新型冠状病毒肺炎的抗体应对策略

迅速蔓延中国并扩散至全球的新型冠状病毒肺炎,已证明具有明显的人传染人特点,严重危害人类健康。新型冠状病毒传播性极强,由于人体内没有针对新型冠状病毒的特异性抗体,该病毒对人类健康和世界公共卫生安全已构成重大威胁。目前还没有疫苗和抗病毒特效药物用于新型冠状病毒肺炎的防治,因此,基于抗体的检测和临床治疗措施就显得尤为重要。文章从新型冠状病毒肺炎的抗体检测诊断、中和抗体及亚单位疫苗研发等方面进行综述评价,旨在聚焦新型冠状病毒肺炎的抗体应对策略,为新型冠状病毒肺炎的疫情防控提供新思路。

葡萄糖代谢重编程在胰腺癌耐药中的研究进展

胰腺癌是严重危害人类健康的消化道恶性肿瘤,预后差,生存率低。目前临床治疗的药物主要是吉西他滨,但随着其耐药性的出现,疗效显著降低。肿瘤代谢重编程是肿瘤细胞为满足能量和生物原料的需求,出现了代谢途径调整和改变的现象。有氧糖酵解异常增强是胰腺癌细胞糖代谢重编程的特征之一,在葡萄糖转运体蛋白和糖酵解关键酶的作用下,通过不同的信号通路调控化疗耐药。文章对胰腺癌耐药和葡萄糖代谢重编程之间的相关性进行探讨,总结分析其调控机制及信号通路,并归纳靶向肿瘤细胞有氧糖酵解代谢通路的临床前试验和药物开发情况。

HEV保护性基因工程抗体的制备及功能研究

目的:制备抗戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)的人鼠嵌合基因工程抗体并研究其中和保护作用及特性。方法:将已获得的抗HEV鼠源单克隆抗体基因序列进行优化,设计人鼠嵌合的工程化抗体基因序列,将其克隆入真核表达载体;表达载体共转染293F细胞进行表达优化,高效制备基因工程化抗体;通过酶联免疫反应(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、免疫荧光及HEV细胞感染模型,研究工程化抗体的结合能力及中和活性。结果:成功构建基因工程化人鼠嵌合HEV保护性抗体表达载体,在293F表达系统中实现高效表达。抗体表达产率达30 mg/L,亲和力为1.202×10^-8mol/L。免疫荧光检测结果显示抗体能够灵敏、特异地与已感染HEV的Kernow细胞结合,实时荧光定量PCR检测结果显示抗体可保护易感的C3A细胞不被HEV感染。结论:基因工程化抗体抗体具有高效的HEV结合能力及中和作用,能有效阻断HEV感染,并实现低成本高效表达。

全人源双特异性c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白的优化、制备及生物学特性鉴定

目的:通过优化设计、构建c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白,探究重轻链不同组合形式对c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白与肿瘤抗原结合的亲和性和特异性的影响。方法:使用生物信息学分析、基因工程抗体技术设计、优化及制备重轻链不同组合的双特异性c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白CP1、CP2、PC1、PC2;生物分子相互作用分析仪BLItz分析融合蛋白对重组c-Met蛋白和PD-L1蛋白的亲和力,ELISA法分析其抗原结合特异性。结果:成功制备双特异性c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白,融合蛋白CP1与重组c-Met蛋白和PD-L1蛋白的亲和力和抗原结合特异性均优于CP2、PC1和PC2。结论:重轻链不同组合形式会影响c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白与c-Met和PD-L1蛋白的亲和力和抗原结合的特异性,融合蛋白CP1的亲和力和抗原结合的特异性最高,其对应的重轻链组合形式可用于c-Met/PD-L1 CAR表达载体的构建。

嵌合抗原受体T细胞治疗实体瘤的再思考

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗恶性血液肿瘤已取得令人瞩目的疗效,但治疗实体瘤尚存在疗效不佳和可能出现的特殊毒性风险等问题。文中分析了CAR-T细胞治疗实体瘤疗效不佳的原因,包括肿瘤异质性、CAR-T细胞难以归巢、免疫抑制微环境、脱靶效应、T细胞衰竭等,并提出了提高CAR-T细胞治疗实体瘤疗效的相应策略和未来的发展趋势。

TROP2和VEGFR2在三阴性乳腺癌中的表达及与临床病理因素的相关性研究

目的:观察人滋养层细胞表面抗原2(TROP2)和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)在三阴性乳腺癌中的表达及与临床病理因素和预后的相关性。方法:应用免疫组化(两步法)检测151例三阴性乳腺癌、137例非三阴性乳腺癌、48例乳腺良性肿瘤以及48例正常乳腺组织中TROP2和VEGFR2的蛋白表达情况,结合临床病理资料综合分析其临床意义和预后价值。结果:TROP2和VEGFR2分别在乳腺癌细胞的细胞膜和细胞质表达。TROP2和VEGFR2蛋白在三阴性乳腺癌中高表达,阳性率高于非三阴性乳腺癌、乳腺良性肿瘤和正常乳腺组织,并且TROP2和VEGFR2共同在三阴性乳腺癌高表达,高于非三阴性乳腺癌,差异有统计学意义。三阴性乳腺癌组织中TROP2阳性表达、VEGFR2阳性表达,以及TROP2和VEGFR 2在三阴性乳腺癌中的共同高表达与患者的组织学分级、临床分期、远处转移有相关性。TROP2和VEGFR2蛋白共同高表达是三阴性乳腺癌的独立预后指标。结论:TROP2和VEGFR2可以作为三阴性乳腺癌新的分子靶点,有望用于三阴性乳腺癌的预后评价和免疫靶向治疗。

IgG在CpG DNA诱导巨噬细胞活化与JNK和p38通路中的作用

目的:探究免疫球蛋白G(IgG)在CpG DNA诱导巨噬细胞活化过程中的调节作用及其对信号通路的影响。方法:体外培养小鼠骨髓源巨噬细胞,采用流式细胞仪和免疫荧光技术对巨噬细胞表面标志物和吞噬功能进行鉴定。IgG、CpG DNA以及IgG联合CpG DNA分别处理巨噬细胞后,采用流式细胞技术检测巨噬细胞表面活化分子及胞内细胞因子,免疫蛋白印迹检测核因子(nuclear factor,NF)-κB和MAPK信号通路相关蛋白磷酸化。结果:体外培养巨噬细胞表面标志物CD11b和F4/80的表达率约99.7%,巨噬细胞对FITC-IgG吞噬比例约70%;IgG上调CpG DNA活化巨噬细胞表面CD40、CD80和CD86的表达(P <0.05);IgG促进CpG DNA诱导巨噬细胞内JNK和p38磷酸化,但对ERKp44/42和NF-κBp65的磷酸化没有明显作用;IgG联合CpG DNA诱导巨噬细胞分泌大量的细胞因子肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α。结论:IgG在CpG DNA诱导巨噬细胞活化与MAPK信号通路JNK和p38磷酸化中起促进作用,通过促使表达上调共刺激分子CD40、CD80和CD86与分泌TNF-α进一步活化巨噬细胞。

PSMA7在胃癌中的表达及对胃癌增殖、侵袭迁移及成瘤能力的影响

目的研究PSMA7在胃癌中的表达及其对胃癌增殖、侵袭迁移及裸鼠皮下成瘤能力的影响。方法收集60例胃癌患者的癌组织及配对的癌旁组织,应用免疫组化法检测胃癌和配对癌旁组织中PSMA7的表达水平;应用慢病毒转染技术在胃癌细胞株SGC7901中干扰PSMA7;应用Cell Counting Kit-8(CCK-8)和细胞克隆形成实验检测胃癌细胞增殖能力的变化,Transwell实验检测胃癌细胞侵袭迁移能力的变化;稳转细胞株构建裸鼠皮下移植瘤模型,研究干扰PSMA7对皮下移植瘤的影响。结果免疫组化结果显示PSMA7在胃癌组织中的表达水平显著高于其配对的癌旁组织(P<0.05);在人胃癌细胞株SGC7901中下调PSMA7表达能够显著抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭迁移能力(P<0.05);在BALB/c小鼠皮下移植瘤模型中干扰PSMA7的表达能够明显抑制皮下移植瘤的生长(P<0.05)。结论 PSMA7在胃癌组织中高表达,干扰PSMA7抑制胃癌细胞增殖、侵袭迁移及裸鼠皮下成瘤的能力。

掺钕钇铝石榴石激光对人滋养层细胞表面抗原2的调控及口腔鳞癌细胞HN6增殖、侵袭和转移的影响

目的探讨激光对人滋养层细胞表面抗原2(TROP2)调控及对口腔鳞癌细胞HN6增殖、转移和侵袭的影响。方法体外培养口腔鳞癌细胞株HN6,用1064 nm Nd:YAG激光连续照射,检测24、48 h后激光对HN6细胞的增殖、划痕愈合、转移、侵袭的影响。检测Nd:YAG激光对HN6细胞中TROP2表达的影响。TROP2干扰质粒转染至HN6细胞后,检测Nd:YAG激光对HN6细胞增殖和侵袭的影响。结果低剂量和中剂量激光照射时,HN6细胞增殖能力增强,促划痕愈合程度和侵袭能力提高,TROP2表达较高(P<0.05);高剂量激光照射时,HN6细胞增殖受到抑制,划痕愈合明显减慢且侵袭能力受到抑制,TROP2表达较低(P<0.05);干扰TROP2表达后,Nd:YAG激光对HN6细胞增殖与侵袭无影响。结论较低剂量Nd:YAG激光照射促进HN6细胞的增殖、转移和侵袭,高剂量Nd:YAG激光照射抑制HN6细胞的增殖、转移和侵袭。Nd:YAG激光通过调控TROP2的表达影响HN6的增殖及侵袭转移。

介孔氧化硅微纳材料的卫生检验应用研究进展

近年来,介孔氧化硅微纳材料由于具有良好的生物相容性及易于修饰的孔道结构,在卫生分析和抗菌等生物医学领域得到广泛应用。本文结合国内外这一领域的最新研究现状,对介孔氧化硅微纳材料在卫生分析和抗菌应用的研究进展作一评述。

CAR-T细胞治疗实体瘤的挑战与应对策略

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T),是目前肿瘤免疫细胞疗法研究的热点,其在治疗血液系统恶性肿瘤上的成就有目共睹,但其针对实体瘤的治疗仍存在着些许问题和挑战。目前关于CAR-T治疗实体瘤的挑战主要有肿瘤抗原的异质性或抗原逃逸、CAR-T细胞归巢障碍、肿瘤免疫抑制性微环境、脱靶效应、CAR-T细胞毒性等问题。针对这些挑战也相应出现了一些应对策略,如cocktail CAR-T细胞、局部输注CAR-T细胞、阻断免疫抑制性信号、SynNotch CAR-T等方法。本文阐述围绕目前CAR-T技术治疗实体肿瘤存在的挑战及应对策略。