咖啡酸对同型半胱氨酸诱导的白细胞炎症介质分泌的影响

目的研究咖啡酸(caffeic acid,CA)对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的小鼠外周血白细胞炎症介质分泌的影响。方法分离8周龄雄性C576J/BL小鼠外周血白细胞,用Hcy(200μmol/L)和CA(100μmol/L)处理30 min。用流式微球法检测白细胞培养基中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的水平。用激光共聚焦显微镜观察白细胞中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的表达。用western blot检测白细胞中磷酸化的细胞外信号调节激酶(phospho-extracellu-lar signal-regulated protein kinase 1/2,p-ERK1/2)蛋白的表达。结果小鼠外周血白细胞用Hcy处理后,培养基中TNF-α水平没有显著的变化,而MCP-1水平显著升高,白细胞MPO分泌增加,p-ERK1/2蛋白表达显著增加。CA抑制了Hcy诱导的小鼠外周血白细胞炎症介质MCP-1和MPO的分泌,以及p-ERK1/2蛋白表达的增加。结论CA可以抑制Hcy诱导的小鼠外周血白细胞MCP-1和MPO的释放,该作用可能与其抑制p-ERK1/2的表达有关。

咖啡酸对高同型半胱氨酸引起的小鼠软脑膜细静脉内白细胞滚动和黏附的抑制作用

目的：研究咖啡酸（CA）对同型半胱氨酸（Hcy）引起的小鼠软脑膜细静脉内滚动和黏附白细胞的抑制作用。方法：取雄性C576J/BL小鼠（体重18~22g）分成3组,每组5只,Hcy组皮下注射Hcy（0.1mg/g体重）0.2ml,Hcy＋CA组皮下注射Hcy（0.1mg/g体重）0.1ml后即刻肌肉注射CA（10mg/kg体重）0.1ml,Control组皮下注射生理盐水0.2ml,4h后采用研磨法建立脑非创伤性观察窗,用动态微循环观察系统观测各组小鼠软脑膜细静脉内滚动和黏附的白细胞数量。之后取脑组织,石蜡切片,用免疫组织化学方法观察脑皮层组织中微血管内皮细胞E-选择素（E-selectin）及细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达。结果：与Control组相比,Hcy组小鼠软脑膜细静脉内滚动和黏附的白细胞数量显著增加（P〈0.01）,且脑皮层微血管内皮E-selectin及ICAM-1的阳性区域也增加。Hcy＋CA组小鼠软脑膜细静脉内白细胞的滚动和黏附数量明显少于Hcy组（P〈0.05）,微血管内皮的E-selectin及ICAM-1表达也明显下调。结论：CA可以抑制Hcy引起的小鼠软脑膜细静脉内白细胞的滚动和黏附,该作用与其抑制脑微血管内皮E-selectin及ICAM-1的表达有关。