海洋细菌Halomonas elongate的次级代谢产物研究

目的对具有抗肿瘤活性的海洋细菌Halomonas elongate进行次级代谢产物的分离、纯化及抗肿瘤活性研究。方法通过大孔吸附树脂、硅胶、ODS、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等分离纯化手段,对H.elongate的次级代谢产物进行分离纯化;根据1H NMR谱、13C NMR谱及MS分析,并结合文献确定结构;采用MTT法对分离得到的次级代谢产物进行活性检测。结果从海洋细菌H.elongate的发酵粗提物中分离鉴定3个化合物,分别为胸腺嘧啶-2＇-脱氧核苷（1）、环（L-甘氨酸-L-脯氨酸）二肽（2）、1-（2＇-脱氧-β-D-赤式-呋喃戊糖）-1氢-1,2,4-三嗪酮（3）,活性检测结果显示3个化合物对人肺癌细胞H1299生长活性均无显著抑制作用（IC50〉20μmol/L）。结论化合物1~3均为首次从Halomonas中分离得到。

深海放线菌Streptomyces sp.WP6次生代谢产物的研究

目的研究深海来源链霉菌Streptomyces sp.WP6具有生物活性的次级代谢产物。方法采用正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、TLC薄层制备层析色谱、中压快速制备层析色谱和高压液相色谱等方法分离纯化次生代谢产物,采用13C NMR、1H NMR、HMBC、HSQC、1H-1H COSY、LC-MS等波谱技术鉴定结构。结果从该菌株发酵产物中分离得到8个次级代谢产物,分别鉴定为:邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(1)、N-乙酰基酪胺(2)、脯氨酸-亮氨酸(3)、N-乙酰色胺(4)、吲哚-3-甲酸(5)、苯乙酸(6)、环(脯氨酸-苯丙氨酸)(7)、(4S)-4,10二羟基-10甲基-2烯-1,4内酯(8)。结论首次从Streptomyces sp.WP6发酵产物中分离到上述8个次生代谢产物。

深海细菌Psychrobacter submarinus 1A01998的次级代谢产物研究

目的对来自深海沉积物中的海洋细菌Psychrobacter submarinus 1A01998的次级代谢产物进行研究。方法采用大孔吸附树脂、硅胶、ODS和Sephadex LH-20凝胶等柱层析色谱分离方法,对海洋细菌Psychrobacter submarinus 1A01998进行次级代谢产物的分离纯化,根据1H NMR、13C NMR和MS等波谱数据分析并结合相关文献对化学结构进行鉴定。结果从深海细菌Psychrobacter submarinus 1A01998的发酵粗提物中分离得到4个化合物,分别鉴定为环（L-脯氨酸-L-酪氨酸）（1）、环（D-脯氨酸-L-酪氨酸）（2）、3-吲哚甲醛（3）、2＇-O-甲氧基尿嘧啶核苷（4）。结论化合物1~4均为首次从该属中分离得到,其中化合物1、2为环二肽类化合物。

对虾白斑综合症病毒结构蛋白质VP41的研究

VP41蛋白质是对虾白斑综合症病毒的一种结构蛋白,该蛋白质由病毒基因组上的wsv242开放阅读框(ORF)所编码,分子量为41 ku.根据vp41基因的序列,通过PCR扩增获得了该全长基因,将其克隆在载体pET-His上,以E.coliBL21为宿主菌,成功表达并纯化了含His标记的目的蛋白VP41,并制备了特异性鼠抗血清.当纯化的病毒粒子经去污剂处理后,VP41蛋白质被发现完全存在于病毒WSSV囊膜部分,Western blot杂交实验也证实该结果,表明VP41蛋白质是该病毒的一个囊膜蛋白质.通过Far-Western方法还发现VP41具有蛋白聚合作用.