基于网络药理学探讨臭灵丹抗炎的作用机制

基于LC-MS和网络药理学对臭灵丹乙酸乙酯部位(ethyl acetate fraction of Laggerae Herba,ELH)进行成分和靶点通路分析,并通过LPS(lipopolysaccharides,LPS)诱导RAW 264.7炎症模型探讨ELH抗炎的作用机制。通过Griess实验,比较臭灵丹不同萃取部位的抗炎活性;利用LC-MS对ELH的化学成分进行分析;基于网络药理学预测和筛选ELH发挥抗炎的核心成分,靶基因和主要通路,并用分子对接和蛋白免疫印迹(Western blot)对靶点和通路进行验证。Griess实验结果表明,ELH可显著抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞释放NO,抑制率达103.07%,是臭灵丹发挥抗炎作用的活性部位;LC-MS分析得到ELH中23个化学成分,包括21个倍半萜,1个黄酮,1个有机酸体;基于4个数据库,获得66个共同靶点;蛋白互作网络(protein-protein interaction,PPI)分析发现获得白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等degree值大于40的6个核心靶点;GO、KEGG富集分析发现,核心靶点可能通过PI3K-Akt、IL-17、NF-κB和TNF等信号通路发挥抗炎作用;分子对接结果显示23个化学成分与核心靶点具有良好的结合能力;Western blot实验结果显示ELH处理后Akt的磷酸化水平和NF-κB表达显著下降(P<0.05)。综上,ELH能抑制AKT磷酸化,在一定程度上抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞中NF-κB信号通路的激活,从而发挥抗炎作用。

参芪扶正注射液Ⅰ期健康志愿者的耐受性研究

目的评价健康受试者单次和多次连续注射参芪扶正注射液的耐受性和安全性,确定临床给药的安全范围。方法按单中心、随机、开放试验设计。34例健康受试者,男女各半,其中单次给药22例,多次给药12例。单次给药：随机分为2,4,6,6,4例5个剂量组,分别予以单次静脉滴注参芪扶正注射液125,250,410,625,750 mL。多次给药：随机分为2组,每组6例,分别予以静脉滴注参芪扶正注射液625,750 mL,qd,连续7 d。观察各组用药后的临床症状、生命体征、心电图、血尿常规、肝肾功能、凝血功能等。结果参芪扶正注射液经单次或连续给药后,神经系统、呼吸系统、心血管系统、消化系统、皮肤系统、注射部位局部等均未发现异常。单次给药组出现5例凝血酶原时间（PT）延长、7例部分活化凝血酶原时间（APTT）延长、1例肌酸激酶升高认为与用药无关。连续给药组出现5例PT延长、2例APTT延长。单次给药组和连续给药组的PT延长和APTT延长均为轻度,且无临床意义。结论中国健康受试者单次静脉滴注参芪扶正注射液125~750 mL及连续静脉滴注每日750 mL是安全的,且人体可以耐受。推荐临床选择的剂量范围为125~750 mL。