新型冠状病毒核酸检测7种振荡混匀方法效果评价

目的对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测7种振荡混匀方法进行比较,确定有效方法的最优参数。方法分2个阶段进行研究:第1阶段,采用小样本(每种方法30例),从形态学、流式细胞术、实时荧光聚合酶链反应(PCR)3个层面评价7种振荡方法的有效性,并确定最优时间参数;第2阶段,采用大样本(2150例),验证最优参数下多管涡旋和超声振荡的效果。结果形态学和流式细胞术分析结果显示,除超声振荡外,其他6种振荡混匀方法均会导致保存液中上皮细胞明显增多(P<0.05)。实时荧光PCR结果显示,颠倒和回旋振荡处理后,核酸扩增未见内参循环阈值(Ct)明显下降(P>0.05);吹打6次和往复振荡5 min处理后,核酸扩增未见内参Ct值下降;单管/多管涡旋和超声振荡处理后,核酸扩增内参Ct值显著下降(P<0.0001)。大样本量实时荧光PCR结果显示,多管涡旋振荡2 min较超声振荡5 min效果更优(P<0.0001)。结论SARS-CoV-2核酸检测采用2min涡旋振荡混匀的方法进行前处理可提高检测效率。