非接触式共培养体外血脑屏障模型的跨膜电阻及通透性

目的建立大鼠脑毛细血管内皮细胞(BCEC)与星形胶质细胞共培养血脑屏障模型并评价其功能。方法采用SD大鼠原代分离培养获得BCEC和星形胶质细胞。经细胞形态学观察、免疫组化检测相关抗原后建立非接触式共培养血脑屏障模型,测定共培养模型所形成的跨细胞电阻及荧光素钠的通透性。采用LC-MS检测6个化合物透过血脑屏障模型的通透性,并与文献报道的体内数据进行比较。结果培养的BCEC多数为短梭形外观,免疫组化检测可见细胞高表达因子Ⅷ;星形胶质细胞呈现具有细胞突起的典型形态,免疫组化检测可见细胞高表达胶质纤维酸性蛋白。共培养的体外血脑屏障模型跨BCEC单层的电阻值为(373±41)Ω·cm2,荧光素钠跨BCEC单层的通透性为(0.34±0.14)×10-3cm·min-1,符合体外血脑屏障模型要求。对所选6个化合物体内外透过BBB模型渗透系数的比较,表明具有一定的相关性(R2=0.7679,P<0.05)。结论建立的体外BBB模型在跨内皮电阻和通透性方面具备了在体BBB的基本特性,可以用于模拟体内环境,进行药物早期筛选方面的研究。

纳米二氧化钛在大鼠体内的组织分布

目的探讨大鼠经口重复给予纳米二氧化钛后的组织分布。方法以1g／kg剂量反复经口灌胃纳米二氧化钛，连续给予13周，实验终末，采用电感耦合等离子质谱（ICP—MS）法检测其在大鼠体内的组织分布。结果纳米二氧化钛在肠、肝脏、脾脏、脑、肾脏和血液中均有不同程度的分布，而微米二氧化钛对照组未见有升高的趋势，与空白对照组分布接近。结论纳米二氧化钛具有较高的组织亲和力，肠、肝脏和脾脏可能是其主要蓄积作用的靶器官。

纳米与微米二氧化钛对A549细胞毒性的比较

目的比较纳米二氧化钛和微米二氧化钛对体外培养的人肺上皮细胞A549的毒性作用。方法用不同浓度的纳米（粒径4nm）和微米（粒径1μm）二氧化钛处理体外培养的A549细胞，通过倒置相差显微镜观察其形态，噻唑蓝（MTT）、CCK-8和台盼蓝排斥法测定细胞生长活性，并测定培养液上清中乳酸脱氢酶活力。结果MTT法检测发现随着剂量的增加，微米二氧化钛组细胞存活率逐渐下降，与对照组比较，在剂量为200μg／ml时，差异有统计学意义（P〈0．05），纳米二氧化钛组未见明显影响。CCK-8法、台盼蓝排斥法及乳酸脱氢酶活力测定结果表明纳米与微米二氧化钛组均未见明显影响。结论在本实验条件下，纳米二氧化钛和微米二氧化钛对A549细胞没有显示明显的细胞毒性作用。