DGGE技术在动物胃肠道微生物研究中的应用

变性梯度凝胶电泳(DGGE)是通过聚丙烯酰胺凝胶中变性剂浓度梯度的不同,将序列不同的DNA分开。目前,该技术已广泛应用于瘤胃微生物、肠道微生物等多样性研究。综述了变性梯度凝胶电泳技术的基本原理、优缺点及其在动物营养中的应用。

柠条作为动物饲料利用的调研报告

对宁夏等西北地区柠条的利用现状进行了实地调查,结合宁夏等西北地区柠条产业的发展现状、存在问题及产业优势,提出了针对宁夏等西北地区柠条产业发展的措施和建议。

蚕沙及其在动物饲料中的应用

在畜禽饲料资源匮乏的今天,如何合理开发利用蚕沙资源具有重要意义。文章综述了蚕沙的化学成分、药理作用和近几年在动物饲料中的应用及其存在的问题。

舍饲山羊常见传染病的临床症状与综合防治

为给舍饲山羊的健康养殖提供参考,综述了舍饲山羊生产中常见传染病的流行特点及临床症状,并结合生产实践,总结了山羊传染性疾病的综合预防措施和治疗方法。

四川阿坝县秋季牧草钙磷等矿物元素特征及其与土壤钙磷含量的关系

采用常规方法测定了四川阿坝县4个不同牧场秋季(9月)牧草矿物元素含量及土壤中的钙磷含量,以期为该地区反刍动物的放牧饲养提供依据。结果表明:阿坝县4个地区秋季牧草矿物元素中钙、钠和锌的含量差异不显著,磷、铁、铜、钾、镁、锰和硒含量差异显著(P<0.05),其中磷、锌和硒的含量不能满足反刍家畜的营养需求,需要补饲;土壤中钙含量差异不显著,全磷和有效磷差异显著(P<0.05);牧草中的钙、磷含量与土壤中钙、磷含量之间没有显著的相关性。

四川阿坝县不同地区与不同海拔秋季牧草营养成分分析

为了给四川阿坝县反刍家畜的补饲和草地的合理利用提供科学依据，采取实地采样与实验室分析相结合的方法测定了四川阿坝县麦尔玛乡三大队牧场、麦昆乡草原村、贾柯河乡四大队和贾柯河牧场秋季（9月）牧草营养成分。结果表明，阿坝县秋季牧草粗蛋白质（CP）平均含量为10．30％，粗脂肪（EE）平均含量为2．92％，粗纤维（CF）平均含量为29．24％，粗灰分（Ash）平均含量为6．86％，中性洗涤纤维（NDF）平均含量为57．21％，酸性洗涤纤维（ADF）平均含量为35．47％，钙（Ca）平均含量为0．71％、磷（P）平均含量为0．14％。不同地区秋季牧草CP、EE、CF、ADF、NDF、Ash和Ca的含量差异不显著（P〉0．05），P的含量差异显著（P〈0．05）。把海拔3400～3800m的采样区范围分成3400～3500、3500～3600、3700～3800m3个层次，不同海拔牧草CP、EE、CF、ADF、NDF和Ash的含量差异不显著（P〉O．05），Ca和P的含量差异显著（P〈O．05）。其营养成分适合阿坝县反刍动物的秋季放牧生产的要求，但不能以单纯放牧的形式来满足反刍动物的营养需求，需要补饲。

蚕沙对乐至黑山羊日粮干物质、能量和蛋白质消化代谢的影响

选择体重相近的乐至黑山羊阉公羊35只,随机分为5组,每组7只,试验组以不同比例蚕沙（25%、50%、75%和100%）替代精料,对照组精料不加蚕沙,各组粗料相同（青贮玉米秸＋大豆秸）,进行为期90 d的饲养试验,在饲养试验中期采用全收粪尿法进行消化代谢试验,研究蚕沙对山羊采食量、日粮干物质、能量及蛋白质消化代谢的影响。结果表明：①25%-75%蚕沙组可以极显著增加山羊精料、粗料和总干物质采食量（P〈0.01）;②25%蚕沙组日粮能量消化率和代谢率与对照组差异不显著（P〉0.05）,50%-100%蚕沙组极显著低于对照组（P〈0.01）;③各蚕沙组的氮表观消化率均极显著地低于对照组（P〈0.01）,并随蚕沙占精料比例的增加呈下降趋势,但氮存留率25%蚕沙组最高,比对照组高10.75%,50%和75%蚕沙组与对照组差异不显著（P〉0.05）。蚕沙具有良好的适口性,添加蚕沙可提高山羊干物质摄入量;精料中添加25%蚕沙对干物质、能量和氮的消化及代谢没有影响,但蚕沙添加量大于50%以后,会降低干物质、能量和氮的消化率和代谢率。

山羊Apaf-1和Apaf-2基因的cDNA克隆、序列分析及组织表达

采集5只多胎金堂黑山羊和5只单胎藏山羊在发情期的卵巢、垂体等组织样,进行Apaf-1和Apaf-2基因的c DNA克隆、序列分析,以及定量PCR技术对其mRNA进行组织表达量研究。结果表明,克隆出Apaf-1基因长度为3 750 bp,编码1 249个氨基酸,Apaf-2基因编码区全长为318 bp,编码105个氨基酸。这两个基因在两种山羊中序列相同,没有突变,且在5种组织中的表达均无差异。表明凋亡基因Apaf-1和Apaf-2在动物的进化中比较保守,与山羊多羔性状的相关性需要进一步研究。

成都麻羊的生长速度研究

采用常规方法,测定成都麻羊在不同生长阶段的体重、体尺,以探讨其生长速度.结果表明：初生公羔体重为1.80±0.42kg,母羔为1.54±0.27kg;2月龄断奶公羔重为8.89±1.80kg,母羔为8.53±1.91kg;6月龄公羊重为17.40±5.80kg,母羊为18.50±5.84;12月龄公羊体重为28.32±1.81kg,母羊为26.22±4.52kg;3岁公羊体重为51±3.48kg,母羊为36.2±5.98kg;哺乳期日增重公羊111.33g,母羊为74.50g;2-6月龄公羊日增重为45.90~109.50g,母羊为73.30-116.20g;6月龄体重公羊占成年体重的34.05%以上,母羊51.10%以上;12月龄体重公羊占成年体重的55.42%,母羊72.43%;6月龄公羊体尺指标占成年的76.67%,母羊占74.76%;12月龄公羊体尺指标为成年的84.07%以上,母羊为80.46%;6月龄母羊胴体重7.00±0.41kg,屠宰率为43.20%;成年母羊胴体重13.41±3.38kg,屠宰率为47.20%.

山羊Apaf-3基因的cDNA克隆、序列分析及组织表达研究

对单胎藏山羊和多胎金堂黑山羊Apaf-3基因cDNA克隆、序列分析及组织表达特性研究.采集5只多胎金堂黑山羊和5只单胎藏山羊在发情期的卵巢、垂体等组织样,进行Apaf-3基因的cDNA克隆、序列分析,并采用定量PCR技术对其mRNA进行组织表达量研究.结果,克隆出山羊Apaf-3基因长度为1731bp编码区全长为1245bp,编码414个氨基酸.Apaf-3基因在两种山羊中序列相同,且在5种组织中的表达均无差异.同源性分析表明凋亡基因Apaf-3在动物的进化中保守性低,与山羊多羔性状的相关性需要进一步研究.

精料补饲水平对断奶羔羊瘤胃微生物的影响

选用30日龄简阳大耳羊哺乳羔羊32只[(8.576±0.083)kg,雄16、雌16],随机分为4组,每组8只,单栏饲养。试验组在35日龄时断奶,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组每只分别补饲精料50、150、250 g/d,粗料以新鲜杂草为主,对照组羔羊跟随母羊哺乳,试验期42 d。试验结束后,选择每个处理组内接近平均体重的4只(雄2、雌2)屠宰取瘤胃液,通过平板计数法和PCR/DGGE技术,揭示补饲不同精料水平对羔羊瘤胃微生物数量和多样性的影响。结果表明,羔羊瘤胃细菌总数及多样性、原虫总数及多样性、球菌和新月牙菌随着补饲精料增加而不断增加,但杆菌和链球菌却基本一致。在补饲精料250 g/d后,瘤胃细菌约82.16亿个/mL、条带19条(对照组约51.86亿个/mL、条带13条),原虫约29.07万个/mL、条带23条(对照组约5.25万个/mL、条带8条)。说明补饲精料能够影响羔羊瘤胃微生物的数量和多样性,随着补饲量增加,细菌和原虫数量增多、多样性增大。精料补饲水平主要影响原虫数量及多样性,但对细菌数量及多样性影响较小。

山羊ZP3基因的cDNA克隆、序列分析及组织表达研究

对高繁金堂黑山羊和低繁藏山羊ZP3基因c DNA进行克隆、序列分析,并采用Real-time PCR技术对其在发情前期母羊卵巢组织的表达进行研究.结果表明:山羊ZP3基因编码区全长为1269bp,共编码422个氨基酸,两品种间有2处碱基差异,但未导致氨基酸的差异.山羊的ZP3基因在卵巢表达量高,与其他组织差异极显著(P<0.01),但两个品种间差异不显著(P>0.05).说明ZP3基因主要在卵巢中表达,但可能不是影响山羊多羔性状的主基因.

山羊MSH4和MSH5基因的cDNA克隆、序列分析及组织表达

以低繁藏山羊和高繁金堂黑山羊为研究对象,分别提取处于发情期的5只藏山羊和5只金堂黑山羊的卵巢、子宫、输卵管、垂体的总RNA,并通过RT-PCR技术对MSH4、MSH5基因c DNA进行克隆、序列分析,以Real-time PCR技术对其进行组织表达研究。结果表明,藏山羊和金堂黑山羊MSH4基因编码区均长2 499 bp,编码832个氨基酸,两品种基因编码区有5处碱基不同,并导致3处氨基酸的差异;MSH5基因编码区均长2 496 bp,编码831个氨基酸,两品种基因编码区有9处碱基不同,并导致5处氨基酸的差异。藏山羊MSH4基因编码区核苷酸序列与金堂黑山羊、山羊、绵羊、牛、马、小鼠、褐家鼠、人的同源性分别为:99.8%、99.8%、99.4%、98.1%、94.4%、85.1%、84.7%和93.5%;藏山羊MSH5基因编码区核苷酸序列与金堂黑山羊、山羊、牛、家犬、小鼠、褐家鼠、人的同源性分别为:99.6%、99.6%、97.3%、88.0%、85.8%、85.3%和90.2%。MSH4和MSH5基因m RNA在两个山羊品种的卵巢、子宫、输卵管、垂体中均有表达,但两品种间无显著性差异(P>0.05)。说明MSH4和MSH5基因在动物进化中比较保守,与山羊多羔性状的相关性有待进一步研究。

犏牛L-PGDS基因克隆及其在各组织和睾丸不同发育阶段的表达研究

本研究旨在克隆犏牛前列腺素D合成酶(prostagland D synthase,L-PGDS)基因序列,并检测其在不同组织及不同发育时期睾丸中的表达水平,从而为深入研究L-PGDS基因在犏牛睾丸发育过程中的作用机制提供依据。采集成年健康犏牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠、小肠、胃、大脑及不同发育时期犏牛睾丸组织:胎牛期(5~6月)、幼年期(1~2岁)、青春期(2.5~4岁)、老年期(7~9岁),Trizol法提取各组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增、克隆L-PGDS基因序列并利用相关生物学软件进行分析,利用实时荧光定量PCR检测犏牛各组织及4个不同发育阶段睾丸中L-PGDS基因mRNA的表达水平。结果显示,L-PGDS基因序列全长624 bp,包括完整的开放阅读框576 bp,编码191个氨基酸。同源性比对发现,犏牛与黄牛和绵羊的同源性最高,分别为99.28%和94.0%。系统进化树分析结果显示,犏牛与黄牛亲缘关系最近,其次是绵羊、马。L-PGDS蛋白为不稳定疏水蛋白,分子质量为21.229 ku,分子式为C953H1471N251O281S9,等电点为6.43,不稳定指数为47.25,不含跨膜区及信号肽,蛋白质二级结构预测显示α-螺旋、无规则卷曲、延伸链分别占25.65%、53.40%和20.94%。实时荧光定量PCR检测结果显示,L-PGDS基因在犏牛睾丸组织中特异性高表达,极显著高于其他组织(P<0.01);随着年龄增长L-PGDS基因mRNA在犏牛睾丸中呈先上升后下降趋势,其中在青春期相对表达量最高,极显著高于其他时期(P<0.01)。本研究结果为深入探究L-PGDS基因在犏牛睾丸发育过程中的作用机制提供了基础资料。