某高级中学结核病突发疫情的实验室鉴定

自然界中分枝杆菌种类很多，由于其生物学特性、对药物的敏感性以及对人的致病性不同，因此，不同分枝杆菌在疾病治疗、预防中的意义不同。结核分枝杆菌是引起人类结核病的常见病原菌，随着研究进展，近年由非结核分枝杆菌引起的非结核分枝杆菌病的报道有逐年增多的趋势。在当前报道的一百余种非结核分枝杆菌中，只有少数为致病菌，大多数为条件致病菌，它们往往对多种抗结核药物耐药，

结核性脑膜炎临床分离株表型耐药特点及其治疗效果研究

目的 研究分析结核性脑膜炎（tuberculous meningitis, TBM）的致病菌对抗结核药的耐药特点及抗结核药对致病菌的治疗效果。 方法 500例疑似TBM患者脑脊液标本经MGIT（mycobacteria growth indicator tube）960液体培养出25株临床分离株，再用16S rRNA基因测序法进行菌种鉴定。继而对这25株结核分枝杆菌临床分离株分别进行14种抗结核药物的MGIT 960液体药敏试验和12种抗结核药物的传统比例法固体药敏试验、16种抗结核药物的最低抑菌浓度（MIC）测定。通过计算血药浓度峰值（Cmax）/MIC值的大小来判断药物对菌株杀菌率的高低，并由此推断药物对该致病菌的治疗效果。 结果 液体药敏试验结果和固体药敏试验结果均显示了任意耐药的TBM临床分离株有13株（13/25）, 耐多药的TBM临床分离株有3株（3/25）；利福平、莫西沙星、左氧氟沙星、氯法齐明、对氨基水杨酸的Cmax/MIC值分别为19.880、63.333、19.149、75.000、50.855。 结论 莫西沙星、氯法齐明、对氨基水杨酸、左氧氟沙星、利福平的Cmax/MIC值较高，提示临床上使用高剂量利福平和氟喹诺酮类药物联合治疗TBM可以提高疗效；对氨基水杨酸和氯法齐明对耐多药TBM临床分离株可能有较好效果。

HIV实验室检测策略

目前,临床诊断和疫情监测对于艾滋病(AIDS)预防控制工作十分重要。但临床诊断及疫情监测则是基于实验室检测。随着艾滋病防治工作的不断深入,针对艾滋病病毒(HIV)的实验室检测策略也在不断完善和发展。因此建立一种敏感性高、特异性强的检测策略,对于控制艾滋病的流行尤为重要。该文从HIV检测策略的提出、评价和应用进行了阐述。通过对各种检测策略的综合分析,应用第四代抗原抗体联合检测试剂的检测策略可进一步缩短窗口期,发现急性期感染者,从而对中国现行的检测策略提出了新的选择。

HIV感染诊断替代检测策略现场应用评价设计中的相关问题探讨

1前言 我国HIV感染者报告数与估计数之间存在巨大差距。经典的ELISA／WB联合诊断检测费用高，等待结果时间长，在一定程度上影响了检测的可及性。国际上大量的替代检测策略研究表明：ELISA和（或）简单／快速检测法组合使用能提供与ELISA／WB联合试验同样可靠的检验结果，且费用低得多，确认实验仅在无法明确诊断时才使用。

结核性脑膜炎临床分离株的耐药性和基因型相关性分析

目的 了解结核性脑膜炎（tuberculous meningitis,TBM）的致病菌在耐药性和基因型方面的相关性.方法 从500例疑似TBM患者脑脊液标本中经MGIT（Mycobacteria growth indicator tube）960培养仪分离培养出25株结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）,对这25株Mtb分别进行间隔区寡核苷酸分型（Spoligotyping）法基因分型、14种抗结核药物的药物敏感性试验、10个耐药基因测序.结果 20株为北京基因型,占80.0％（20/25）;耐多药结核性脑膜炎（MDR TBM）有3株（3/25）,都属于北京基因型;测序结果显示inhA、embB、gyrB、eis 基因未发生突变,katG、rpoB、gyrA、rrs-KAN、rpsL、gidB基因发生突变.结论 北京基因型在耐药TBM中所占比例高,尤其是MDR-TBM.耐药TBM临床分离株与相关耐药基因突变有关系.

复发与治疗失败患者结核分枝杆菌基因型分析

目的分析复发和治疗失败患者结核杆菌基因型并进行病原学探讨。方法以2000年1月～2007年12月在北京市结核病胸部肿瘤研究所2次住院相邻时间间隔至少在6个月以上、有分离菌株的肺结核病患者作为研究对象。应用结核分枝杆菌基因分型方法对患者初次和第2次治疗的菌株进行分型并比较。结果24例结核病患者入选本研究。在完成初次治疗的5人中，其前后分离株的基因型均相同；在另19例患者（8例丢失、11例治疗失败）中，有2例（10．5％）患者其分离株的基因型与第1次不同；其余17例（89．5％）患者前后2次分离株的基因型相同。结论内源发病是复发的主要原因，失败和丢失病例中少数存在再感染情况。

不同时期住院肺结核患者初始耐药调查分析

目的分析不同时期住院肺结核患者初始耐药的发生情况，为临床初治肺结核患者制订合理化疗方案提供依据。方法回顾分析北京市结核病胸部肿瘤研究所1986年～1988年（设为Ⅰ组）及2004年～2005年（设为Ⅱ组）住院的初治肺结核患者初始耐药情况。结果①初始耐药率：Ⅰ组患者为27．2％（25／92），Ⅱ组为39．6％（65／164），2组经统计学处理差异有统计学意义（x^2=4．00，JP：0．045）；②初始耐多药率：Ⅰ组患者为1．1％（1／92），Ⅰ／组为15．9％（26／164），2组经统计学处理差异有统计学意义（x^2=13．57，P=0．00023）。结论住院肺结核患者初始耐药、耐多药呈上升趋势，提示临床医生针对初冶患者也应行结核菌培养及药敏检查，及时发现初始耐药尤其是耐多药患者，选用敏感药物制订个体化初治方案，以减少延误，及早治愈患者。

卡介苗缺失免疫显性抗原在结核病血清学检测中的作用

目的探讨卡介苗（BCG）缺失免疫显性抗原在结核病血清学检测中的作用。方法选取主流结核病血清学检测抗原的四种不同组合试剂A（结核分枝杆菌抗体IgG检测试剂）、B（结核分枝杆菌抗体检测试剂）、C（结核杆菌TB特异性抗体检测试剂）、D（活动性结核抗体检测ELISA系统），通过免疫印迹、胶体金和酶联免疫吸附等免疫学方法检测109例活动性结核患者和97名健康人群（分为结核菌素纯蛋白衍生物PPD阳性和阴性组）的结核抗体，应用贝叶斯概率统计学方法，综合分析不同抗原组合对结核病检测准确率的影响。结果试剂A、B、C、D对活动性结核病IgG检出率分别是80．0％、66．7％、80．7％、56．0％，明显高于健康人群的23．9％、8．9％、6．6％、1．0％，差异均有统计学意义（χ^2值分别为47．53，51．59，90.48，69．68，均P〈0．01）。其中A、B试剂对健康人群结核抗体检出率随PPD阳性反应强度而增高（χ^2值分别为2．124，2．220，均P〈0．05），C、D试剂对健康人群结核抗体检出率与PPD反应强度无相关性（χ^2值分别为0．122，0．479，均P〉0．05），试剂D的准确率最高，其对活动性肺结核患者IgM检出率为2．1％。结论IgG检出的敏感性与抗原的选择及组合数量呈正相关，高的检测敏感性常伴随特异性的损失，选择BCG缺失抗原可显著提高检测特异性。

197例临床结核分枝杆菌分离株的快速耐药性检测报告

目的评估线性探针MTBDR—Plus检测临床分离株对利福平（RFP）和异烟肼（INH）药物敏感性的效能。方法应用病例对照研究方法选取197例临床结核菌分离株，进行传统比例法药物敏感性试验和MTBDR—Plus检测，分析MTBDR—Plus方法的敏感性和特异性。结果MTBDR-Plus方法检测RFP和INH耐药的敏感性分别为88．6％和79.3％，特异性分别为98．8％和98．8％。结论MTBD-Plus方法灵敏度和特异性高，具有较好的应用前景。

结核病痰涂片镜检标准化教材试点培训班在呼和浩特市召开

为规范结核病痰涂片镜检培训工作,改善培训收效,促进涂片镜检工作标准化,中国CDC结核病防治临床中心与世界卫生组织驻中国代表处合作,组织编写了结核病痰涂片镜检标准化教材,并于2006年9月21-

天然调节T细胞与结核病免疫病理关联

目的检测调节性T细胞（Tr）在结核病病人是否增高，确证Tr与结核免疫病理的关联性，为Tr功能研究提供疾病模型。方法流式细胞术（FACS）分选CD3＋CD4＋T及CD3＋CD8＋T等主要淋巴细胞亚群，通过RT—PCR测定Foxp3基因在正常和结核病病人T细胞亚群中的表达，FACS多色分析Foxp3T细胞在CD4＋CD25＋细胞群体中的分布，累积病例分析Tr细胞在外周血扩增情况，免疫组化方法分析Tr在结核病理的浸润，结合临床资料分析Tr数量的改变与结核病的关联性。结果Foxp3基因在正常和结核病病人CD3＋CD4＋T细胞中特异性扩增，FACS分析表明Foxp3F要表达于CD4＋CD25＋。“亚群中，占CD4＋CD25highT细胞的80％以上，以CD4＋CD25highFoxp3＋三联标志检测40例正常与51例活动性结核病病人外周血Tr占CD4＋T细胞比例分别为（0．23±0．20）％和（1．01±1．00）％，结核病病人较正常人高4．4倍，Tr在结核病明显扩增（P〈0．01），结核病理组织中有高频率Foxp3＋细胞浸润。Tr扩增与结核病有效治疗和预后的关联性有深入探讨价值。结论Tr细胞在结核病病人增高，并与结核免疫病理损伤相关，结核病可作为Tr细胞功能研究的疾病模型。

存放温度及时间对于HIV/AIDS患者外周血CD4^+、CD8^+细胞测定结果的影响

目的 研究HIV AIDS患者外周血CD4 + 、CD8+ 淋巴细胞数在不同条件下 (时间、温度和处理过程 )的变化。方法 选取HIV AIDS患者 34例 ,用流式细胞术检测在 4℃条件下放置不同时间(2、2 4、4 8、72h)的外周血CD4 + 、CD8+ 细胞数的变化 ,对经过处理的外周血 (处理过的血样 )CD4 + 、CD8+ 细胞数的变化进行比较 ;对室温条件下放置不同时间 (2、2 4、4 8、72h)处理过的血样CD4 + 、CD8+细胞数的变化进行比较。结果 在 4℃时 ,全血放置 2、2 4、4 8、72h的CD4 + 细胞计数差异无显著意义(P >0 0 5 ) ,而CD8+ 细胞数放置 72h时则差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;处理过的样品放置 72hCD4 +细胞计数差异才有显著意义 (P <0 0 5 ) ,而CD8+ 细胞数在 2 4h时差异就有显著意义 (P <0 0 5 )。在室温时 ,处理过血样放置 2、2 4、4 8、72h的CD4 + 细胞计数差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,而CD8+ 细胞数在 4 8h则差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论 抗凝全血在 4℃放置 4 8h ,检测CD4 + 、CD8+ 淋巴细胞数 ,结果是可靠的。处理过血样在室温放置 2 4h ,检测CD4 + 、CD8+ 淋巴细胞数 ,结果是可靠的。 2 4～4 8h虽然CD4 + 淋巴细胞没有变化 ,但CD8+ 淋巴细胞却发生明显的变化 ,两者比例必然发生变化。

我国HIV感染者CD_4^+T淋巴细胞检测能力的研究

目前，人类关于HIV感染的检测项目很多，其中CD4^＋ T淋巴细胞的检测已成为评估HIV感染者疾病状况切实可行和相对经济的检测项目，CD4^＋ T淋巴细胞水平用来监测不同临床阶段HIV感染者免疫状况的变化，判定HIV感染者病程，预测机会性感染的出现以及评价抗HIV药物疗效。从2006年起准确检测CD4^＋ T淋巴细胞计数已经成为判断是否开始治疗AIDS和HIV感染者以及治疗效果观察对比的关键。国际上如美国CDC、英国国家室间质量评价系统（The United Kingdom National External Quality Assessment Service，NEQAS）、加拿大HIV／AIDS质量评价和免疫标准化体系（Quality Assessment and Standardization for Immunological Measures Relevant to HIV／AIDS，QASI）定期发放质控品，

丙型肝炎病毒抗体诊断试剂质量评估

目的对国内外不同厂家的丙型肝炎(丙肝)病毒的15种酶联免疫吸附法(ELISA)诊断试剂及8种胶体金法诊断试剂的质量进行评价。方法使用国家艾滋病参比室基础血清盘、参比室干扰血清盘、商业阳转血清盘,以阳性符合率、阴性符合率等指标评价试剂的质量。结果共检测80份样本,15种丙肝ELISA试剂的阳性符合率、阴性符合率均≥97.5%(39/40);8种丙肝胶体金试剂阳性符合率为82.5%～100%(33/40～40/40),阴性符合率均≥97.5%(39/40)。对阳转血清盘检测,ELISA试剂的平均延长天数分布于8-19天之间。丙肝ELISA和胶体金试剂的分析特异性均为100%。结论参评的ELISA试剂具有较高的阳性符合率和阴性符合率。胶体金试剂的阴性符合率较高、阳性符合率有差异。丙肝ELISA试剂适合于中国一般人群的筛查检测。丙肝胶体金试剂的敏感性有待于进一步提高。

三种丙型肝炎病毒核心抗原检测方法初步比较

目的对三种丙型肝炎病毒核心抗原（HCV cAg）的检测试剂进行初步比较。方法对72份抗体检测阳性样本进行HCV核糖核酸（RNA）、HCV核心抗原检测,其中HCV cAg分别采用A、B、C 3种试剂平行检测,实验室检测和数据统计均采用盲法。结果 A、B、C 3种HCV cAg检测试剂与核酸检测的符合率分别为97.22%、72.22%、54.16%,两两之间差异均有统计学意义（P〈0.05）。试剂A对HCVcAg的检出率与HCV RNA的检出率高度一致（Kappa=0.8421,95%可信区间：0.6290-1.0000）。方法B、C与核酸检测无一致性,差异有统计学意义（P〈0.05）。Cochran-Armitage趋势性检验表明,三种试剂对HCV cAg的检出率均随HCV RNA浓度升高而提高（Z统计量单侧P〈0.0001）。结论方法 A可作为条件有限时核酸检测的替代方法;三种HCV Ag检测方法的检测水平之间存在较大差距;三种方法对HCV cAg的检出能力均随核酸浓度的升高而增强。

卡介苗缺失免疫显性抗原在结核病血清学检测中的作用

目的探讨卡介苗（BCG）缺失免疫显性抗原在结核病血清学检测中的作用。方法选取主流结核病血清学检测抗原的4种不同组合试剂A（结核分枝杆菌抗体IgG检测试剂）、B（结核分枝杆菌抗体检测试剂）、C（结核杆菌特异性抗体检测试剂）、D（活动性结核抗体检测ELISA系统），通过免疫印迹、胶体金和酶联免疫吸附等免疫学方法检测109例活动性结核患者和97名健康人群[分为结核菌素纯蛋白衍生物试验（PPD）阳性和阴性组]的结核抗体，应用贝叶斯概率统计学方法，综合分析不同抗原组合对结核病检测准确率的影响。结果试剂A、B、C、D对活动性结核病IgG检出率分别是80．0％、66．7％、80．7％、56．0％，明显高于健康人群的23．9％、8．9％、6．6％、1．0％，差异均有统计学意义（X2值分别为47．53，51．59，90．48，69．68，均P〈0．01）。其中试剂A、B对健康人群结核抗体检出率随PPD阳性反应强度而增高（X2值分别为2．124，2．220，均P〈0．05），试剂C、D对健康人群结核抗体检出率与PPD反应强度无相关性（X2值分别为0．122，0．479，均P〉0．05），试剂D的准确率最高，其对活动性肺结核患者IgM检出率为2．1％。结论IgG检出的敏感性与抗原的选择及组合数量呈正相关，高的检测敏感性常伴随特异性的损失，选择BCG缺失抗原可显著提高检测特异性。

科赫与结核分枝杆菌

罗伯特·科赫是人类历史上首先致力于疾病病因研究的伟大科学家，他第1次发现传染病是由病原菌感染造成的，第1次证明了某种特定的微生物是引起特定疾病的原因；他发明了细菌平板培养技术和细菌照相技术，拍摄了第1张细菌的显微照片；他第1次发现了炭疽杆菌；第1次分离了结核杆菌和霍乱弧菌……科赫堪称病原学的奠基人和开拓者，曾获得诺贝尔生理学和医学奖。

天然调节T细胞与结核病免疫病理关联

目的 检测调节性T细胞（Tr）在结核病病人是否增高,确证Tr与结核免疫病理的关联性,为Tr功能研究提供疾病模型.方法 流式细胞术（FACS）分选CD3＋CD4＋T及CD3＋CD8＋T等主要淋巴细胞亚群,通过RT-PCR测定Foxp3基因在正常和结核病病人T细胞亚群中的表达,FACS多色分析Foxp3 T细胞在CD4＋CD25＋细胞群体中的分布,累积病例分析Tr细胞在外周血扩增情况,免疫组化方法分析Tr在结核病理的浸润,结合临床资料分析Tr数量的改变与结核病的关联性.结果 Foxp3基因在正常和结核病病人CD3＋ CD4＋T细胞中特异性扩增,FACS分析表明foxp3主要表达于CD4＋ CD25high亚群中,占CD4＋ CD25highT细胞的80%以上,以CD4＋CD2high Foxp3＋三联标志检测40例正常与51例活动性结核病病人外周血Tr占CD4＋T细胞比例分别为（0.23±0.20）%和（1.01±1.00）%,结核病病人较正常人高4.4倍,Tr在结核病明显扩增（P〈0.01）,结核病理组织中有高频率Foxp3＋细胞浸润.Tr扩增与结核病有效治疗和预后的关联性有深入探讨价值.结论 Tr细胞在结核病病人增高,并与结核免疫病理损伤相关,结核病可作为Tr细胞功能研究的疾病模型.