衰老个体骨骼肌卫星细胞的研究进展

骨骼肌是由单核成肌细胞融合而成的多核肌纤维组成,肌纤维组织通过收缩产生力量和运动。骨骼肌中含有大量处于静息状态的肌源性干细胞(MDSCs),位于肌纤维质膜和基底膜之间,被称为卫星细胞,这些细胞对于骨骼肌的再生能力至关重要[1]。一旦机体发生损伤,卫星细胞就会停止静息状态,开始增殖,并产生大量肌源性祖细胞,这些祖细胞进一步参与肌源性活动,生成新的肌纤维并取代受损的组织[2]。

脐血单核细胞体外高效扩增NK细胞方法的研究

目的建立1种使用脐血单核细胞（UCBMC）制备较高纯度自然杀伤（NK）细胞的体外高效扩增方法,并初步鉴定扩增后的NK细胞杀伤肿瘤细胞（K562）的能力。方法 6人份脐血标本来自北京妇产医院,取20 mL/份、采用密度梯度离心法分离脐血中的UCBMC,提取后的UCBMC以1×10~6个/mL细胞在4 mL含有白细胞介素（IL）-2、IL-12、IL-15和IL-21的X-VIVO15中培养5 d,期间于d2和d3添加等体积含上述细胞因子的新鲜培养基; 800 g离心将细胞后转入含1 000 IU/ml IL-2和50 ug/mL L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐的X-VIVO15培养基中继续培养至14 d,800 g离心收获细胞。无血清RPMI1640重悬后通过台盼蓝染色法做细胞计数测定细胞的扩增倍数;流式细胞仪检测NK细胞重要表面标志物（CD56和CD16等）及与杀伤功能相关的重要分子[CD158a、CD158b、CD158e/k、CD69、CD314（NKG2D）、CD94、CD335（NKp46）、CD337（NKp30）、CD62L、CD226（DNAM-1）、CD57和CD336（NKp44）]的表达情况;胞内染色结合流式细胞仪测定细胞杀伤重要效应分子Perforin和Granzyme B的表达情况,并以乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测扩增后的细胞对K562细胞的杀伤能力。结果 6份UCBMC培养14 d：活细胞总数从培养前的4×106个扩增至（3. 6—5. 5）×10~8个,扩增倍数91—137（116±13. 1）; CD3-CD56＋细胞（NK细胞）占比85. 6%—95. 5%（90. 2±3. 4）%;培养得到的NK细胞表面除表达CD56分子外,还表达CD16（91. 2±2. 6）%、CD158a（71. 4±4）%、CD158b（52. 1±2. 2）%、CD158e/k（50. 3±6. 9）%、CD69（95. 6±2. 8）%、CD314（NKG2D）（94. 2±1. 7）%、CD94（94. 1±2. 1）%、CD335（NKp46）（26. 6±4. 1）%、CD337（NKp30）（94. 6±1. 5）%、CD62L（12. 8±3. 4）%、和CD226（DNAM-1）（97. 6±1. 3）%,以及CD57（4. 2±0. 9）%和CD336（NKp44）（7. 1±1）%。胞内染色结果显示：〉90%扩增产物（细胞）内表达与NK细胞杀伤功能相关的Perforin（86. 9±2. 7）%和Granzyme B（94. 1±2. 9）%;体外细胞杀伤试验：扩增的细胞对K562在效靶比为5∶1和10∶1时对靶细胞（K562）具有明显的杀伤作用。结论成功建立了1种从UCBMC不经纯化直接制备高纯度NK细胞的方法——其培养的细胞中表达了NK细胞重要的功能性分子,对K562细胞具有杀伤能力。

磁性活性细胞分选法对新鲜和冷冻精液优化效果的研究

目的探讨比较磁性活性细胞分选法(MACS)对新鲜精液和冷冻精液的优选效果,为MASC在辅助生殖实验室的应用提供可靠的数据基础。方法招募科研志愿者,收集健康男性精液,每份精液分为两份,每份1 mL,设置两个实验组,每组20例,一组做新鲜精液的MACS优化(新鲜精液组),一组制备为冷冻精液,解冻后进行冷冻精液的MACS优化(冷冻精液组)。比较分析各组优选前后精子浓度、前向运动精子活动率、膜完整性、正常形态率及DNA完整率等的差异。结果MACS优化后,新鲜精液组前向运动精子活动率[优选前(56.29±12.94)%vs.优选后(65.21±14.55)%]和冷冻精液组[优选前(34.13±17.01)%vs.优选后(22.71±13.51)%]优选前后无显著性差异(P>0.05),且冷冻精液组优化后前向运动精子活动率较优化前略低;新鲜精液组正常形态率[优选前(16.78±3.57)%vs.优选后(25.78±1.95)%]优化前后有显著性差异(P<0.05),冷冻精液组正常形态率[优选前(7.90±3.80)%vs.优选后(13.72±4.58)%]略有改善,但无显著性差异(P>0.05);新鲜精液组精子膜完整率[优选前(59.11±10.07)%vs.优选后(82.86±4.46)%]、DNA完整率[优选前(68.93±9.60)%vs.优选后(85.44±5.62)%]和冷冻精液组精子膜完整率[优选前(69.21±7.79)%vs.优选后(84.00±5.33)%]、DNA完整率[优选前(69.79±3.9)%vs.优选后(91.95±2.82)%]优选后均显著高于优选前(P<0.05)。结论新鲜精液经冷冻后会造成精子不同程度的物理和化学损伤,MACS可以显著提高新鲜精液和冷冻精液的精子膜完整率及DNA完整率,新鲜精液的前向精子运动活动率及正常形态率的优选效果优于冷冻精液。

基于一维卷积神经网络与循环神经网络串联的心音分析方法

面向心脏疾病计算机辅助诊断,本文提出一种基于一维卷积神经网络和循环神经网络混合深度学习结构的心音分析方法.本结构首先利用卷积神经网络学习心脏病症在心音信号上的表征,然后通过循环神经网络处理心音信号中的时序信息进行分类,在提升心音分类正确率的同时,大幅度降低了网络参数.为验证本深度学习结构所学特征的有效性,除已有的成人心音数据集外,本文还专门构建了一个面向婴幼儿先天性心脏病的心音数据集,并通过端到端的类别响应图证明了本方法在室缺诊断时学习到的心音信号特征符合临床医师的心音听诊经验.实验结果表明,本文方法能在3153例成人心音数据分类上达到92.56%的正确率,在528例婴幼儿心音数据分类上达到97.48%正确率,模型参数仅有0.05 M.

一家系Joubert综合征17型2例基因-表型分析

目的探讨Joubert综合征的临床表现、基因-表型关系。方法分析一家系Joubert综合征2例患儿的临床和影像资料,以及患儿及父母的靶向基因组测序结果;复习Joubert综合征相关文献。结果姐姐18岁,弟弟13岁,均有肌张力低下、发育迟缓,无眼、肾、肝脏受累,韦氏智商分别为64、71。头颅磁共振(MRI)提示"臼齿征"。基因检测显示CPLANE1基因存在复合杂合变异c.-47-3C>A、c.8263dupA,分别来自父母,明确诊断为Joubert综合征17型,单纯型Joubert综合征。结论发现国内未见报道的Joubers综合征患者CPLANE1基因突变位点。

二胎备孕男性精液质量与年龄、体质量指数以及肥胖生化指标的相关性分析

目的:探讨广州地区二胎备孕男性的年龄、体质量指数(BMI)以及肥胖生化指标对精液质量的影响。方法:对2017年8月15日至2018年7月18日在广州市妇女儿童医疗中心就诊咨询准备生育二胎的632例男性进行问卷调查,所有参与者采取静脉血进行脂代谢等相关指标检测,并按照WHO《人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)的要求进行精液常规分析以及改良巴氏染色后精子形态分析,分析年龄、BMI、脂代谢指标、生活环境、职业等因素与精液质量的相关性。结果:年龄、BMI、取精季节、生活环境、职业等因素均可影响男性精液的质量。年龄与前向运动精子百分率呈负相关(r=-0.109,P<0.05);BMI与精液量呈正相关(r=0.103,P<0.05),并且与正常形态精子百分率呈负相关(r=-0.138,P<0.05);高密度脂蛋白(HDL)与前向运动精子百分率呈负相关(r=-0.168,P<0.01),与不活动精子百分率呈负相关(r=-0.135,P<0.05);低密度脂蛋白(LDL)与精液量呈明显负相关(r=-0.124,P<0.01),与前向运动精子百分率呈负相关(r=-0.127,P<0.05),与不活动精子百分率呈正相关(r=0.140,P<0.01),与精子浓度呈负相关(r=-0.121,P<0.05),与精子总数呈明显负相关(r=-0.210,P<0.01);进一步多因素回归分析显示:BMI和LDL是精液量的独立影响因素;尿酸(UA)是液化时间的独立影响因素;年龄、HDL和LDL是前向运动精子百分率的独立影响因素;年龄、HDL是不活动精子百分率的独立影响因素;LDL是精子总数的独立影响因素;而BMI和TG则是正常形态精子百分率的独立影响因素。结论:年龄、BMI、取精季节、生活环境、职业等因素均可能影响男性精液的质量。

北京市972例学龄前儿童运动协调性现况调查

目的:了解学龄前儿童的运动协调性现状,为学龄前儿童的早期运动干预计划提供参考依据。方法:2018年8月—2019年8月在本市选取6所托幼机构共计972名3~6岁学龄前儿童,应用儿童运动协调性测评工具(MABC-2测试法)对儿童进行运动协调性评估调查。结果:研究对象分为3.0~3.5岁、3.5~4.0岁、4.0~4.5岁、4.5~5.0岁、5.0~5.5岁、5.5~6.0岁、6.0~6.5岁7组,随着儿童年龄的增加,手灵巧度测试耗时不断降低(P<0.001),目标抓取成功数量、静态平衡维持时间不断增加(P<0.001),男孩手灵巧度测试耗时高于女孩(91.9,84.4;P<0.05),静态平衡维持时间低于女孩(37.4,25.1;P<0.05);5.5岁前目标抓取成功数量无性别差异(P>0.05)。结论:不同性别儿童的运动协调性在不同年龄段存在差异,参加早期教育和运动技能学习班对儿童手部灵巧性而言可能是保护性因素。

孕前糖尿病对不良妊娠结局的影响:一项基于我国640万妇女的队列研究

伴随人口老龄化、城市化及生活方式的改变,世界各国的糖尿病发生率均迅速增长。妊娠合并糖尿病包括孕前糖尿病合并妊娠和妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM),二者在妊娠结局和母儿远期预后方面均存在一定差异。孕前糖尿病与多种母儿不良结局,如自然流产、胎儿畸形、巨大胎儿、早产、围产儿死亡等明确相关。宫内高糖环境暴露下的胎儿,成年期肥胖、糖尿病等代谢性综合征风险也将显著增加。

中文版亲子互动-喂养量表的信效度初步研究

目的引入并修订美国华盛顿大学的亲子互动-喂养量表,并在中国人群中进行信效度研究。方法按照国际测试委员会指南,对原亲子互动-喂养量表进行翻译,形成中文版亲子互动-喂养量表(PCI-FS-C)。2018年6月—2019年1月方便抽样北京、银川、兰州和马鞍山市4所妇幼保健院,招募310例0~12个月母子对,采集婴儿一次完整喂养过程的视频,由经过美国华盛顿大学培训合格获得原版量表评估资质人员进行视频编码评分。抽样6例评估评分者信度;于14~21 d后随机抽样10%评估重测信度;随机抽样41例进行中文版婴儿-学步儿家庭环境观察评估表(IT-HOME-C)效标效度检验。使用多元线性回归进行区分效度分析。结果共获得273例有效样本。总量表、照护者和婴儿量表内部一致性Cronbach′sα系数分别为0.846、0.805和0.690;总量表、照护者和婴儿量表的重测信度分别为0.847、0.778和0.480(P<0.01);总量表评分者信度Kendall相关性系数为0.860;PCI-FS-C的总分、照护者和婴儿量表总分与IT-HOME-C总分呈显著性中度正相关(r=0.526、0.506、0.427,P<0.05)。控制混杂因素后,婴儿年龄与PCI-FS-C量表总分、照护者量表和婴儿量表总分显著相关(b=3.24、2.31、0.92)。结论中文版亲子互动-喂养量表在中国人群中具有良好的信度和效度,可以作为我国婴儿喂养亲子互动的评估工具。今后可以考虑开展大样本量分层抽样的本土化常模研究。

布鲁氏菌经血传播的潜在风险研究

目的调查北京部分地区健康献血人群布鲁氏菌病感染情况,探究布鲁氏菌病经血传播的潜在风险。方法选取2019年4-12月北京市通州区中心血站采集的大兴、平谷、顺义、通州、朝阳地区健康献血者的血液标本2657份,采用虎红平板试验(RBPT)初筛,试管凝集试验(SAT)对布鲁氏菌抗体进行检测,并对两种方法阳性的标本应用ELISA检测。结果2657份健康献血者血液标本中,布鲁氏菌病阳性4例(0.15%),凝集程度均为“++”。SAT阳性4例(0.15%),3例血清效价大于或等于1∶100(+++),1例血清效价大于或等于1∶200(++++),其中SAT及布鲁氏菌病双阳2例。SAT另检出22例可疑标本,血清效价大于或等于1∶50(++)。ELISA阳性标本1例(0.04%),光密度(A)值为120.0,浓度为470.875 ng/L。SAT阳性及可疑标本中女性多于男性,牧区多于其他地区,差异有统计学意义(P<0.05)。结论布鲁氏菌病存在经血传播的潜在风险。