夏黑葡萄花色苷的提取及抗氧化活性研究

探究了超声波辅助提取夏黑葡萄花色苷的最佳工艺及其抗氧化能力。采用Box-Behnken响应面法研究液料比、超声时间和温度这3个因素及其交互作用对花色苷提取的影响。结果表明,优化后的提取工艺为:液料比为3∶1(m L/g),超声时间为21 min,温度为59℃。此条件下提取的总花色苷含量和模型预测值的相对误差仅为3.17%。还考察了夏黑葡萄花色苷对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O_2^-)、DPPH自由基(DPPH·)的清除能力,研究结果表明,本实验提取的花色苷具有较强的抗氧化活性,其清除自由基的能力与浓度存在量效关系。

龙眼酒的发酵工艺研究

以龙眼果汁为主要原料进行酒精发酵,在单因素实验基础上,选取初始pH、初始糖度、SO2添加量为影响因素,选取酒精度(20℃)和总香味物质含量为响应值,应用中心组合Box-Behnken实验设计建立数学模型,进行响应面分析。研究结果表明,在初始糖度28.5%,初始pH3.96,SO2添加量58.8mg/L最优条件下,得到最大酒精度(20℃)和总香味物质含量分别为15.17°和2.322g/L,接近于理论预测值为15.28°和2.329g/L,表明用响应面分析法优化得到的工艺参数准确,对工艺设计和生产具有较强的指导价值。

响应面法优化醇提荷叶总黄酮和生物碱的工艺研究

采用超声-酶-渗漉协同方法醇提荷叶总黄酮和生物碱,以总黄酮和生物碱的总评值为评价指标,用Box-Behnken响应面设计考察因素对其的影响,对结果进行二项式拟合及响应曲面分析得到最适宜提取条件为:乙醇浓度75%、料液比1∶26(g/mL)、超声时间80min、纤维素酶添加量14mg/g、渗漉速度3mL/min、渗漉液收集体积为9倍,在此条件下荷叶总黄酮和生物碱得率分别为6.7735%和0.7817%,与理论预测值偏差为-3%左右。实验结果表明,优化后的提取工艺稳定可行,且具有得率高、提取时间短等优点。

双水相纯化淀粉糖化酶的影响因素研究

以四种不同的淀粉糖化酶发酵液为研究对象,用纯化倍数作为参考指标。在单因素实验基础上,选取四种分子量的聚乙二醇(PEG600、PEG800、PEG1000、PEG2000)、三种盐(MgSO4、(NH4)2SO4、KH2PO4)和四种发酵的淀粉糖化酶酶液(米根霉、根霉、酒精酵母、酯化酵母)为自变量。得到最佳的提取条件为:米根霉在PEG1000浓度为15%(均为质量浓度),MgSO4浓度为22.86%,纯化倍数可达3.35;其酒精酵母和酯化酵母在PEG1000浓度均为15%,(NH4)2SO4浓度分别为15.73%和13.33%,得到纯化倍数为1.82、1.50;根霉在PEG2000浓度为15%,盐(NH4)2SO4添加14.37%,纯化倍数达2.07。该方法在淀粉糖化酶含量有差异的情况下,能保存酶活去除杂蛋白,分离出淀粉糖化酶。

响应面分析法优化荷叶黄酮保护剂的研究

黄酮类化合物是荷叶中的主要活性成分,具有良好的生物活性和药用价值。为确定渗滤液中荷叶黄酮的最佳保护剂,以黄酮的未氧化率为考察指标,利用响应面分析法对荷叶黄酮的保护剂进行了优化。用Design-Expert软件进行结果分析,建立了影响因素与响应值之间的函数关系,得到回归方程。根据回归方程优化得出100mL荷叶渗滤液最佳的保护剂添加量为葡萄糖酸-α-内酯0.280g、烟酰胺0.444g、植酸54.0μL,在此条件下荷叶黄酮未氧化率为96.98%。为荷叶黄酮进一步的开发和利用提供理论基础。

一株酯化功能菌分离鉴定及酶学特性研究

从国家级重点文物遗产"国宝窖池"中分离选育得到一株高酯化力的发酵功能菌。结合形态学特征和分子解析对其进行了鉴定。菌落在麦芽汁琼脂培养基上初为白色随菌落成熟而变成粉红色,表面质地呈丛卷毛状。菌丝不规律地分枝,菌丝体顶端着生闭囊壳。酶学特性研究结果显示:所产酯化酶最适作用温度为30℃,最适pH为5.0,金属离子Na+、K+、Mg2+、Fe2+对该酶有明显的促进作用,而Ca2+、Cu2+对该酶有强烈的抑制作用。扩增菌株的内转录间隔区ITS序列,长度579bp。利用Gene Bank BLAST搜索同源序列,通过DNAMAN分别进行序列相似性比对。其中ITS序列与Monascus purpureus典型菌株相似性高达99.5%,DNAstar分析显示两者的离散度为0.5%,Mega构建NJ系统进化树,处于进化树同一分支。根据形态学特征以及分子解析结果,基本可以判定该菌株为Monascus属purpureus种的一株新型优势菌株,命名为Monascus purpureus LZLJ2103。

响应面法优化猕猴桃原酒发酵工艺

采用Box-Behnken响应面法(RSM)对猕猴桃原酒发酵工艺进行优化。在单因素的基础上,选取发酵后的酒精度(20℃)及总香味物质含量(g/L)做为双响应值,初始糖度、初始pH和接种量为自变量,利用Box-Behnken响应面中心组合法进行三因素三水平的实验设计,并做响应面分析,建立数学模型。结果表明:曲面回归方程拟合性好,在初始糖度25%、初始pH3.6、接种量0.47%条件下,验证优化工艺得到最大酒精度数(20℃)及总香味物质含量分别达到12.75°和1.42386g/L,接近于模型预测值12.80°和1.45131g/L,表明通过响应面优化的回归方程具有一定的实践指导意义。

微流控芯片在食品安全分析中的应用进展

微流控芯片技术可以实现从样品处理到检测的微型化、自动化、集成化及便携化,因而在食品安全检测方面展现出强大的发展活力。目前微流控芯片技术在农药残留、兽药残留、重金属、食品添加剂等食品安全检测方面已取得了一系列重要进展。该文着重介绍了微流控芯片技术在食品安全分析中的研究进展,并展望了其在食品安全分析中的应用前景。

基于液体阵列味觉仿生传感器鉴别白酒香型的新方法

通过模拟哺乳动物的味觉系统,建立了交叉响应的液体阵列传感器,为鉴别白酒香型提供了新方法.选用7种染料和1种卟啉化合物作为传感单元,构建液体阵列传感器,集合8个传感单元的光谱响应信号构成分析物的指纹图谱,达到识别的目的.使用96孔板酶标仪采集响应数据,结合主成分分析(PCA)、分层聚类分析(HCA)和判别分析(LDA)等模式识别方法进行数据处理,对9种具有代表性的不同香型白酒样品进行了鉴别分析.PCA结果表明,该方法对于白酒的检测主要基于酒体微量成分,其中酸类物质对识别的贡献最大(贡献率达54.3%),芳香类物质贡献率为18.6%;同时,仅用63.4%的数据信息量即可对白酒香型进行区分.HCA结果表明,平行样均正确归类,各白酒之间的相似程度在聚类图上得到体现.LDA结果表明,该阵列对于9种白酒样品香型识别的准确率达到100%.

猕猴桃白兰地专用酵母菌的选育及鉴定

通过2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)显色、产气初筛及发酵复筛方法在猕猴桃自然发酵液中筛选出了2株酿造性能良好,产酯能力较强的酵母N5和N13,其酿造出的猕猴桃白兰地一次蒸馏产物香气纯正,浓郁,无异味,一次蒸馏液乙醇体积分数分别为8.6%和9.1%,其中N5酵母酿造产物中丁酸乙酯的含量为0.122 g/L,N13酵母酿造产物中乙酸乙酯的含量为0.150 g/L,其产酯能力均明显提高。经过形态学及分子生物学鉴定,N5和N13菌株均属于汉逊酵母属。

响应面法优化百香果醋的发酵条件

研究并优化了百香果醋的酿造工艺。在单因素实验的基础上,通过正交实验得到酒精发酵阶段的最佳工艺参数:发酵温度30℃,糖度14%,接种量0.15%。并采用响应面法(RSM)得到醋酸发酵阶段的最佳工艺参数:发酵温度32.5℃,初始酒精度6%,接种量11%,在此条件下进行实验,发酵果醋酸度达到4.54%。发酵得到的果醋具有百香果特有的香味,酸爽柔和。

BP神经网络优化荷叶黄酮提取工艺及黄酮稳定性实验的探索

以荷叶为原料,采用Box-Behnken响应面设计与神经网络模型相结合的方法优化超声-渗漉协同作用浸提荷叶总黄酮的工艺条件并探讨了影响荷叶黄酮稳定性的因素。结果表明,优化后的提取工艺为乙醇浓度60.2%,料液比1∶39.7g/mL,超声时间80min,渗漉速度3mL/min,渗漉液收集体积为9.2倍,此条件下总黄酮得率为6.87%,与模型预测相对误差仅为1.89%,表明神经网络优化荷叶黄酮提取工艺具有很好的可靠性和实用价值。荷叶黄酮提取液在低温、微酸、避光条件下较稳定,β-环糊精、VC、D-葡萄糖酸内酯均对其均有一定的保护作用。

可视交叉传感阵列对蛋白质及其热变性过程的快速识别

以卟啉及其衍生物和特异性染料为敏感化学元件,基于交叉响应原理构建了识别蛋白质的可视6×6阵列.该阵列以颜色差谱图显示其与蛋白质作用呈现的特异性光谱反应,采用聚类分析、主成分分析和欧氏距离对图谱进行了分析.结果表明,该阵列可以鉴别模式蛋白牛血清白蛋白(BSA)、牛血红蛋白(BHb)和卵清白蛋白(Ova)及其混合物,且有望实现定量分析.此外,阵列的高敏感性使其不仅能识别天然蛋白质和不同变性程度的蛋白质,还能对其热变性过程进行可视化实时监控.该阵列产生的特殊颜色变化与蛋白质的空间构型、微环境pH值的差异及溶解度有关.因此,该方法不仅能实现对蛋白质的快速识别,为蛋白质热变性机理的研究提供新途径,而且在临床医学和食品安全等的实时快速检测方面有潜在的应用价值.

基于三元络合反应的高粱中单宁测定新方法

基于铁（Ⅲ）可与硫氰酸根离子和单宁发生络合反应生成稳定的三元离子络合物的性质，建立了分光光度法测定高粱中单宁的新方法。结果表明，显色剂与单宁反应后溶液颜色变化显著，在575nm处有明显的吸收峰；在优化后的条件下，单宁浓度在0．001～0．06g／L范围内服从朗伯一比耳定律，回归方程为Y=13．664X＋0．0389，相关系数R2=0．9993。该方法的平均回收率在95．77％～101．60％范围内，RSD〈1％。以此方法应用于高粱样品中单宁酸含量的测定，与国标检测方法（GBT15686—2008）结果一致。该方法简便快捷，灵敏度高，特异性好，抗干扰性能力强，测定的结果准确，可应用于高粱中单宁的检测。

低氘白酒对人体心率变异性和自主神经的调控作用

目的研究连续8 d急性摄入不同剂量自制酒精饮料、传统白酒和低氘白酒对人体心率变异性（HRV）和自主神经调控作用。方法 11例健康成年男性志愿者,体质量（64.7±4.5）kg,年龄21~25岁,平均年龄23.7岁。分为7个试验组,①本底（对照）（CK组）,不饮用任何含酒精饮品;②低剂量酒精（A-L组）,每天饮用50 m L 52度自制酒精＋200 m L普通饮用水;③高剂量酒精（A-H组）,每天饮用100 m L 52度自制酒精＋200 m L普通饮用水;④低剂量白酒（L-L组）,每天饮用50 m L52度泸州老窖特曲＋200 m L普通饮用水;⑤高剂量白酒（L-H组）,每天饮用100 m L 52度泸州老窖特曲＋200 m L普通饮用水;⑥低剂量低氘白酒（DDL-L组）,每天饮用50 m L 52度泸州老窖特曲＋200 m L低氘水;⑦高剂量低氘白酒（DDL-H组）,每天饮用100 m L 52度泸州老窖特曲＋200 m L低氘水。连续8 d。用心动周期信号（HPS）分析系统检测饮酒半小时后受试者的HRV,以评价交感神经和副交感神经系统活动。结果饮用自制酒精饮料和传统白酒使自主神经的交感神经活性及迷走神经活性变化,以交感神经活性升高最为突出活性。饮用低氘白酒后未见有交感和迷走神经活性的明显变化,即HRV的波动。结论相对于自制酒精饮料和传统白酒,低氘白酒能使人体自主神经协调和平衡性维持在较高水平。

低氘白酒对人体脑电图和心理功能的作用

目的研究连续8天摄入低剂量或高剂量酒精、普通白酒和低氘白酒对人体脑电图上的alpha波相对功率值、alpha衰减系数(AAC)、主观感觉和血液中5-羟色胺含量的影响,探讨低氘白酒对人体中枢神经功能的影响并分析其可能的机制。方法 11名平均年龄为23.7±1.3岁的健康成年男性参加本实验。实验期间受试者分别饮用低剂量酒精、高剂量酒精、低剂量白酒、高剂量白酒、低剂量低氘白酒和高剂量低氘白酒。30min后检测脑电图,并计算α衰减系数(alpha attenuation coefficient,AAC)和alpha相对功率值,用视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)测试受试者的舒适感和工作效率,作为主观评价的指标,同时采血样用于5-羟色胺含量的分析。结果α衰减系数结果显示,饮用高剂量酒精后AAC升高,其他组未见明显改变。与对照组相比,α波的平均功率值在饮用高、低剂量的酒精和白酒后均有明显下降,而饮用低氘白酒后α波的平均功率值未见明显下降,且比酒精和白酒组高,表明饮用酒精和白酒能使α波活动减少,而低氘白酒无此不良反应。血浆5-羟色胺的分析结果表明,饮用低剂量低氘白酒时血浆内的5-羟色胺水平最高,说明低氘白酒能引起人大脑的舒适感升高。结论饮用酒精和普通白酒能使人体脑电图上的α平均功率值下降,人体的舒适感和工作效率降低,而低氘白酒能使人体的α波相对功率值、舒适感、工作效率和5-羟色胺的含量都维持在较高的水平上,即饮用低氘白酒时,人体中枢神经的功能可维持在较为平衡稳定的水平上,避免调控的失衡的发生。

酸性蛋白酶基因Asp在红曲霉中的同源表达及序列分析

从红曲霉基因组中扩增出酸性蛋白酶基因Asp的编码区,构建其同源表达载体p BC-Hygro-Asp并导入到农杆菌GV3101备用。利用根癌农杆菌介导法将重组质粒导入红曲霉,并筛选获得Asp基因同源重组转化子,实现了酸性蛋白酶基因在红曲霉中的同源表达。转化子中酸性蛋白酶基因表达量是野生型菌株的3.30倍,能达到高产酸性蛋白酶的目的。对红曲霉酸性蛋白酶基因序列进行分析,结果显示该基因产物有两个天冬氨酸蛋白酶活性位点,为亲水性分泌蛋白,不参与信号转导,且与赤曲霉酸性蛋白酶有相同进化速率。

一种可视化快速鉴别白酒的新方法研究

白酒主体香味成分的含量和比例,是白酒香型风格的"构成要素"。针对白酒的主体香味成分,选择筛选出特异性敏感元件20种,构建5×4比色传感阵列芯片,建立了一种可视化快速鉴别白酒新方法。新阵列芯片检测性能明显优于已报道的通用阵列,可精确识别出不同风味白酒,且能反映出不同白酒中主体香味成分的差异。对15种白酒进行检测,主成分分析结果表明,前三个主成分对识别的贡献率依次为酯、醛、缩醛类物质(34.5%),酸类物质(19.2%)和乙醇(11.9%)。聚类分析发现同一品牌的白酒能正确归类,不同品牌同种香型白酒能率先聚为一类。各白酒间的相似性和差异性在聚类图上有较好的体现,不同香型白酒间的距离远近与白酒的生产原料、糖化发酵剂、酿造工艺密切相关。

试纸法快速测定高粱中单宁的研究

探讨了试纸与单宁反应的最佳条件,提出了用Fe(SCN)3-壳聚糖试纸法快速检测高粱中单宁的方法。结果表明,在pH 7.0～9.0的条件下,单宁与试纸上的显色物质反应生成紫红色稳定络合物,试纸颜色深浅与样品中单宁浓度成正比,通过与标准色阶图谱比较确定单宁浓度。试纸最低检出限达1.0μg/mL,5 min即可实现检测。应用于7种高粱样品中单宁含量的测定,并通过与国标法测定结果比较,本方法可实现半定量检测,已应用于高粱样品中单宁的实时、快速检测。

基于可视化学传感阵列的农药快速检测新方法

采用可视化阵列传感技术,以卟啉及其衍生物和指示剂作为传感元件,构建了一种对农药敏感的可视化学传感阵列。该传感阵列可以在常温常压下对浓度为0.1 mg/L的12种农药快速识别和分类,反应时间仅为1.5 min。采用聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)等统计学分析方法对检测结果进行分析,不同种类农药样品在聚类分析和主成分分析中均可以被准确归类。