生物工程开放性实验室实施模式的探索与实践

构建生物工程开放性实验室,加强高校开放性实验室建设,探索生物工程开放性实验室的实施模式,为新型实验教学模式的实施奠定基础.

生物芯片技术在临床多种病毒检测中的新进展

生物芯片(Biochip)又称微阵列(Microarray)技术,是近年来生命科学与微电子学等学科相互交叉发展起来的一门高新技术,其在临床多种病毒检测中的应用越来越多,近几年来更是取得了突破性进展,显示出诱人的应用前景。

蛋白芯片技术对自身免疫性抗体的检测及评价

目的 探讨蛋白芯片技术检测自身抗体的临床价值。方法 用酶联免疫吸附试验（ELISA）、蛋白芯片法检测抗dsDNA、抗Ro-60／SSA、抗Ro-52／SSA、抗SSB、抗Jo-1、抗磷脂IgG抗体．用间接免疫荧光法（IIF）、蛋白芯片法检测抗核抗体（ANA），分别统计两种方法检测均阳性、均阴性和单阳性的标本数目．并进行评价。结果 芯片法检测ANA的灵敏度为89％、特异度为60％．芯片法对其他6种自身抗体检测的灵敏度为70．0%～87．5%、特异度为92．7％～98．9％。结论 蛋白芯片法检测自身抗体与常规方法比较，特异度较高，有待进一步改善技术提高其灵敏度。

寡核苷酸芯片杂交技术对HBV DNA分型的研究

目的 建立单碱基延伸 (SBE)标记靶序列的方法 ,解决目前寡核苷酸芯片存在的空间障碍、特异性差、重复性差等问题。方法 利用不同的方法标记靶序列或把已标记好的长片段靶序列片段化后 ,与寡核苷酸芯片进行杂交分析。结果 用两种方法检测HBVDNA及分型 ,得到了相同的结果。结论 以单碱基延伸 (SBE)标记靶序列的方法重复性好 。

南极磷虾氟在大鼠体内吸收代谢实验观察

目的研究南极磷虾氟在大鼠体内的吸收、分布情况。方法随机将大鼠分为8组,4组灌胃4 mL氟浓度均为0.3 mg/mL的氟化钠溶液、虾粉悬浮液、虾糜及煮沸的虾糜,在灌胃后15 min,30 min,1 h,2 h,4 h,8 h及24 h取血;另外3组连续7 d用同法给予氟化钠、虾粉、虾糜,最后一组正常喂养作为空白对照,分别取此4组大鼠的血液、肾脏、肺、心脏、肝脏和骨骼,用氟离子选择电极测氟浓度。结果大鼠连续食用南极磷虾后,肺、心脏及肝脏中氟含量无明显变化,但在血液及肾脏中均有升高,骨骼中升高尤为明显。结论大鼠连续一周大量食用南极磷虾会产生氟蓄积,蓄积的氟对机体特别是骨的影响有待进一步的研究。

重组人成骨蛋白-1的纯化及其生物学活性研究

目的 获得高纯度的重组人成骨蛋白-1（rhOP-1），探讨大肠杆菌表达rhOP-1的生物学活性。方法 表达rhOP-1工程菌经发酵后，裂菌、提取包涵体，层析法纯化蛋白并逐步降低尿素浓度透析复性。采用改良MTT法检测rhOP-1对NIH3T3细胞增殖和对硝基苯酚法（PNPP）检测rhOP-1对细胞碱性磷酸酶（ALP）活性的影响，同时在体内通过小鼠肌袋埋植实验测定rhOP-1活性。结果 经纯化的rhOP-1纯度可达98％。体外rhOP-1浓度在0．06～6μg／ml可明显促进细胞生长和ALP活性；体内rhOP-1埋植剂植入小鼠肌间隙2周后，可明显提高体内钙含量，且成骨趋势明显。结论 原核表达的rhOP-1具有良好的生物学活性。

蛋白质芯片技术在过敏原特异性IgE检测中的初步应用

目的研制过敏原特异性IgE检测蛋白芯片,对该芯片的检测灵敏性和特异性进行评估。方法将不同浓度的过敏原提取液按一定阵列方式点样到固相载体上,经过固定,封闭,洗涤步骤,加入待检血清,血清中的抗体与基片上的抗原反应,用生物素-亲和素系统使Cy3荧光信号扩增,最后用Scanarray4000激光共聚扫描仪成像。与IVT试剂盒(EIA法)进行了对比检测。结果芯片的灵敏性和特异性较好,血清稀释128倍仍可检测到豚草特异性IgE的存在。芯片法对食入性过敏原的检测效果好,对吸入性过敏原的检测效果比EIA法差。结论过敏原特异性IgE抗体检测芯片,具有样本血清量少,操作简便,价格低廉等优点,具有较强的临床检测使用价值,是未来诊断试剂的发展方向。

水质净化微生物絮凝剂研究进展

微生物絮凝剂是近年来研究的新型水处理剂.本文从菌种选育、絮凝特性、结构、应用、合成酶等几个方面,综述了国内外最新研究成果.最后,展望了微生物絮凝剂的研究发展方向.

明胶海绵复合重组人骨形态发生蛋白-7植入物的体内异位成骨实验

目的:考察以明胶海绵为载体的重组人骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)在小鼠体内异位成骨能力,评价大肠杆菌表达的rhBMP-7生物学活性。方法:昆明种小鼠随机分为两组,将复合rh-BMP-7的明胶海绵植入小鼠肌间隙作为实验组,对照组植入明胶海绵,分别于术后1、2、3、4周取出埋植材料,HE染色进行组织学观察,测定蛋白含量、钙含量与碱性磷酸酶(ALP)活性。结果:复合rhBMP-7的明胶海绵组在术后2、3、4周有骨细胞类似细胞和钙化灶的形成,术后2、3、4周蛋白含量、ALP活性和钙含量均明显高于明胶海绵对照组。结论:明胶海绵复合rhBMP-7植入小鼠体内有较强的异位成骨能力,是良好的生物载体,可用于rhBMP-7体内活性检测。

重组人骨形态发生蛋白-7对NIH3T3细胞生物学行为的影响

目的:探讨重组人骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)对NIH3T3增殖和骨向分化的影响。方法:向培养的成纤维细胞NIH3T3中加入不同浓度的rhBMP-7,观察NIH3T3增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素(OCN)含量的变化。结果:rh-BMP-7在一定浓度范围内可以明显促进NIH3T3细胞增殖、提高ALP活性与OCN水平。结论:rhBMP-7可以刺激NIH3T3细胞增殖,诱导NIH3T3细胞向成骨细胞表型分化。

3-(4′-苯甲酰基氨基-苯基)-香豆素衍生物的合成及体外降血糖活性

首先以对氨基苯乙酸和水杨醛类化合物为原料,通过Perkin缩合反应,再经盐酸酸化合成了3个3-芳基香豆素类化合物4a～4c;再与取代苯甲酰氯6a～6h通过酰胺化反应合成得到了10个3-(4′-苯甲酰基氨基-苯基)香豆素类化合物7a～7j。所有目标化合物的结构均经过~1H NMR,^(13)C NMR,ESI-MS进行了确证。通过测定α-葡萄糖苷酶抑制活性和晚期糖基化终产物(AGEs)形成抑制活性评价了目标化合物的体外降血糖活性。结果表明化合物7f(IC_(50)=10.84±0.36μmol/L)表现出较好的α-葡萄糖苷酶的抑制活性;化合物7g(IC_(50)=5.01±0.55μmol/L)对AGEs形成抑制活性远高于阳性药氨基胍盐酸盐(AG,IC_(50)=290.31±7.32μmol/L),这些结果为抗糖尿病药物的进一步研究提供了理论基础。

雪胆甲素及其衍生物的研究概况

雪胆甲素主要存在于葫芦科雪胆属植物雪胆中,药理作用广泛,现已用于临床。现对其化学结构、含量测定、药理作用、药效学作用及结构修饰作一综述,以冀为雪胆甲素的深入研究提供参考。

奶子藤属植物中生物碱研究进展

奶子藤属植物为傣族传统常用药材,含有大量结构复杂,生物活性良好的生物碱类成分。本文针对奶子藤属植物中已分离鉴定的95个生物碱及其体外抗肿瘤和抗HIV活性研究进行了系统综述,为更加合理地开发利用奶子藤属植物资源提供参考依据。

奶子藤吲哚生物碱化学成分研究

为研究奶子藤(Bousigonia mekongensis)根的化学成分及生物活性。采用正相硅胶、RP-18、制备液相等色谱技术,对奶子藤根中的化学成分进行了分离纯化,共分离得到9个化合物,通过NMR、MS等波谱方法将其结构鉴定为:quebrachamine(1)、(-)-isoeburnamine(2)、rhazinilam(3)、tetrahydroalstonine(4)、leuconodine D(5)、leucophyllidine(6)、(-)-O-ethyleburnamine(7)、(-)-ebumamenine(8)、eburenine(9)。化合物1和3~7首次从该属植物中分离得到,化合物2为首次从该植物中分离得到。所有化合物测试了拮抗高糖所致的足细胞损伤和抑制淀粉样蛋白-β(Aβ)两种生物活性,结果显示化合物6具有一定的Aβ抑制活性(IC 50=26.1μM),其余化合物均未显示出生物活性。

大叶糖胶树吲哚生物碱化学成分研究

为研究大叶糖胶树(Alstonia macrophylla)化学成分及生物活性。采用正相硅胶、葡聚糖凝胶、制备液相等色谱技术,对大叶糖胶树中的化学成分进行了分离纯化,共分离得到6个化合物,通过NMR、MS等波谱方法将其结构鉴定为vallesamine(1)、picrinine(2)、khasuanine A(3)、scholaricine(4)、echitamine(5)、strictosamide(6)。化合物3和6首次从该属植物中分离得到,化合物1、2、4、5为首次从该植物中分离得到。所有化合物测试了对HCT-116人结肠癌细胞和DLD-1人结直肠腺癌上皮细胞的细胞毒性,结果显示化合物2和4具有一定的细胞毒性,化合物4对DLD-1人结直肠腺癌上皮细胞的细胞毒性较为明显(IC50 =16.7μg/mL),其余化合物均未显示出生物活性。

ICP-MS法分析中草药和生物组织中金属元素的研究进展

阐述了电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)在中草药、中草药煎煮液、中草药粉剂、中成药及部分生物组织样品金属元素分析中的应用,可以为进一步研究金属元素的毒效作用与疾病治疗的关系提供依据。

明胶海绵复合重组人成骨蛋白-1的骨修复材料免疫原性及肌肉刺激性实验研究

目的考察以明胶海绵为载体的重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)骨修复材料的免疫原性及肌肉刺激性。方法以明胶海绵为载体制备rhOP-1骨修复材料,间接ELISA方法观察该骨修复材料植入小鼠体内的免疫原性反应,病理切片观察其对周围肌肉的影响及形态变化。结果ELISA结果表明,此法制备的以明胶海绵为载体的rhOP-1骨修复材料未引起小鼠的特异性抗体产生。植入部位肌肉虽出现炎细胞浸润现象,但炎症反应呈可逆性,未发现肌肉组织的坏死,且组织钙化现象明显。结论明胶海绵复合rhOP-1的骨修复材料在免疫原性和肌肉刺激性方面安全可靠。