细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)呈明显活化趋势,而中性粒细胞和初始CD4+T细胞明显减少。通过COREMINE预测发现,防己与粒细胞激活相关,黄连木、无患子与中性粒细胞激活相关,瓜蒌子、白芍和女贞子与NK细胞介导的细胞毒性相关。结论:肥大细胞活化和NK细胞活化与IA发生发展密切相关,筛选出的核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体(NLR)信号通路以及NK细胞介导的细胞毒性等炎症免疫相关通路可能作为IA形成机制中的重要影响因素,而防己等中药可能作为其潜在的分子药物来源。

核不均一核糖核蛋白C对胶质瘤侵袭、迁移的作用及其机制

目的:检测胶质瘤组织中核不均一核糖核蛋白C(hnRNPC)表达,探讨hnRNPC对胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响。方法:分别采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测西南医科大学附属医院神经外科2017年1月至2018年12月经病理证实为胶质瘤组织标本hnRNPC mRNA和蛋白表达,采用小干扰RNA及慢病毒转染U87细胞,干扰U87细胞hnRNPC的表达并检测干扰效率,Transwell侵袭实验及划痕实验检测侵袭和迁移能力的改变,Western blot检测各组细胞磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化(p)-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt蛋白表达;在稳定干扰hnRNPC的基础上使用胰岛素样生长因子(IGF)-1激活PI3K/Akt信号通路并检测U87细胞侵袭和迁移能力的变化。两组之间比较采用 t检验,多组间比较采用单因素方差分析(SNK- q检验)。 结果:胶质瘤组织中hnRNPC表达为正常脑组织的(4.482±0.760)倍,差异有统计学意义( t=-2.893, P<0.05);稳定敲减hnRNPC后,Western blot检测实验组(sh-hnRNPC-1、sh-hnRNPC-2)较对照组(sh-Con)及空白组蛋白(Blank)表达分别下降(2.512±0.684)倍和(2.516±1.795)倍,差异有统计学意义( F=81.256、70.863, P<0.05),实验组(sh-hnRNPC)细胞迁移面积[(8.373±0.104)%]相对于对照组(sh-Con)细胞迁移面积[(16.610±0.440)%]和空白组(Blank)迁移面积[(17.867±0.570)%]明显减小,差异有统计学意义( F=452.083, P<0.05),实验组(sh-hnRNPC)穿过Transwell小室基底膜的细胞数目为(122.000±12.530)个,较对照组(sh-Con)细胞数目[(359.000±34.771)个]和空白组(Blank)细胞数目[(375.000±14.503)个]明显减少,差异有统计学意义( F=114.944, P<0.05),与瞬时敲减hnRNPC后结果一致。敲减hnRNPC后,各组细胞中PI3K、Akt表达无变化,差异无统计学意义( F=0.388、2.590, P>0.05),实验组(si-hnRNPC)p-PI3K、p-Akt蛋白表达明显下调,分别降低了(2.060±1.046)倍和(3.087±0.514)倍,差异有统计学意义( F=89.393、255.863, P<0.05)。稳定干扰hnRNPC,再加入IGF-1激活PI3K/Akt信号通路后,能逆转U87细胞侵袭和迁移能力。 结论:hnRNPC在胶质瘤组织的表达与胶质瘤病理级别呈正相关,胶质瘤病理级别越高,hnRNPC表达越高,提示hnRNPC可能参与胶质瘤的恶性发展;hnRNPC可通过PI3K/Akt信号通路调控胶质瘤细胞侵袭和迁移。

急性外伤性弥漫性脑肿胀与蛛网膜下腔出血的相关性分析及其机制初探

目的分析急性外伤性弥漫性脑肿胀(PADBS)与蛛网膜下腔出血(SAH)的相关性及其机制初探。方法回顾性分析西南医科大学附属医院神经外科2017年3月至2020年4月收治的脑挫裂伤患者48例,根据入院时头颅CT,将患者分为PADBS组(26例)和非脑肿胀组(22例)。比较两组患者SAH发生率的差异。所有患者均行CT灌注成像(CTP)检查,比较两组患者CTP相关参数的差异。两组各选择3例合并SAH并行去骨瓣减压术的患者,对术中切除的废弃脑组织进行全基因组表达谱芯片检查,比较两组基因表达的差异。结果PADBS组76.9%(20/26)的患者合并SAH,高于非脑肿胀组的40.9%(9/22),差异有统计学意义(P<0.05);CTP显示,PADBS组脑血容量、脑血流量降低,脑血流平均通过时间延长,差异均有统计学意义(均P<0.05)。基因芯片分析显示,与非脑肿胀组比较,PADBS组脑组织中炎性反应、免疫反应及应激反应相关基因表达均明显下调,低氧诱导因子1α(HIF-1α)、糖酵解途径中己糖激酶2(HK2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)mRNA的表达水平均明显降低(均P<0.05)。结论PADBS可能与外伤性SAH有关,相关机制可能与低氧应激反应降低有关。