蛴螬多糖的一般药理学及亚急性毒性研究

目的:观察与评价蛴螬多糖对动物神经系统、 呼吸系统、 心血管系统的影响以及其亚急性毒性的作用特点,探讨其一般药理学作用和可能的副作用,为进一步开发与应用蛴螬多糖提供实验依据.方法:旷野法观察小鼠自发活动;睡眠时间法观察蛴螬多糖与戊巴比妥钠合用对小鼠的催眠协同作用;疲劳转棒实验观察机能协调活动;使用无创血压分析仪测定血压、 心电图;对大鼠腹腔注射蛴螬多糖,14 d后进行脏器系数测定、 血常规检查、 血液生化指标检查以及组织病理学检查.结果:蛴螬多糖50、225、400 mg/kg腹腔注射,给药1次对小鼠自发活动无影响,给药1周对小鼠的机能协调活动无影响,与阈下剂量戊巴比妥钠无协同催眠作用;33、150、267 mg/kg腹腔注射1次,对大鼠呼吸频率无影响,但可略升高血压;亚急性毒性试验中,高剂量2周重复给药可明显增加血小板数量,降低清蛋白、 高密度脂蛋白胆固醇的量,但以上指标均在正常范围内;对其它各项指标和组织结构等没有影响.结论:蛴螬多糖对呼吸系统、 神经系统均无明显影响,对大鼠无明显毒性,是比较安全的蛴螬活性成分.

血管性痴呆治疗的相关研究进展

目的汇总血管性痴呆常见的发病机制以及相关药物治疗和辅助治疗的研究成果,为该病的防治及临床用药提供理论基础及方向。方法查阅并整理国内外近年的相关文献,进行归纳总结。结果阐述并总结了盐酸多奈哌齐、丁苯酞、尼莫地平和丹参酚B等常见药物治疗以及辅助治疗方法针灸和高压氧治疗。结论血管性痴呆的发病机制尚不完全明确,临床用药及实验室研究表明,针对不同病人的发病机制应实施个体化的药物治疗方案。

基于“肺肠同治”论诃子治疗肠缺血再灌注损伤

目的基于“肺肠同治”理论研究诃子对肠缺血再灌注损伤(IIRI)小鼠肠、肺损伤的治疗作用,并初步探讨诃子发挥此作用是否基于减轻IIRI小鼠全身性炎症反应。方法选取30只8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:假手术(Sham)组,模型(IIRI)组,IIRI+诃子低、中、高剂量组,每组6只小鼠。采取夹闭肠系膜上动脉45 min、再灌注90 min的方法建立IIRI模型。诃子给药各组灌胃不同剂量诃子,1次/d,连续7 d;Sham组开腹不造模,仅在同时间点灌胃生理盐水;IIRI组造模后灌胃生理盐水。HE染色法观察小鼠肠、肺组织病理形态变化,TUNEL染色法检测肠道细胞的凋亡情况,ELISA试剂盒检测血清中的TNF-α、IL-1β和IL-6水平。结果与Sham组相比,IIRI组小鼠肠道整体出现水肿、血瘀及黏连现象,肠横切面显示固有层结构破坏,肠黏膜绒毛顶端上皮下间隙明显增宽,绒毛顶端部分脱落,而经诃子给药治疗后整体肠道损伤程度得到显著改善;IIRI组小鼠Chiu s评分升高(P<0.01),而诃子给药组Chiu s评分显著降低(P<0.01);IIRI组小鼠肠道细胞凋亡数量明显增多,而诃子给药组小鼠肠道细胞凋亡数量减少;IIRI组小鼠肺组织切片HE结果出现明显的肺泡壁增厚和大量炎性细胞浸润肺泡间隙的情况,而诃子给药组的肺损伤情况得到明显改善。与Sham组相比,IIRI组小鼠肺损伤评分显著增高(P<0.01),而诃子给药后肺损伤评分降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);IIRI组小鼠肺湿/干质量比比值增高(P<0.05),而诃子给药组小鼠肺湿/干质量比比值降低(P<0.05),肺水肿程度得到显著改善;IIRI组小鼠血清中促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高(P<0.01),而诃子剂量依赖性地降低小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平,且差异具有统计学意义(P<0.01)。结论诃子可有效减轻小鼠IIRI,抑制肠道细胞凋亡,同时能减轻小鼠肠缺血再灌注后引起的肺部损伤,发挥肺肠同治作用,该作用与诃子降低血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平,减轻小鼠体内炎症反应有关。

山茱萸叶多糖的理化性质和抗氧化活性

【目的】研究山茱萸叶多糖(PFC)的理化性质和单糖组成,分析其体外抗氧化活性及其对H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤的保护作用,为山茱萸资源的开发和利用提供理论依据。【方法】以干燥的山茱萸叶为原料,粉碎后经过水提醇沉、除蛋白、脱色等步骤后得到PFC;测定其总糖、糖醛酸、可溶性蛋白质和硫酸根含量;1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱法分析其单糖组成;测定PFC对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)的清除能力及亚铁离子络合能力;检测不同质量浓度PFC溶液对H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤的保护作用,测定细胞内丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)水平。【结果】PFC含总糖(612.76±1.72) mg/g,糖醛酸(228.03±0.54) mg/g,可溶性蛋白质(9.53±0.38) mg/g,硫酸根(25.21±0.19) mg/g。PFC由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖构成,其物质的量比依次为1.6∶3.2∶6.2∶5.0∶13.0∶14.1∶1.0。PFC对DPPH·的IC50值为0.13 mg/mL,与对照维生素C(IC50为0.15 mg/mL)相当;对·OH的IC50值为0.56 mg/mL,低于对照维生素C(IC50为0.76 mg/mL)。PFC溶液可明显提高经H2O2诱导的HepG2细胞的相对存活率,降低其胞内MDA和ROS水平,对氧化损伤HepG2细胞具有保护作用,且呈剂量效应。【结论】山茱萸叶多糖具有良好的抗氧化活性,在保健食品和生物药品领域具有开发前景。

蛴螬多糖组分HDPS-2Ⅱ的理化性质及对肝癌的抑制作用

目的探讨蛴螬均一性多糖组分HDPS-2Ⅱ对肝癌的抑制作用。方法采用碱水提取,反复冻融除蛋白等方法获得蛴螬总多糖;用离子交换色谱法和尺寸排阻色谱法分离纯化总多糖获得均一性多糖组分HDPS-2Ⅱ。用高效尺寸排阻色谱法(HPSEC)和考马斯亮蓝法等测定HDPS-2Ⅱ的理化性质。采用MTT、划痕实验和H22肝癌移植瘤小鼠模型测定蛴螬多糖体内外的抗肿瘤活性。结果蛴螬多糖组分HDPS-2Ⅱ的相对分子质量为8.2×103 Da,蛋白质、糖醛酸、硫酸基和氨基含量分别为2.08%,12.08%,0.24%和4.89%。HDPS-2Ⅱ体外可抑制肿瘤细胞的迁移,体内可显著抑制小鼠体内肿瘤的生长,HDPS-2Ⅱ中、高剂量组抑瘤率分别为52.0%和56.9%;与环磷酰胺(CTX)组比较,蛴螬多糖组分HDPS-2Ⅱ可显著增高脾脏指数、白细胞和淋巴细胞数量(P<0.05)。结论蛴螬多糖组分HDPS-2Ⅱ具有抑制细胞体外迁移、小鼠移植瘤的生长和免疫调节作用,具有进一步研发的价值。

蛴螬多糖的急性毒性及对肝损伤的保护作用

目的评价蛴螬多糖的急性毒性并研究其对肝损伤的保护作用。方法用最大耐受量法测定蛴螬多糖小鼠腹腔注射的急性毒性。高剂量重复给药2周,观察肝功能及病理改变。采用四氯化碳(CCl_4)建立小鼠急性肝损伤模型,通过检测血清酶水平及肝组织病理改变来评价蛴螬多糖对急性肝损伤的影响。体外培养正常人肝细胞HL7702,MTT法测定蛴螬多糖对肝细胞活力的影响,丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量测定分别检测蛴螬多糖对脂质过氧化的影响。结果蛴螬多糖对小鼠腹腔注射的最大耐受量为8 g·kg^(-1)。高剂量重复给药2周可明显降低正常大鼠肝脏中谷草转氨酶(AST)的含量,但对肝组织结构和凝血时间等无明显影响。蛴螬多糖25,50和100 mg·kg^(-1) 3个剂量组均可降低模型血清谷丙转氨酶(ALT)、AST和碱性磷酸酶(ALP)的水平,减轻肝损伤的组织病理变化程度;且呈剂量依赖性。体外实验发现,蛴螬多糖质量浓度在0.1～100 mg·L^(-1)范围内对肝细胞无毒,质量浓度为0.3～100 mg·L^(-1)时可抑制受损肝细胞,存活率下降;蛴螬多糖能明显抑制受损肝细胞MDA水平的升高和SOD活性的减弱。结论蛴螬多糖腹腔注射无明显毒性,大剂量注射未引起肝损伤;对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抗氧化有关。

Boc5对脑缺血再灌注小鼠血脑屏障损伤的保护作用

目的探讨胰高血糖素样1受体(GLP-1R)小分子激动剂Boc5对脑缺血再灌注损伤(CIRI)后血脑屏障损伤的作用及机制。方法将C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组和Boc5高、中、低剂量组。模型组以及Boc5高、中、低剂量组行大脑中动脉栓塞再灌注(MCAO/R)损伤,Boc5高、中、低剂量组在MCAO/R损伤前连续给药7 d不同剂量的Boc5,假手术组及模型组每日给予等体积生理盐水。神经功能评分、足误实验和转棒实验评价小鼠行为学损伤;检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)水平;评价小鼠血液生化指标变化;2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法检测缺血梗死面积;分光光度法检测脑组织伊文氏蓝含量;Western Blot法检测缺血半暗区闭合蛋白、紧密连接蛋白-5表达;免疫荧光法检测缺血半暗区星形胶质细胞标志物GFAP表达;酶联免疫吸附(ELISA)法检测星形胶质细胞氧糖剥夺损伤/复氧(OGD/R)后炎性因子水平。结果实验结果表明,Boc5能显著改善行为学缺陷,可降低MCAO/R损伤后SOD、MDA和CAT水平,显著减小梗死面积,显著减轻MCAO/R所致血脑屏障损伤,显著降低星形胶质细胞增生及活化水平及星形胶质细胞OGD/R损伤后的炎性因子水平。结论Boc5可减轻MCAO/R损伤所致小鼠血脑屏障损伤,其机制可能是通过减轻星形胶质细胞炎症。

平消胶囊的抗肿瘤作用及其机制研究

目的:观察平消胶囊的抗肿瘤作用及其初步的作用机制。方法:提取平消胶囊活性部位,用于体外抗肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡;灌胃给予平消胶囊,采用4种人体肿瘤裸鼠移植瘤模型观察体内抑瘤作用及初步毒性反应。结果:平消胶囊提取物对10种人体肿瘤细胞具有一定的体外增殖抑制作用,体外作用72h,其IC50值在400-900μg/m L之间。平消胶囊连续经口灌胃给药14d,对人乳腺癌MDA-MB-231、人甲状腺癌SW579、人肠癌colo205、人胰腺癌PANC-1的最大抑瘤率分别达到59.00%、53.13%、49.51%、52.14%,且对动物体质量和脏器没有明显影响。平消胶囊提取物能诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231和人甲状腺癌细胞SW579凋亡。结论:平消胶囊对人乳腺癌、甲状腺癌、肠癌、胰腺癌的裸鼠移植瘤生长有明显的抑制作用,量效关系明显,且对主要脏器无明显影响,其机制之一为诱导肿瘤细胞的凋亡。