临床基因扩增检测的全面质量管理

临床基因扩增检测工作的全面质量管理是在传统检验质量控制体系基础上的延伸。着重整体规划,将实验室建筑流程纳入质量管理范围。从细节着手,把好检测标本质量关。借助信息管理系统,保障分析前阶段的质量管理。加强操作合规性,规范开展性能验证工作,认真评价检测过程有效性,保障实验过程的质量管理。密切联系临床,延伸分析后质量管理内涵。总之,临床基因扩增实验室的质量管理应包括从基因扩增实验室建设和检测标本的前处理,到检测结果获得后与临床的沟通,进行全过程的严格和规范化的管理操作。

安徽地区17160例健康体检女性人乳头瘤病毒感染状况及基因分型

目的探讨安徽地区健康体检女性感染人乳头瘤病毒(HPV)发生率及病毒亚型分布,为宫颈癌的防治提供依据。方法采用聚合酶链反应(PCR)反向点杂交技术对2018年4月至2018年12月合肥金域医学检验实验室有限公司接收的不同年龄段的健康体检女性宫颈脱落细胞样本进行HPV基因分型检测,根据基因型检测结果分析HPV及其亚型在女性人群中的潜在感染率、各基因型检出率和不同年龄段分布。结果17160例健康女性体检样本中,HPV基因检测阳性者共2990例,总阳性率为17.42%(2990/17160)。17种高危型和6种低危型HPV均被检出。其中单一基因型检出者占73.71%(2204/2990),二重基因型检出者占19.03%(569/2990),三重基因型检出者占5.55%(166/2990),四重(43例)、五重(7例)和六重(1例)基因型检出共占1.71%(51/2990)。2204例单一基因型感染样本中,高危型感染者1829例(82.99%)。常见的高危HPV亚型依次为HPV52(20.07%、367/1829)、HPV16(16.84%、308/1829)、HPV53(9.84%、180/1829)、HPV18(8.26%、151/1829),此4种高危型HPV检出率占总高危型的55.00%(1006/1829);其他13种高危型HPV分布于其他823例患者。低危型HPV共检出375例,以HPV81亚型最常见(40.00%、150/375),其次为HPV42亚型(22.13%、83/375)和HPV43亚型(17.33%、65/375)。其他3种低危型分布于其余23例患者。二重HPV感染者中,均为高危亚型感染者390例(68.54%),均为低危亚型感染者10例(1.76%),高低危亚型混合感染者169例(29.70%)。三重感染中,高危亚型感染者73例(43.98%),低危亚型感染者2例(1.20%),高低危亚型混合感染者91例(54.82%)。四重及以上HPV感染中,高危亚型感染22例(43.14%),低危亚型感染0例(0.00%),高低危混合感染29例(56.86%)。无论单一HPV感染还是多重HPV感染,均以高危型HPV感染为主。21~25岁、26~30岁、31~35岁、36~40岁、41~45岁、46~50岁、51~55岁、56~60岁、≥61岁年龄组体检者HPV阳性检出率差异有统计学意义(χ^2=28.701、P<0.001)。结论安徽地区健康体检女性HPV感染以单一感染和高危感染为主,高危型HPV感染率从高至低依次为HPV52、HPV16、HPV53和HPV18;不同年龄分层HPV感染率存在差异。

曲古抑菌素A和多西他赛联合应用治疗前列腺肿瘤的实验研究

目的研究组蛋白去乙酰化抑制药物与常用的紫杉类化疗药物联合应用对人类前列腺癌细胞的杀伤作用,探讨其可能的分子机制。方法用不同浓度的组蛋白去乙酰化抑制药物曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)和紫杉类化疗药物多西他赛(Docetaxel,DTX)分别处理DU145和22Rv1前列腺肿瘤细胞,体外观察二者对肿瘤细胞的细胞毒作用。采用水溶性四唑盐(water soluble tetrazolium,WST-1)法检测细胞的增殖抑制率;蛋白质免疫印迹(western blot,WB)检测细胞中DNA损伤标志物磷酸化H2A.X(p-H2A.X)和细胞凋亡标志蛋白聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)特异性裂解片段的表达水平;采用定量实时荧光聚合酶链反应(quantitative real-time fluorescence polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测细胞中相关肿瘤抑制分子Maspin、p21^(CIP1/WAF1)和Bax的转录表达水平。结果TSA和DTX对于前列腺肿瘤细胞增殖的抑制作用随着浓度升高而增强。TSA对DU145细胞的细胞毒作用(IC50=0.16μM)较对22Rv1细胞(IC50=0.06μM)弱。而DTX对DU145细胞的细胞毒作用则较对22Rv1细胞表现更显著。低剂量的TSA(0.01μM,0.1μM)能协同DTX抑制肿瘤细胞的增殖。DTX能诱导肿瘤细胞中的PARP分子产生细胞凋亡的特异性裂解、使p-H2A.X表达水平升高,并促进肿瘤抑制分子MASPIN、p21^(CIP1/WAF1)和细胞凋亡分子Bax的转录表达。使用低剂量的TSA处理虽未见产生PARP的细胞凋亡特异性裂解片段和p-H2A.X表达升高,但促进DU145细胞表达maspin和Bax,也使22Rv1表达maspin和p21^(CIP1/WAF1)升高。同时TSA协同DTX显著诱导DU145细胞转录表达maspin、p21^(CIP1/WAF1)和Bax,协同诱导22Rv1细胞转录表达maspin和Bax分子。结论TSA和DTX均能抑制肿瘤细胞增殖。DTX处理能有效损伤肿瘤细胞的DNA,诱导肿瘤细胞凋亡。联合应用TSA和DTX可以显著提高抗肿瘤相关分子的表达。这种药物诱导的细胞毒作用可能是通过诱导肿瘤抑制基因的表达而发挥作用,并具有组织和细胞特异性。该结果为临床应用TSA和DTX药物干预和治疗前列腺肿瘤提供用药指导,同时也提醒临床医师用药时必须考虑患者的个体化差异。