复方贞术调脂胶囊对MS大鼠胰岛素抵抗及胰岛素信号PI-3K的影响

目的观察复方贞术调脂胶囊(FTZ)对代谢综合征(MS)大鼠胰岛素抵抗和胰岛素信号磷脂酰肌醇-3-激酶(PI-3K)的影响,探讨FTZ治疗MS和改善胰岛素抵抗的作用机制。方法采用高热量饲料喂养复制MS大鼠模型,经FTZ治疗8周,测量体重、腹围、血脂、空腹血糖和胰岛素水平,RT-PCR检测脂肪组织PI-3Kp85亚基的mRNA表达水平。结果 FTZ可降低MS大鼠血清TG、TC、空腹血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数,升高血清HDL-C水平、减轻体重和肥胖,上调大鼠脂肪组织PI-3Kp85 mRNA的表达。结论 FTZ可调节MS大鼠糖脂水平,改善胰岛素抵抗,对MS具有防治作用。FTZ上调胰岛素信号PI-3K,可能是其治疗MS和改善胰岛素抵抗的作用机制之一。

肝细胞亲和-HPLC法体外筛选三七总皂苷(PNS)抗肝细胞脂肪变性的活性成分

目的通过肝细胞亲和-HPLC法体外筛选三七总皂苷(PNS)中降脂活性成分。方法采用HepG2细胞系与PNS体外共孵育,联合HPLC法检测孵育后的细胞解离液,色谱柱为Aglient-C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱(0~35 min,乙腈的体积百分比为29%;70~100 min,乙腈的体积百分比为29%→40%),流速为1.0 mL/min,检测波长为203 nm;采用体外肝细胞脂肪变性模型对PNS中亲和成分的降脂活性进行评价。结果从PNS中筛选出2个肝细胞特异性亲和成分,分别为人参皂苷Rb_1和人参皂苷Rg_1;与正常组相比,建立的体外肝细胞脂肪变性模型组细胞内三酰甘油(TG)含量显著升高(P<0.05),不同浓度的PNS、人参皂苷Rb_1和人参皂苷Rg_1作用后给药组细胞内TG含量显著降低(P<0.05),呈剂量效应关系。结论建立肝细胞亲和-HPLC法,筛选出PNS亲和成分为人参皂苷Rb_1和人参皂苷Rg_1,经体外模型验证亲和成分具有显著降脂活性。

田黄方治疗高脂血症大鼠粪便代谢组学研究

目的:从粪便代谢组学角度探讨田黄方对高脂血症大鼠模型的作用及机制。方法:SD大鼠随机分为3组,对照组、模型组、田黄组,每组6只。应用高脂乳剂灌胃法复制高脂血症模型,并给予相应药物治疗,采集给药4周后的粪便,采用超高效液相色谱--四级杆飞行时间质谱联用(UPLC/Q-TOF MS)技术分析大鼠粪便代谢物指纹谱。应用主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别(PLS-DA)分析各组之间的代谢物谱差异,并通过变量重要性投影(VIP)选取生物标志物,比较并找出差异代谢产物。结果:与对照组比较,高脂血症模型组中发现12个潜在生物标志物,其中十二碳四烯酸、己烯雌酚、十二碳五烯醛、十六碳三烯酸、脱氧胆酸、花生四烯酸、前列腺素、氧代胆烷酸、石胆酸等含量显著降低,11-酮基睾酮、羟雌甾二醇、羟雄甾二烯酮含量显著升高;与模型组比较,田黄方给药组能改善上述异常上调和下调的生物标志物。结论:田黄方能改善由高脂引起的脂肪酸、胆固醇、激素和炎症相关的代谢紊乱。

透析-色谱联用技术研究黄连生物碱与牛血清白蛋白的结合作用

目的:研究黄连中与牛血清白蛋白(BSA)有结合作用的潜在活性成分。方法:采用平衡透析与高效液相色谱联用技术筛选黄连中与BSA有结合作用的成分;考察BSA浓度、缓冲液pH值对黄连生物碱与BSA结合作用的影响;比较黄连中各生物碱单体与BSA单独作用和黄连总生物碱与BSA作用的区别。结果:黄连中共有7个化学成分与BSA结合作用明显,通过对照品对照,其中6个成分被分别鉴定为非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马亭及盐酸小檗碱;各生物碱单独结合作用强于它们在黄连中混合存在的结合作用,各生物碱在与BSA结合过程中存在竞争作用。结论:蛋白结合-平衡透析-高效液相色谱法联用可有效、快速地预测黄连中多种成分在体内的吸收情况,筛选其潜在活性成分,且能体现中药整体作用的特点,为其药效物质基础的进一步研究提供依据。

三七中与牛血清白蛋白结合的活性成分研究

目的:研究三七中与牛血清白蛋白(BSA)有结合作用的潜在活性成分。方法:采用平衡透析与高效液相色谱联用技术筛选三七中与BSA有结合作用的成分;考察BSA浓度、缓冲液pH值对三七皂苷与BSA结合作用的影响;比较三七中主要皂苷单体与BSA单独作用和三七总皂苷与BSA作用的区别。结果:三七中有3个化学成分与BSA结合作用明显,分别为人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1;各皂苷单独结合作用强于联合结合作用,各皂苷在与BSA结合过程中存在竞争作用。结论:蛋白结合-平衡透析-高效液相色谱法联用可有效、快速地预测三七中多种成分在体内的吸收情况,筛选其潜在活性成分,且能体现中药整体作用的特点。

聚酰胺树脂精制绞股蓝总黄酮的工艺优选

目的:优选聚酰胺树脂分离纯化绞股蓝总黄酮的工艺条件。方法:采用紫外分光光度法,以总黄酮含量为考察指标,研究在静态和动态条件下,聚酰胺树脂吸附和洗脱总黄酮的行为,筛选出聚酰胺树脂精制绞股蓝总黄酮的最优工艺参数。结果:最佳工艺参数为生药质量浓度0.35 g.mL-1,上样液pH 3,温度为室温,4 BV 60%乙醇洗脱。此工艺条件下,总黄酮纯度由粗品的23.91%提高到81.97%,纯化物中总黄酮保留率高达90.11%。结论:采用聚酰胺树脂纯化绞股蓝总黄酮效果良好,适用于工业化生产。