3种不同睡眠剥夺小鼠模型的建立及其在中医药研究中的应用

目的建立3种小鼠睡眠剥夺模型并进行评价,探讨其在中医药研究中的应用。方法分别采用换笼、轻触、合并法(轻触+换笼)制作3种部分睡眠剥夺模型,观察睡眠剥夺对小鼠体征、自主活动及学习记忆的影响。结果睡眠剥夺后,与空白组比较,换笼、轻触、合并组小鼠平均体重差异明显,且合并组小鼠下降更为明显;在自主活动测试中,轻触组与合并组小鼠的自主活动次数、活动路程均明显减少(P<0.05);在水迷宫测试中,换笼、轻触、合并组小鼠上平台潜伏期时间延长,目标象限时间缩短(P<0.05,P<0.01),且合并组更为明显。结论合并法(轻触+换笼)睡眠剥夺效果明显优于换笼法和轻触法,且制作简单,还可同时对多只小鼠进行睡眠剥夺,经济适用可行可靠。同时可尝试在本模型的基础上叠加中医证候因素用于探讨中医药治疗失眠的病因病机。

酸枣仁汤对REM睡眠剥夺老年大鼠脑神经细胞凋亡及c-fos基因表达水平的影响

目的观察酸枣仁汤对快动眼(REM)睡眠剥夺导致的老年大鼠脑皮层和海马部位神经细胞凋亡及cfos基因表达Fos蛋白水平变化的影响。方法将自然衰老24月龄Wistar大鼠随机分成空白对照组(等容生理盐水),老年REM睡眠剥夺组(等容生理盐水),阳性对照组(舒乐安定0.18 mg/(kg·d)),酸枣仁汤低、高剂量组(12.96,25.92 g/(kg·d))。各组灌胃给药2周后,除空白对照组外其余各组用自制改良多平台法剥夺大鼠睡眠48 h制作老年大鼠REM睡眠剥夺模型。通过原位末端标记法(TUNEL)测定各组大鼠大脑皮层和海马部位神经细胞凋亡水平,用免疫组化法检测c-fos基因表达Fos蛋白的水平变化,探讨酸枣仁汤对老年失眠引起的脑神经损害及c-fos基因表达变化的影响。结果与空白对照组比较,老年REM睡眠剥夺组大鼠脑皮层和海马部位神经凋亡细胞增多,Fos蛋白表达明显增高。与老年REM睡眠剥夺组比较,酸枣仁汤组脑神经凋亡细胞及Fos蛋白表达明显下降,但仍高于正常对照组。结论c-fos基因很可能参与了老年大鼠REM睡眠剥夺后的细胞凋亡过程,酸枣仁汤可能是通过抑制脑组织c-fos基因表达上调,抑制神经细胞凋亡而发挥脑保护作用。

酸枣仁汤对GABAB1R介导快动眼睡眠剥夺老年大鼠下丘脑室旁核cAMP-PKA-CREB信号通路的影响

目的观察酸枣仁汤对快动眼睡眠被剥夺老年大鼠下丘脑室旁核(PVN)cAMP-PKA-CREB信号通路的影响。方法将自然衰老24月龄Wistar大鼠随机分成空白对照组(等容生理盐水),老年REM睡眠剥夺组(等容生理盐水),阳性对照组(舒乐安定0.18 mg/(kg·d),酸枣仁汤低、高剂量组(12.96、25.92 g/(kg·d)。各组灌胃给药2周后,除空白对照组外其余各组用自制改良多平台法剥夺大鼠睡眠48 h制作老年大鼠REM睡眠剥夺模型。采用免疫组化方法检测大鼠PVN内GABAB1R阳性反应物的变化;采用酶联免疫法和免疫组织化学法检测PVN部位环腺苷酸(cAMP)和磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(CREB)水平变化,检测PVN匀浆液中磷酸二酯酶(PDE)活性的变化。结果与空白对照组比较,老年REM睡眠剥夺组大鼠PVN部位的GABAB1 R阳性反应物数目明显增多(P<0.01),cAMP和p-CREB水平均明显降低,PDE活性明显增高(P<0.01);与老年REM睡眠剥夺组比较,酸枣仁汤低、高剂量组大鼠PVN部位的GABAB1 R阳性反应物数目明显减少(P<0.01),cAMP和p-CREB水平均明显提高,PDE活性明显降低(P<0.01)。结论实验结果表明,酸枣仁汤可能通过增强GABAB1 R表达来激活cAMP-PKA-CREB信号通路而发挥安神健脑作用。

中药安神制剂研发的探析

随着各种压力的增大,失眠成为临床上常见疾病。对于失眠的治疗,安神中药制剂以其独特的优势发挥着显著的疗效。笔者就安神中药制剂的研发现状和存在的问题,以及具体实践研究作相关的探讨,以期为中药安神制剂的应用开发提供参考依据。

老年肝郁失眠证候大鼠模型的建立和评价

目的:建立并评价复合型老年肝郁失眠证候大鼠模型。方法:Wistar大鼠随机分为环境对照组,单因素模型组(睡眠剥夺组),复合型模型组,复合型模型+舒郁安神方35 g.kg-1.d-1治疗组。采用D-半乳糖腹腔注射60 mg.kg-1.d-1大鼠6周致亚急性衰老模型,然后采用夹尾刺激法致肝郁,每次刺激30 min,1日2次,持续1周,最后放入自制睡眠剥夺箱中进行快速眼动睡眠(REMS)剥夺48 h,制作老年肝郁失眠证候大鼠复合型模型。观测大鼠体征、脑部自由基水平及血浆6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)含量。结果:与环境对照组、单因素模型组、舒郁安神方组比较,老年肝郁失眠证候复合型模型组大鼠丙二醛(MDA)、TXB2含量均显著升高(P<0.01),而超氧化物歧化酶(SOD)活性、6-keto-PGF1a含量及6-keto-PGF1a/TXB2均显著降低(P<0.01)。结论:老年肝郁失眠证候大鼠模型具有临床证候病理特征,是可行、可靠的复合型动物模型。