中药炮制化学与化学炮制学的提出及研究思路

本文提出"中药炮制化学与化学炮制学"的观点,给出了定义、分析了其原因、提出了新辅料的要求及定向炮制和定性炮制的方法。为今后的炮制研究和炮制原理的解析,提供了新的研究思路。

UPLC-QQQ-MS/MS法比较研究大黄传统片和微型片的水提液中核苷类成分的含量

目的通过UPLC-QQQ-MS/MS法比较研究大黄传统片和微型片的水提液中尿苷、尿嘧啶、环磷酸鸟苷、次黄嘌呤、黄嘌呤等5个核苷成分的含量变化。方法采用Waters BEH C 18(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),进样量3μL,柱温30℃,电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)进行测定。结果大黄中主要含有尿嘧啶、尿苷、黄嘌呤、次黄嘌呤、环磷酸鸟苷等5种核苷成分。这5种核苷成分在测定质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.9991),方法的精密度、重复性和稳定性考察均符合分析要求,平均加样回收率在98.6%~101.7%,RSD在1.8%~2.5%。大黄微型片水提液中核苷成分含量明显高于传统片水提液。结论大黄切制成微型片较传统片更有利于有效成分的溶出。同时,该实验检测方法准确、可靠,适用于大黄饮片中核苷成分的含量测定与质量控制。

苦参及其炮制品对湿热型溃疡性结肠炎小鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路的调节作用

目的 通过探讨苦参及其炮制品对湿热型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)模型小鼠的治疗作用及其可能的作用机制,为苦参炮制品的临床合理应用提供参考。方法 在持续高温高湿环境下,配合高糖高脂饲料及蜂蜜水,建立湿热型小鼠模型,进而通过自由饮用含3%葡聚糖硫酸钠(DSS)的蒸馏水,建立湿热型UC小鼠模型。实验分为空白组、模型组、阳性药组(美沙拉嗪300 mg/kg)、生苦参组、麸炒苦参组、米泔制苦参组(均按5 g/kg剂量给药)、麦麸辅料组、米泔水辅料组,UC造模同时给予灌胃给药,连续10 d。每日观察小鼠的一般情况、体质量、粪便性状及隐血情况,进行一般疾病活动指数(disease activity index, DAI)评分,给药结束后处死小鼠,摘取结肠并测量长度,苏木精-伊红(HE)染色观察病理切片,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)以及结肠组织中丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)和Western blot法检测结肠组织中Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核因子κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)mRNA及蛋白表达。结果 与模型组比较,苦参及其炮制品组DAI评分降低;结肠长度缩短程度减小(P<0.01),结肠病变程度减轻,淋巴细胞浸润程度减轻;血清中MIF、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8含量降低(P<0.01),IL-10含量升高(P<0.01);结肠组织中MDA含量降低(P<0.01),SOD水平升高(P<0.01);TLR4、MyD88,NF-κBp65 mRNA及蛋白表达降低(P<0.01)。麦麸辅料和米泔水辅料组较模型组差异无统计学意义(P>0.05)。麸炒苦参组、米泔制苦参组较生苦参组作用更明显(P<0.05,P<0.01)。结论 苦参及其炮制品具有治疗湿热型UC的作用,经麸炒或米泔制后效果更好,其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,抗氧化应激、抗炎有关。

巴戟天不同炮制品及提取部位抗大鼠佐剂性关节炎的比较研究

目的:比较巴戟天不同炮制品及提取部位的祛风湿作用,探讨其在细胞因子水平上的作用机制。方法:大鼠左后足跖皮内注射弗氏完全佐剂制备AA模型,分别灌胃给予巴戟天、巴戟肉、盐巴戟天、制巴戟天4种炮制品和巴戟天乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位、剩余水部位和总多糖部位,以雷公藤多苷片为对照,在不同的时间点检测大鼠继发侧关节肿胀度;致炎28 d处死大鼠,采用ELISA法检测大鼠血清炎症细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)的水平。结果:与模型组比较,盐巴戟天及巴戟天乙酸乙酯部位、巴戟天正丁醇部位能明显减轻AA大鼠足肿胀度,降低异常升高的血清TNF-α、IL-1β、IL-6、INF-γ水平;而巴戟天、制巴戟天、巴戟天总多糖和巴戟天剩余水部位作用不明显。结论:盐巴戟天、巴戟天正丁醇部位和巴戟天乙酸乙酯部位对AA大鼠各项指标改善作用显著,效果优于巴戟天、制巴戟天、巴戟天总多糖和巴戟天剩余水部位,其作用机制可能与抑制促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6、INF-γ的产生有关。

五味子炮制研究进展

五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis（Turcz．）Baill．的干燥成熟果实，主产于辽宁、吉林、黑龙江、河北等地，习称“北五味子”。五味子酸、甘、温，归肺、心、肾经，具有收敛固涩、益气生津、补。肾宁心功效。五味子常见炮制品种有醋五味子、酒五味子、蜜五味子。传统理论认为，五味子“入补药熟用，入嗽药生用”，即五味子是“生熟异用”的。

木香炮制历史沿革及现代研究进展

查阅古今医药学文献,对木香炮制历史沿革、现代化学成分研究、药理研究及临床应用进行整理、分析和探讨,以期为木香的深入研究和应用提供有益的借鉴。

分析与综合方法在中药木香研究中的应用

文章系统地分析并比较了系统整体性原理中的分析与综合方法。只有充分应用还原方法与整体化方法,把分析与综合相结合,才能揭示中药木香在人体内各组分、各组分与人体环境的相互协同作用,更好地解决现代中药木香应用中的一系列问题。

UPLC-MS/MS法测定五味子不同炮制品中3种木脂素在大鼠血浆中的浓度及其药动学研究

目的比较五味子不同炮制品中3种木脂素在大鼠体内的含量差异,为五味子“入补药熟用”提供药动学依据。方法18只SD大鼠随机分为生五味子、酒五味子、醋五味子3组,每组6只。分别灌胃给予相应五味子水提液2 g·kg-1(为生药量),以牛蒡苷元为内标物,血浆样品经甲醇沉淀蛋白,采用UPLC-MS/MS正离子MRM模式下测定不同时间点大鼠血浆中五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲的浓度,并对不同时点的血药浓度数据采用DAS 3.2.7软件拟合,计算其药动学参数。结果大鼠血浆样品中,五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲的线性范围分别为0.180~12.625μg·mL^-1(r=0.9994)、0.125~7.5μg·mL^-1(r=0.9990)、0.160~10.43μg·mL^-1(r=0.9993),日内与日间精密度RSD均≤10.00%,提取回收率均≥85.00%。生品、酒品、醋品中五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲的Cmax分别为(1.087±0.23)、(2.221±0.366)、(0.914±0.18)mg·L^-1;(1.067±0.162)、(2.25±0.293)、(1.171±0.28)mg·L^-1;(4.95±0.655)、(6.349±0.679)、(3.347±0.693)mg·L^-1。AUC(0-t)分别为(15.54±3.41)、(26.84±5.23)、(12.12±0.96)mg·h·L^-1;(12.11±2.04)、(26.90±2.76)、(10.55±1.34)mg·h·L^-1;(45.79±4.61)、(60.97±6.42)、(30.64±5.13)mg·h·L^-1。结论该方法专属性强、灵敏度高、快速准确。酒五味子中3种木脂素在血浆中的含量均高于生品和醋品,可从药动学角度为酒五味子“入补药熟用”提供依据。

靶向代谢组学联合16SrRNA基因测序分析地黄炮制前后对肾阴虚证大鼠肠道菌群的影响

目的探讨地黄炮制前后对肾阴虚证大鼠肠道菌群的影响。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组、益生菌组(0.35 g·kg^(-1))、熟地黄高/中/低剂量组(3.5、1.75、0.875 g·kg^(-1))、生地黄高/中/低剂量组(3.5、1.75、0.875 g·kg^(-1)),每组9只。除空白组外,其余各组大鼠均肌肉注射地塞米松磷酸钠注射液(0.35 mg·kg^(-1)),每日1次,持续21 d。于造模第7天开始灌胃给药,每日1次,连续给药14 d。采用HE染色法观察肾上腺组织病理变化;ELISA法检测大鼠血清环磷酸腺苷(c AMP)、环磷酸鸟苷(c GMP)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺激素释放激素(ACTH)、皮质酮(CORT)水平;采用靶向代谢组学方法联合16Sr RNA基因测序检测各组大鼠粪便中短链脂肪酸的含量及肠道菌群多样性变化。结果(1)与空白组比较,模型组大鼠第7、14、21天体质量明显下降(P<0.05,P<0.01);血清中c AMP、CRH、ACTH、CORT含量及c AMP/c GMP比值均显著升高(P<0.01),c GMP含量显著降低(P<0.01);肾上腺皮质变薄,皮质各层边界不清。与模型组比较,熟地黄给药组大鼠第21天的体质量均明显增加(P<0.05,P<0.01),大鼠血清中c AMP、CRH、ACTH、CORT含量及c AMP/c GMP比值均明显降低(P<0.05,P<0.01),c GMP含量明显升高(P<0.05,P<0.01);生地黄给药组大鼠体质量变化不明显(P>0.05),生地黄高剂量组大鼠血清中CRH、CORT含量明显降低(P<0.01),生地黄中剂量组大鼠血清中ACTH含量明显降低(P<0.05);各给药组大鼠肾上腺皮质均有所改善,尤其熟地黄给药组大鼠肾上腺皮质各层增厚明显,改善作用优于生地黄组。(2)与空白组比较,各组间覆盖度指数(Coverage)的差异无统计学意义(P>0.05),各组覆盖度良好;模型组丰度指数(Sobs、Ace、Chao)、多样性指数(Shannon)显著升高(P<0.01),Simpson指数显著降低(P<0.01)。与模型组比较,熟地黄中、高剂量组的Sobs指数明显降低(P<0.05),熟地黄给药组及生地黄高剂量组的Chao指数显著降低(P<0.05,P<0.01),熟地黄高剂量组的Simpson指数明显升高(P<0.05)。生地黄对肾阴虚大鼠肠道微生物群落丰富度和多样性的改变较小,而熟地黄可以更好地维持肾阴虚大鼠肠道微生物群落丰富度和多样性的稳定。(3)与空白组比较,模型组大鼠粪便中的厚壁菌门丰度显著降低,拟杆菌门、放线菌门的丰度显著升高;乳杆菌属的丰度显著降低(P<0.01),norank_f__Muribaculaceae及Bifidobacterium的丰度显著升高(P<0.01)。与模型组比较,益生菌组和熟地黄高剂量组的菌群丰度恢复趋势与空白组更加相近,显示其对菌群比例的调节作用最佳;各给药组的乳酸菌丰度均有所上升,其中益生菌组显著升高(P<0.01);norank_f__Muribaculaceae及Bifidobacterium丰度均有所下降,其中益生菌组及熟地黄中、高剂量组显著降低(P<0.01),效果明显优于生地黄组。各组样本的COG功能主要集中于氨基酸转运与代谢,碳水化合物转运与代谢,翻译、核糖体结构与生物发生,复制、重组和修复等方面,但各功能在不同组间的丰度信息不同,可能是由于肠道菌群失调导致的差异。(4)与空白组比较,模型组大鼠粪便中的乙酸、丁酸、丙酸、己酸水平明显降低(P<0.05,P<0.01),异丁酸水平明显上升(P<0.01)。与模型组比较,益生菌组及熟地黄低、中、高剂量组大鼠粪便中的乙酸、丁酸、丙酸水平明显升高(P<0.05,P<0.01),异丁酸水平明显降低(P<0.05,P<0.01);生地黄给药组的上述指标虽然有所改善,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论地黄经炮制后对肾阴虚证大鼠治疗作用增强,可能与其对肠道菌群的调节作用有关。

黄连酒炙过程中5种生物碱的变化研究

目的探究黄连炮制过程中5种生物碱的量变和质变。方法采用高效液相色谱法测定不同炮制方法、不同炮制温度对黄连酒炙品中生物碱含量的变化。结果酒炙黄连随着加热温度的增加,小檗碱、巴马汀、药根碱、黄连碱、表小檗碱在160℃时含量最高,此后含量逐渐降低。表小檗碱和黄连碱分别在170、240℃时含量降至最低以致高效液相色谱仪无法检出,在170℃时开始出现新的化学成分小檗红碱。结论黄连酒炙过程中5种生物碱发生了量变与质变,黄酒闷润与加热是关键的步骤,可以促进黄连生物碱的含量增加或转化为新的化学物质。辅料黄酒不能被乙醇替代。

HPLC测定五味子不同炮制品及不同部位有机酸含量

目的测定五味子不同炮制品及不同部位有机酸含量,探讨炮制对有机酸含量的影响。方法采用Ecosil C18-AQ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.5%冰醋酸(15∶85)为流动相、流速0.8 mL/min、检测波长260 nm测定原儿茶酸的含量,以乙腈∶15 mmol/L磷酸二氢钾缓冲盐溶液=3∶97(磷酸调pH=3)为流动相、流速1.0 mL/min、检测波长210 nm测定柠檬酸的含量。结果生五味子、酒五味子、醋五味子中原儿茶酸和柠檬酸含量分别为0.009 8%、0.012 4%、0.012 1%和14.829 3%、14.169 4%、14.365 0%;果肉、种仁中原儿茶酸和柠檬酸含量分别为0.012 3%、0.009 0%和22.881 0%、3.899 0%。结论五味子炮制后原儿茶酸含量明显增加,柠檬酸含量变化不大,有下降趋势。果肉中2种有机酸含量均高于种仁。

辅料麦麸质量标准研究

目的:规范辅料麦麸质量标准。方法:直观描述麦麸外观性状,按药典方法测定麦麸中水分、总灰分、酸不溶性灰分含量,紫外分光光度法测定总黄酮的含量,古蔡氏法检测砷盐,硫代乙酰胺法检测重金属盐。结果:各产地麦麸片状大小、颜色及面粉含量略有差异,总体外观性状差别不大。天津产地麦麸含水量、总灰分及酸不溶性灰分含量最高。辽宁产地麦麸总黄酮含量最高。砷盐含量均小于2ppm。重金属含量均低于10ppm。结论:辅料麦麸含水量应低于13.84%,总灰分含量低于3.16%,酸不溶性灰分含量低于0.52%。总黄酮含量不低于0.31%。砷盐和重金属盐含量符合限量标准,作为炮制辅料应采用粗粉。

正交实验优选油炸三七炮制工艺

目的：优选油炸三七炮制工艺。方法：以浸出物,三七皂苷R1,人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的质量分数为评价指标,采用正交设计法考察加油量、油炸时间、油炸温度对炮制工艺的影响,确定最佳三七油炸工艺。结果：最佳炮制工艺参数为药材与油量比值20∶40,油炸时间为7 min,油炸温度为120130℃。浸出物,三七皂苷R1,人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的质量分数依次为28.6%,0.88%,7.76%,3.02%。三七炮制品外观色泽为棕黄色,炮制品的质量稳定。结论：结合三七炮制品的质量及外观色泽,优选的三七炮制工艺稳定可行,为三七的炮制工艺规范提供参考。

五味子醋制前后降血糖作用比较研究

目的对五味子醋制前后降血糖作用进行比较。方法 SPF级大鼠,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)致大鼠高血糖模型,造模成功后随机分为模型对照组、阿卡波糖组、生五味子组和醋五味子组,另取未造模大鼠作为空白对照组,每组10只。各组均灌胃给予相应药液,分别在7天、14天以血糖仪测定各组大鼠血糖值,比较五味子、醋五味子降血糖作用。结果生五味子组、醋五味子组大鼠的血糖值,分别在给药7天、14天时降低最为明显,大鼠血糖值接近空白对照组。结论生五味子、醋五味子均表现出明显的降血糖作用,但作用趋势存在显著差异。

盐知母HPLC-PDA-CAD指纹图谱研究

目的:建立盐知母的HPLC-PDA-CAD指纹图谱,并测定7种主要成分含量,为科学评价和控制其质量提供可靠依据。方法:采用Thermo Hypersil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,Corona参数:氮气压力为35 psi(约241.3 k Pa),Filter:High,Range:200 p A。结果:建立了盐知母HPLC-PDA-CAD特征指纹图谱共有模式,标定了12个电雾式检测共有指纹峰和5个紫外检测共有指纹峰,指认了知母皂苷BⅡ、知母皂苷E、知母皂苷BⅢ、知母皂苷AⅢ、新芒果苷、芒果苷和宝藿苷-1的峰位,并测定这7种成分的含量。结论:建立了盐知母HPLC-PDA-CAD指纹图谱检测方法,可为盐知母的质量控制提供依据。

发酵炮制对胆南星药性与刺激性的影响

目的:通过比较天南星发酵炮制成胆南星的药性与刺激性变化,为胆南星发酵炮制“减毒改性”的传统理论提供现代药理学研究依据。方法:建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)寒饮蕴肺证大鼠模型和慢性阻塞性肺疾病加重期(AECOPD)热痰证大鼠模型,给药组按照2.52 g/kg剂量给药,持续给药7 d,观察大鼠体温、体质量变化,ELISA法测定大鼠血清中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、肾上腺素(E)、皮质醇(Cor)、C-反应蛋白(CRP)和支气管肺泡灌洗液中肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC)、白细胞介素(IL)-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(NEU)的含量,HE染色观察肺组织病理学状态。采用CCK-8检测不同药物浓度对HaCaT细胞增殖的影响,ELISA法检测HaCaT细胞上清液中IL-1β、IL-8、转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、前列腺素E2(PGE2)含量,考察药物对细胞刺激性的影响。结果:在COPD寒饮蕴肺证大鼠模型中,与模型组比较,天南星组能显著降低NE、IL-8、TNF-α、MUC5AC、EOS含量(P<0.01),胆南星组治疗效果不明显。在AECOPD热痰证大鼠模型中,与模型组比较,胆南星组能显著降低E、NE、Cor、CRP,IL-8、TNF-α、MUC5AC含量(P<0.01),增加NEU含量(P<0.01),天南星组治疗效果不明显。与空白对照组比较,天南星组各浓度能显著升高HaCaT细胞中IL-1β、IL-8、TGF-β1、ICAM-1、PGE2含量(P<0.01),而胆南星组较天南星组各浓度上述指标均显著降低(P<0.01)。结论:天南星经胆汁发酵炮制成胆南星后,功效由温化寒痰转化为了清热化痰且毒性降低,验证了天南星发酵炮制成胆南星的“减毒改性”传统理论。

巴戟天不同炮制品补肾壮阳作用的比较研究

为了比较巴戟天不同炮制品补肾壮阳药理作用,采用腺嘌呤灌胃给药的方法建立小鼠肾阳虚模型,分别给予巴戟天、巴戟肉、盐巴戟、制巴戟4种炮制品,以桂附地黄丸为对照,以小鼠体征、体重、睾丸系数、精囊腺系数、血清睾酮(T)、血清皮质醇(cortisol)、血清肌酐(Cr)、组织病理学检查等为评价指标。结果表明,各炮制品均可以改善肾阳虚小鼠的症状,其中盐巴戟组治疗效果最为显著,其次是制巴戟、巴戟肉、巴戟天。该实验结果可为阐明巴戟天炮制原理和补肾壮阳机制提供实验数据。

巴戟天不同炮制品HPLC指纹图谱研究

目的建立巴戟天Morinda officinalis不同炮制品蒽醌类成分指纹图谱,为巴戟天不同炮制品质量评价及炮制原理提供依据。方法采用HPLC色谱法,色谱柱Ecosil ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,柱温28℃,检测波长277 nm。对巴戟天4种炮制品进行指纹图谱研究,采用指纹图谱相似度软件进行分析。结果建立了巴戟天不同炮制品的蒽醌类成分指纹图谱,分别指认了巴戟天、巴戟肉、盐巴戟5个色谱峰,制巴戟6个色谱峰。不同产地巴戟天质量差异显著。巴戟天不同炮制品间蒽醌类成分差异不大,但其量有变化,制巴戟由于炮制过程中使用了辅料甘草水溶液,新增了成分甘草素。结论本法精密度、重复性、稳定性良好,利用HPLC指纹图谱分析方法,可较全面地反映巴戟天不同炮制品的差异。

五味子“生熟异用”之补肾阴作用

目的比较五味子、醋五味子、酒五味子对肾阴虚小鼠的影响。方法采用氢化可的松致小鼠肾阴虚模型,以六味地黄丸为阳性对照,以血清中环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷、乙酰胆碱、肌酐的量,小鼠肾脏、肝脏、脾脏的脏器指数为评价指标。结果五味子不同炮制品对肾阴虚小鼠均有一定治疗作用,可改善小鼠激素水平,增加脏器指数。其中酒制品作用最好,剂量之间无显著性差异。结论临床应用于治疗肾阴虚时应首选酒五味子。

炮制方法对中药狗脊3种成分的影响

目的:比较生狗脊及其不同炮制品水煎液中水溶性总蛋白、总酚酸、总多糖的含量变化,阐明炮制方法对中药狗脊中3种成分的影响。方法:采用紫外-可见分光光度法,分别在590、760、489 nm波长下测定生狗脊及砂烫狗脊、酒狗脊、盐狗脊、蒸狗脊等4种不同炮制品水煎液中水溶性总蛋白、总酚酸、总多糖的含量。结果:5种样品中水溶性总蛋白含量分别为4.03%、3.32%、3.13%、3.33%、3.49%,总酚酸含量分别为0.25%、1.34%、1.38%、2.34%、1.41%,总多糖含量分别为28.56%、36.06%、45.21%、49.60%、49.01%。结论:不同的炮制方法对狗脊中3种成分的含量均有一定的影响,其中水溶性蛋白质的含量在炮制后均呈现一定程度的降低,总酚酸和总多糖的含量在炮制后均呈现一定程度的升高。