基于黄芪汤益气效应解析代偿期乙肝肝硬化的“虚损”病机理论

中医病因病机理论的继承与创新是中医准确认识疾病、提高中医药临床疗效、引领中医学术发展的关键基础理论问题。基于课题组前期对肝硬化"虚损生积"病机认识以及从方剂效应探析中医病机理论病理特点的研究思路,以黄芪汤为载体开展的系统基础与临床研究发现,"益气补虚"黄芪汤可显著改善代偿期乙肝肝硬化的肝组织学病理变化,减轻肝细胞坏死,改善肝细胞功能,促进早期肝硬化组织学的逆转。黄芪与甘草协同增效的作用机制在于抑制促纤维化因子——转化生长因子(Transforming Growth Factor,TGF)β1生成及信号转导,抑制肝星状细胞的活化及细胞外基质的生成。本文为乙肝肝硬化等慢性肝病的虚损病机理论提供了临床及实验依据,深化和丰富了中医对肝硬化虚损病机中气虚为先的认识;提示气虚与细胞形质转化及其功能的病变有关,为进一步深入研究、提高中医药治疗慢性肝病的临床疗效提供了治法理论基础与临床实践依据。

扶正化瘀制剂抗肝纤维化和治疗慢性肝病的临床疗效

本文介绍扶正化瘀制剂(胶囊/片剂)抗肝纤维化和肝硬化,联合抗乙型肝炎病毒核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎及其肝硬化,联合其他药物治疗原发性胆汁性肝硬化和非酒精性脂肪性肝炎,以及治疗肝硬化相关的门静脉高压和代谢障碍等的临床疗效,并介绍扶正化瘀片在美国进行的用于抗慢性丙型肝炎肝纤维化的Ⅱ期临床试验情况。

扶正化瘀胶囊/片治疗肝纤维化和肝硬化的临床研究进展

本文综述2010—2013年发表的扶正化瘀胶囊/片临床研究论文。扶正化瘀胶囊/片临床治疗肝纤维化和肝硬化疗效明确,用以治疗肝硬化并发症,也取得较好疗效。数十项临床研究证实,扶正化瘀胶囊/方与抗乙肝病毒的核苷类(核苷类似物)药物、普通干扰素或聚乙二醇干扰素、熊去氧胆酸以及其他药物联用,治疗慢性乙型肝炎和其他慢性肝病所致肝纤维化和肝硬化,提高了疗效。此外,也开展了利用人体样本揭示扶正化瘀胶囊的临床作用机制的研究。扶正化瘀胶囊/片的未来研究,可能会有如下趋势:1)扩大适应证;2)进一步联合应用其他药物以提高临床疗效;3)优化组方;4)开展新剂型的研究;5)进一步揭示扶正化瘀复方的作用机制。

基于“肝病传脾”理论探讨肝源性糖尿病病因病机

目的:基于"肝病传脾"理论,探讨肝源性糖尿病的主要病因病机及脾虚在导致肝源性糖尿病中的重要作用。方法:收集肝源性糖尿病、2型糖尿病患者的中医证候信息、72h动态血糖(CGMS)监测等指标,通过统计学方法,探讨肝源性糖尿病的主要病因病机。结果:发现肝糖组与糖尿病组各50例中,脾虚证分别占(32%vs.2%,P<0.01),阴虚证分别占(28%vs.42%,P<0.01),2组间差异有统计学意义,提示肝糖组患者以脾虚证为主要表现。从肝糖组(24例)、糖尿病组(50例)的CGMS监测情况可以看出,肝糖组与糖尿病组比较,其血糖<3.9 mmol/L时间百分率(PT3.9)(7.08±0.19%vs.5.15±0.21%,P<0.01),血糖>7.8mmol/L时间百分率(PT7.8)(50.92±0.19%vs.34.77±0.42%,P<0.01),均与糖尿病组比较差异有统计学意义,提示肝糖组患者的低血糖发生率及高血糖发生率均较高。其中,脾虚证肝糖组患者共7例,其平均血糖(MBG)与非脾虚证肝糖组共17例患者比较差异无统计学意义,而其PT3.9(即低血糖发生率)较非脾虚证肝糖组患者明显升高(12.86±0.26%vs.4.71±0.15%,P<0.05),提示脾虚证肝源性糖尿病患者较非脾虚证肝源性糖尿病患者更易发生低血糖。结论:脾虚是导致肝源性糖尿病的一个主要病因病机,肝源性糖尿病的病因病机符合"肝病传脾"理论。

加强中医药抗肝纤维化

器官纤维化已成为影响人类健康的一大类疾病。据报道，在工业化国家，45％的死亡病例与纤维化有关。因此，开展抗纤维化的研究十分必要。在各种器官纤维化中，肝纤维化的研究可能相对较易，可望获得突破性成果。其理由如下。病例多。在肝病领域，各种慢性肝病都可伴有肝纤维化。

下瘀血汤对四氯化碳诱导的肝硬化大鼠肝脏血管新生的抑制作用

目的:探讨下瘀血汤对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的大鼠肝硬化形成过程中肝脏血管新生的影响。方法:采用50%CCl4-橄榄油溶液1mL/kg剂量腹腔注射,每周2次,共9周,制备大鼠肝硬化模型。造模3周和6周后,随机抽取正常及模型大鼠各6只,处死作动态观察,其余模型大鼠随机分为模型对照组(15只)和下瘀血汤组(11只),同龄正常大鼠6只设为正常对照。自第7周开始灌胃给予下瘀血汤干预治疗3周,于第9周末取材,苏木精和伊红染色及天狼星红染色观察肝组织病理学变化,免疫荧光法和蛋白质印迹法检测肝组织中血小板内皮细胞黏附分子1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)、第Ⅷ因子相关抗原(von Willebrandfactor,v WF)的表达,蛋白质印迹法检测肝组织中血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGF receptor-2,VEGFR2)、补体衰变加速因子(complement decay-accelerating factor,DAF)和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth actin,α-SMA)的表达,明胶酶谱法检测肝组织中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9的活性。结果:与正常组比较,模型大鼠肝组织受损,脂肪变性显著,胶原纤维沉积严重,随造模时间的推移,肝组织CD31、v WF、VEGF、VEGFR2、DAF和α-SMA蛋白表达逐渐升高,MMP-2、MMP-9活性显著增强(P<0.01)。与9周模型组比较,下瘀血汤显著改善肝组织损伤、脂肪变性及胶原纤维的沉积,降低肝组织CD31、v WF、VEGF、VEGFR2、DAF和α-SMA蛋白的表达及MMP-2、MMP-9的活性(P<0.01)。结论:下瘀血汤可有效地抑制CCl4诱导的大鼠肝硬化形成过程中的血管新生,其作用机制主要在于抑制肝星状细胞的活化,下调MMP-2、MMP-9的活性以及消解新生血管的完整性。

抑制人肝星状细胞株迁移的中药组分筛选

目的从6种已证实有抗肝纤维化作用的中药组分中,筛选出抑制肝星状细胞迁移的最佳者。方法培养人肝星状细胞株(LX-2),用细胞迁移杯培养方法分别观察不同浓度梯度(10-4、10-5、10-6、10-7mol/L)的青蒿琥酯、灯盏花素、红景天苷、丹参酚酸B盐、粉防己碱、黄芪总甙对血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)(10 ng/ml)诱导的LX-2迁移的抑制,从而筛选出各组分最佳作用浓度;随后比较各组分最佳浓度对LX-2迁移的抑制作用,而筛选出最佳组分。结果 6种中药组分均可抑制PDGF诱导的LX-2的迁移;但10-4mol/L丹参酚酸B盐、10-4mol/L黄芪总甙、10-4mol/L与10-5mol/L粉防己碱对LX-2形态有不同程度的影响;依照药物筛选原则,最终选出10-4mol/L青蒿琥酯、10-4mol/L灯盏花素、10-5mol/L红景天甙、10-5mol/L丹参酚酸B盐、10-6mol/L粉防己碱、10-6mol/L黄芪总甙为最佳浓度;将各组分最佳浓度进行统一比较证实,10-5mol/L红景天苷具有更好的抑制迁移作用。结论 10-5mol/L红景天苷抑制PDGF诱导的LX-2迁移的作用最佳。

NK细胞与肝纤维化的关系及中药对NK等免疫细胞的影响

肝星状细胞（Hepatic stellate cell,HSC）是位于肝索与肝窦壁间Disse间隙内的间质细胞,分静止与活化两种表型,静止状态的HSC主要参与储存脂肪与维生素A.在感染、酒精、化学药物等因素影响下,静止的HSC被激活,分泌大量细胞外基质（Extracellular matrix,ECM）,在肝脏过度沉积,导致肝纤维化.肝纤维化如果没有得到有效的治疗措施干预,随着病情的持续发展,肝脏结构与功能进一步遭到破坏,最终将发展为不可逆的肝硬化.

血清蛋白质组学无创诊断肝纤维化价值研究

目的探索血清蛋白质组学诊断肝纤维化的价值。方法选取2008年8月至2011年1月上海中医药大学附属曙光医院收治的103例乙型肝炎后肝纤维化患者,同时选取28例慢性乙型肝炎患者和29名健康志愿者的血液,分离血清,以纳米磁珠预处理,MALDI-TOF-MS检测,应用Autoflex Analysis软件对采集图谱进行分析。结果筛选出15个差异表达的蛋白质峰,建立乙型肝炎肝纤维化血清蛋白质诊断模型;筛选出2个差异表达的蛋白质峰,建立慢性乙型肝炎血清蛋白质诊断模型;筛选出各组差异表达的蛋白质峰,建立乙型肝炎肝纤维化Child-PughA、B、C级血清蛋白质模型。结论以血清蛋白质组建立的乙型肝炎肝纤维化和慢性乙型肝炎诊断模型,有助于临床鉴别诊断肝纤维化。

抑制内皮素诱导的肝星状细胞收缩的中药成分筛选

目的:观察5种经研究有抗肝纤维化作用的中药成分:灯盏花素、青蒿琥酯、红景天苷、黄芪总甙、粉防已碱对肝星状细胞(HSCs)收缩的影响,筛选出能抑制HSCs收缩的中药成分。方法:分离培养大鼠HSCs,通过MTT及细胞形态观察研究100～0.1μmol/L灯盏花素、青蒿琥酯、红景天苷、黄芪总甙、粉防已碱对HSCs增殖及毒性作用,以10nmol/L内皮素(ET-1)为刺激因子,用凝胶收缩实验观察各中药成分对ET-1刺激下HSCs收缩的影响,筛出能抑制HSCs收缩的成分,凝胶面积用"%原始面积"表示。结果:100～0.1μmol/L灯盏花素、青蒿琥酯、黄芪总甙、粉防已碱具有浓度依赖性地抑制HSC增殖的作用,其中100μmol/L黄芪总甙,100μmol/L及10μmol/L粉防己碱对HSCs有毒性作用。100μmol/L及10μmol/L灯盏花素凝胶面积分别为74.33±5.5%和67.39±3.47%,与ET-1组面积(49.96±4.46%)相比有显著差异(P﹤0.01);100μmol/L及10μmol/L青蒿琥酯凝胶面积分别为79.62±1.95%和58.86±2.99%,与ET-1组面积(39.85±3.12%)相比有显著差异(P﹤0.01)。100～0.1μmol/L红景天苷、10～0.1μmol/L黄芪总甙和1及0.1μmol/L粉防己碱凝胶面积与ET-1组相比无明显差异。结论:5种中药成分中,100及10μmol/L灯盏花素及青蒿琥酯均能抑制ET-1诱导的大鼠HSCs收缩。

扶正化瘀胶囊对肝硬化患者生存率的影响

目的探讨扶正化瘀胶囊对肝硬化患者生存率的影响。方法采用回顾性研究的方法，收集上海中医药大学附属曙光医院肝硬化科自2006年1月1日至2008年12月31日各种类型肝硬化患者的住院资料，收集患者的基本信息、诊断治疗情况、实验室检查等数据。用Kaplan-Meier等生存分析方法探讨扶正化瘀胶囊对于肝硬化患者生存率的影响。研究以患者第一次入院日期作为观察起点，死亡日期或截止日期作为随访观察终点（结局），随访截至2014年4月1日，在该时间点未出现结果事件（死亡）的均视为截尾值。将结局和结局出现的时间以及截尾数据同时考虑，用寿命表法计算生存率，绘制生存曲线，以Kaglan-Meier乘积极限法计算生存时间的算术均数及中位生存时间，用Logrank法检验两者之间的差异。结果2006年至2008年随访的430例肝硬化患者有191例死亡，239例生存或删失，平均死亡构成比为55．6％，平均生存构成比为44．4％。用寿命表法得出半年生存率为70％，1年生存率为640／0，2年生存率为58％，5年生存率为48％。未服用扶正化瘀患者中位存活时间为112．1周，服用扶正化瘀胶囊患者的中位生存时间为351．6周，2组生存率差异有统计学意义（P=0．000）。病因为乙型肝炎的患者（313例）中未服用扶正化瘀胶囊组（164例）中位存活时间为195．9周，5年生存率为440／0；服用扶正化瘀胶囊组（149例）的中位生存时间为336．9周，5年生存率为59％；2组生存率差异有统计学意义垆：0．038）。在非乙型肝炎患者（117例）中未服用扶正化瘀胶囊组（68例）中位生存时间为78．1周，5年生存率为32％；服用扶正化瘀胶囊组（49例）的中位存活时间为277．4周，5年生存率为53％；2组生存率差异有统计学意义（P=0．013）。代偿期肝硬化（92例）的2组患者的中位生存时间均为440周，其中未服用扶正化瘀胶囊47例患者的5年生存率为65％；服用扶正化瘀胶囊45例患者为82％；2组生存率差异有统计学意义（P=0．027）。失代偿期肝硬化患者（338例）中未服用扶正化瘀胶囊组（185例）的中位生存时间为60．3周，5年生存率为33％；服用扶正化瘀胶囊组（153例）的中位生存时间为267．7周，5年生存率为51％；2组生存率差异有统计学意义（P=0．001）。结论服用扶正化瘀胶囊可以改善肝硬化患者的预后，提高生存率，具有较好的远期疗效。