吐温-85对螺旋霉素发酵过程的影响

研究了在培养基中添加吐温-85对发酵生产螺旋霉素的影响。结果表明:0h添加100mg/L吐温-85,发酵效价达28176u/ml,比对照提高11.9%。检测表明吐温-85可以增加细胞膜的通透性,提高乙酸激酶、酰基CoA合成酶和碱性磷酸酶的酶活力,并促进菌体对油的利用,提供更多的前体,从而提高螺旋霉素的产量。

林可链霉菌中的同源重组

为研究链霉菌中的同源整合频率和机制 ,采用不能在链霉菌中复制的大肠杆菌质粒转化链霉菌StreptomyceslincolnensisB48。质粒pYYE0 4a1上携带的被硫链丝菌素抗性基因灭活的林可霉素生物合成基因与染色体DNA上的同源基因发生重组 ,经过低抗筛选 ,得到两个突变子S .lincolnensisYY1和S .lincolnensisYY2。进一步以硫链丝菌素抗性基因为探针杂交染色体DNASmaⅠ片段 ,S .lincolnensisYY1和S .lincolnensisYY2都得到 1 5kb的阳性条带 ;而以缺失的lacZ基因为探针杂交染色体DNAHindⅢ和SmaⅠ联合酶切片段 ,只有S .lincolnensisYY2得到 4 4kb的阳性条带。Southern杂交结果表明S .lincolnensisYY1是由同源交换或二次重组产生的 ,而S .lincolnensisYY2为同源整合的结果。为验证同源整合子上大肠杆菌复制子和氨苄抗性基因的存在 ,用SphⅠ酶切染色体DNA后连接 ,连接液转化E .coliJM83感受态细胞 ,在氨苄抗性板上得到 2个转化子 ,命名为pSLE1。对其进行酶切鉴定的结果表明它是转化质粒pYYE0

H_2O_2对枯草芽孢杆菌生长代谢以及腺苷发酵的影响

通过摇瓶发酵试验研究H2O2对枯草芽孢杆菌ATCC21616生长代谢及产苷的影响。结果表明:添加时间、浓度以及两者的交互作用显著影响腺苷的积累,在12h添加20mg/L的H2O2最利于腺苷的合成,产苷量由7.03g/L增至7.79g/L。同时也研究了H2O2添加对代谢过程中糖耗及pH的影响。