长白落叶松体胚发生再生体系优化

以长白落叶松(Larix olgensis)未成熟合子胚为外植体诱导胚性愈伤组织,通过调节影响体胚发生的营养物质和植物生长调节剂配比,进行愈伤组织的胚性恢复与保持以及体胚发生再生体系的优化。结果表明:不同无性系之间胚性愈伤组织诱导率差异显著,胚性愈伤组织在S+0.2 mg·L^-1 NAA+0.5mg·L^-1 BA+0.5mg·L^-1 KT+0.5g·L^-1谷氨酰胺+0.5 g·L^-1水解酪蛋白+30g·L^-1蔗糖及3.0g·L^-1植物凝胶培养条件下,可以恢复胚性并长久保持。在S+20mg·L^-1 ABA+60g·L^-1PEG4000+60g·L^-1蔗糖及3.0g·L^-1植物凝胶条件下分化培养6周,体胚发生率可达100%。将正常发育的体胚先在WPM+6 mg·L^-1间苯三酚+1.0g·L^-1活性炭+3.0mg·L^-1 VB1+20g·L^-1蔗糖及3.0g·L^-1植物凝胶条件下培养2周,再转接至B5+0.4 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 IBA+0.5 mg·L^-1 GA3+2.0 mg·L^-1 VB1+1.0 g·L^-1活性炭+20 g·L^-1蔗糖及3.0 g·L^-1植物凝胶条件下培养2周,可见子叶舒展、下胚轴伸长且根系正常的体胚苗。该研究建立了长白落叶松胚性愈伤组织胚性恢复与保持方法,并进一步优化了体胚发生的植株再生体系,为林木资源快速繁育和遗传改良奠定了基础。

小黑杨PsnHB22基因在烟草中的遗传转化研究

HD-Zip转录因子在光信号转导、非生物胁迫、叶片发育等方面发挥重要的作用,HB22转录因子是HD-ZipⅠ亚家族的成员之一。为研究PsnHB22基因的功能,从小黑杨(Populus simonii×P.nigra)cDNA中克隆PsnHB22基因并构建植物表达载体进行烟草(Nicotiana tabacum)的遗传转化,以获得该基因过量表达的转基因株系。对转基因株系进行PCR、qRT-PCR分子检测后观察表型,结果显示在营养生长时期,转基因烟草叶片窄小并且株高显著低于野生型对照。测定转基因烟草及野生型叶片的叶绿素含量,发现转基因烟草叶绿素含量显著高于野生型。由此推测PsnHB22基因在植株高生长、光合作用及叶片的形态建成等过程中起着重要的作用。