广泛期小细胞肺癌胸部放疗患者循环肿瘤细胞临床价值的探索性研究

目的初步探讨循环肿瘤细胞(CTC)对接受胸部放疗的广泛期小细胞肺癌(SCLC)患者疗效预测和预后的意义。方法选取16例广泛期SCLC患者为研究对象。在胸部放疗前后,采用o HSV1-h TERT-GFP技术检测CTC。比较胸部放疗前后不同CTC数目患者的无疾病进展生存期和总生存期。结果 16例广泛期SCLC患者中,1例患者胸部放疗后失访,仅15例患者纳入分析。胸部放疗前基线水平的CTC中位数目为27/4 ml[(6~50)/4 ml],胸部放疗后的CTC中位数目为11/4 ml[(1~23)/4 ml]。多因素线性回归分析显示:CTC数目与广泛期SCLC患者的年龄、性别、吸烟、TNM分期、是否单脏器转移及转移病灶数目均无关(P﹥0.05)。入组患者中位随访时间为35.5个月(6.0~42.2个月)。胸部放疗前CTC≥27/4 ml患者的中位无疾病进展生存时间和中位总生存时间均短于CTC﹤27/4 ml的患者,但差异均无统计学意义(P﹥0.05);胸部放疗后CTC≥11/4 ml患者的中位无疾病进展生存时间和中位总生存时间均明显短于CTC﹤11/4 ml的患者(P﹤0.01)。6例胸部放疗后CTC≥11/4 ml的患者均复发,9例胸部放疗后CTC﹤11/4 ml的患者中仅3例复发。散点图显示随着CTC数目增加,患者的无疾病进展时间和总生存时间均明显缩短。结论一线化疗有效的广泛期SCLC患者接受胸部放疗后的CTC水平与患者预后有关,但需要进一步大样本的研究证实。

液体活检:突破性肿瘤早期检测技术的研究进展

恶性肿瘤已经成为人类健康的一大威胁,超过50%的肿瘤患者在诊断时已进入晚期,错过最佳治疗时机,给患者和社会带来巨大的经济负担。肿瘤的早期检测对于提高患者的生存质量、生存率、减轻社会经济负担至关重要。然而,目前大多数肿瘤缺乏可靠的早期检测方法,仍依赖组织活检,但其具有创伤性,患者的依从性较差。而液体活检作为非创伤性的诊断方法,通过分析循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA、外泌体、microRNA、循环RNA、肿瘤教育血小板、长链非编码RNA等携带的信息,是目前肿瘤早期检测领域的研究热点。本文综述了液体活检技术在肿瘤早期检测中的研究进展,有望为液体活检的临床转化提供帮助。

3D培养体系富集外周血中的循环肿瘤干细胞的研究

[目的]探究建立3D培养体系富集外周血中的循环肿瘤干细胞。[方法]应用阴性筛选的方法富集外周血中的循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs),随后利用3D培养体系将富集得到的细胞进行培养。采用免疫荧光、定量RT-PCR对3D培养的前列腺癌LNCaP细胞系、肺癌H2347细胞系的干性表型特征进行分析。使用肺癌患者的血液样本分离CTCs进行3D培养验证该方法的可行性。[结果]在光镜下可观察到,在3D培养体系中从外周血分离的前列腺癌LNCaP细胞增殖形成肿瘤细胞微球。免疫荧光结果显示,在3D培养条件下成团生长的前列腺癌LNCaP细胞表达EpCAM和CD133。在3D无血清培养条件下,LNCaP细胞系成球率为18.67%±3.06%。前列腺癌LNCaP细胞在3D培养体系中与普通2D培养相比,干性相关基因CD133、CD44和ABCG2表达水平明显增高,3D培养的肺癌H2347细胞与普通2D培养相比,干性相关基因CD133表达水平明显升高。肺腺癌患者肺静脉血分离CTCs 3D培养,可形成多个微型肿瘤细胞微球(称为肺癌类器官)。在光镜下观察,同一个患者培养获得的肺癌类器官呈现不同的形态结构特征。[结论]利用3D培养体系能够培养外周血中的CTCs,并富集得到CD133+的肿瘤干细胞。肺癌患者的CTCs 3D培养能够形成肺癌类器官,并能够展现CTCs的异质性。

液滴微流控单细胞转录组检测技术的建立和优化

目的:建立基于液滴微流控技术的单细胞转录组检测平台,并对该平台的有效性和在肿瘤研究中的潜在应用方向进行探讨。方法:利用液滴微流控体系,实现单个细胞和单个标记微球在油包水型乳浊液微滴中的共同包裹,即实现单细胞的分离与标记。通过调节流路内各项参数获得最适单细胞标记率。以混合的人急性早幼粒白血病细胞系HL-60和小鼠黑色素瘤细胞系B16-F10为模拟样品,评价所建系统的各项技术指标。结果:在油相和水相流速分别为200和30μL/min的条件下,细胞和微球浓度分别为250和400个/μL时,达到最适细胞标记率(11.87±3.75)%。模拟样品检测结果显示,输入细胞7.50万个,理论细胞标记率为11%时,可获得7 535个细胞的转录组数据,其中人和鼠转录组混合细胞有70个,仅占全部细胞的0.9%。利用转录组差异能够区分两类细胞,且能筛选出每类细胞的特异性表达标志物。结论:本研究建立了一个基于液滴微流控的单细胞转录组分析平台,平台的各项指标能够满足肿瘤学实验室要求,在肿瘤研究中具有广泛的潜在应用价值。

中国人群肝癌疾病负担:多数据源证据更新整合分析

目的分析我国肝癌疾病负担。方法基于《中国肿瘤登记年报》、全国三次死因回顾性调查、《中国卫生健康统计年鉴》、《中国死因监测数据集》、GLOBOCAN、五大洲癌症发病率(CI5)、WHO死亡数据库、全球疾病负担项目(GBD)国内外8个数据源,摘录我国人群肝癌的发病、死亡和伤残调整生命年(DALY)等信息,分析肝癌疾病负担既往、现况及预期。结果①既往:CI51973-2012年的长期数据显示,我国城市(以上海市为例)男、女性肝癌发病率分别下降41.3%和36.3%,农村(以启东市为例)分别下降了32.3%和12.2%;近10年年报也显示2005-2015年全国发病和死亡率分别下降8.1%和12.8%;基于年鉴数据的Joinpoint分析也提示下降:2002-2017年全国死亡率平均年度变化百分比为-3.0%(P<0.05)。②现况:GLOBOCAN估计2018年我国肝癌发病率、死亡率和1年患病率分别为18.3/10万、17.1/10万和10.8/10万;最新年报显示,2015年肿瘤登记地区发病和死亡率分别为17.6/10万和15.3/10万,且均随年龄上升;监测数据报道2017年全国死亡率与之接近(16.7/10万),男女死亡比为3.1。GBD报道2017年我国肝癌所致DALY达1115.3万人年,占全球的53.7%,HBV感染始终居归因首位。③预测:GLOBOCAN 2018预测至2040年我国肝癌发病和死亡例数将分别达到59.1万例和57.2万例,分别比2018年增加50.5%和54.9%,>70岁人群增幅明显。④经济负担:相关文献汇总显示,基于个体的研究报道的例均直接医疗费用呈上升趋势。结论多数据源均显示,我国人群肝癌发病和死亡率在数十年间有所下降,提示人群干预的有效性;但人群负担依然沉重,应继续加强优化一、二级预防为主的综合干预策略。