长春花脱乙酰氧基文多灵-4-羟化酶基因启动子的克隆与生物信息学分析

通过基因组步行技术克隆到长春花脱乙酰氧基文多灵-4-羟化酶基因上游905bp启动子序列,生物信息学分析发现该序列中存在多个与光照诱导有关的顺式元件,同时也发现一个与长春花特异的顺式作用元件JERE类似的短序列,推测该序列是茉莉酸诱导途径中转录因子ORCA3的特异结合位点。

长春花细胞C_(20)hi生物碱超量合成及激素自养的分子机制探讨

以长春花激素自养型细胞株C20hi及其母株C20D为材料,构建抑制性差减cDNA文库,斑点杂交筛选后对阳性克隆进行测序,共得到104个不同的差异表达基因片段。将这些序列在GenBank中进行BLAST比对分析,其中28个与已知基因具有很高的同源性。对部分基因的分析发现长春花细胞C20hi中g10h-like、CrPS(Catharanthus roseus protein S)、HyPRP(hybrid prolin-rich protein)、PNAE(polyneuridine aldehyde ester-ase)-like等基因的差异表达可能与该细胞株生物碱超量合成有关;而细胞色素P45071D和CR5基因的差异表达则可能与其激素自养有关。此外,培养基中2,4-D的缺失引起的TDC等酶活性的增强也可能是C20hi细胞生物碱超量合成及激素自养的原因之一。