环境剂量的双酚A暴露对雄性小鼠生殖功能的影响

目的:研究环境剂量的双酚A(BPA)暴露对雄性小鼠生殖功能的影响及可能的分子机制。方法:84只3周龄C57BL/6J雄性小鼠按体质量随机分为3组,分别为5μg/kg BPA组、50μg/kg BPA组、乙醇溶剂对照组,每组28只。每日灌胃给药1次,连续给药5周后,检测生殖器官脏器指数、附睾尾精子数量、睾丸组织学形态;同期与正常雌性小鼠配种检测雄鼠的生育力。应用MBDq PCR方法检测睾丸中Tnnt2、Tectb基因的甲基化水平变化。结果:1 BPA暴露组与对照组间的生殖系统脏器指数无统计学差异(P>0.05)。2 50μg/kg BPA暴露组附睾尾精子数量下降20.1%;睾丸曲细精管管腔中有生精细胞脱落等病理现象。3 BPA暴露组与对照组间的生育率无统计学差异(P>0.05),但50μg/kg BPA暴露组每胎平均产仔数下降。4 BPA组睾丸中Tnnt2、Tectb基因的甲基化水平下降(P<0.01)。结论:环境剂量的BPA暴露对雄鼠生殖器官脏器指数没有影响,50μg/kg BPA能引起小鼠生精功能下降,睾丸Tnnt2、Tectb基因的甲基化水平下降。

青春期雄性小鼠双酚A暴露对生殖功能及子代性别比的影响

目的:研究双酚A(BPA)暴露对青春期雄性小鼠成年后生殖功能及对子代的影响。方法:21日龄C57BL/6J雄性小鼠每日腹腔注射BPA 50 mg/kg连续7 d,35 d后检测成年后雄鼠附睾尾精子数量、精子畸形率、睾丸组织学变化;与正常雌性小鼠配种,观测生育力指标以及仔鼠的出生情况。结果:BPA暴露能引起小鼠附睾尾精子数量下降20.6%(P<0.01);精子畸形率增加9.65%(P<0.05);睾丸组织结构异常;BPA暴露对雄性小鼠成年后的生育力没有明显影响;但能引起子代雄∶雌出生性别比升高。结论:青春期雄鼠BPA暴露能引起成年雄鼠生精功能下降,仔小鼠雄性比例增加。

微小RNA-204对前列腺癌细胞株CL1的生长调节及其机理研究

目的:探讨微小RNA(mi R)-204对前列腺癌细胞株CL1的生长调节及其机理。方法:获得mi R-204高表达的CL1稳转细胞株(CL1-mi R-204)及其阴性对照的CL1稳转细胞株(CL1-对照)后,观察其细胞生长速度,检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)磷酸化水平及AKT总蛋白和p27蛋白的表达,并检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)通道抑制剂LY294002对2种细胞生长的影响。结果:mi R-204能促进CL1的生长;升高AKT在苏氨酸(T308)和丝氨酸(S473)2个位点的磷酸化水平;抑制AKT下游的靶基因p27蛋白表达水平。加入LY294002后,CL1-对照和CL1-mi R-204的生长速度都降低。但CL1-mi R-204的生长速度下降得更明显。结论:mi R-204可能是通过AKT信号通路来促进CL1的生长。

MEST基因在正常人前列腺移行带和外周带基质成纤维细胞中的mRNA表达差异及其与DNA甲基化水平的关系

目的:探讨正常人的前列腺移行带(PZ)和外周带(TZ)基质成纤维细胞中MEST(mesoderm specific transcript)基因的甲基化水平变化和表达差异,及DNA甲基化抑制剂(5-Aza-CdR)对其表达水平的影响。方法:用硫化测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)和实时荧光定量PCR方法分别检测5-Aza-CdR处理前、后在前列腺PZ和TZ原代成纤维细胞中MEST基因的甲基化水平和相应的mRNA表达。结果:MEST基因在PZ成纤维细胞中为低甲基化高表达,在TZ成纤维细胞中为高甲基化低表达。加入5-Aza-CdR后,MEST在PZ和TZ成纤维细胞中都为去甲基化,而表达水平上升,但是TZ成纤维细胞表达水平的改变比PZ成纤维细胞大。结论:MEST基因的DNA甲基化差异可能是前列腺外周带和移行带成纤维细胞生物学行为差异的分子基础。