均匀设计和BP神经网络结合G1-熵权法对比优化苗药五香血藤提取工艺

目的:优化五香血藤的提取工艺参数。方法:采用U 6(64)均匀设计,对乙醇质量分数、料液比、提取次数和提取时间进行考察,以五味子醇甲和五味子乙素的含量为评价指标,采用G1-熵权法赋权得到综合评分,通过均匀设计试验进行分析得到最佳提取工艺,再通过BP神经网络建模进行网络模型优化和目标寻优,确定五香血藤的最佳提取工艺参数并进行验证对比2种分析方法。结果:均匀设计分析和BP神经网络建模得到的最优提取工艺综合得分分别为104.22、110.30,故确定BP神经网络模型预测的参数为最佳提取工艺,即为料液比20倍,乙醇质量分数90%,超声50 min,超声提取2次。结论:优选出的五香血藤最佳提取工艺稳定可行,为今后五香血藤有效成分的提取方法和工艺改进提供理论参考。

基于网络药理学和实验验证探究苗药弩药治疗膝骨性关节炎的作用机制

目的:运用网络药理学及实验研究苗药弩药治疗膝骨性关节炎的潜在的作用机制。方法:通过TCMSP、CNKI、BATMAN-TCM等数据库筛选弩药方潜在活性成分及作用靶点。检索OMIM、Drug bank、TDD及Genecards数据库获取膝骨性关节炎潜在作用靶点,进一步获取弩药方治疗膝骨性关节炎的潜在靶点。采用String数据库结合Cytoscape3.9.2绘制PPI网络。利用Metascape数据库对药物-疾病交集靶点进行GO及KEGG富集分析。采用RT-qPCR检测关节软骨中caspase-9 mRNA的表达。结果:共筛选得到38个活性成分,疾病与潜在活性成分共有143个交集靶点,其中包括ALB、AKT1、VEGFA、JUN、STAT3、MMP9等核心靶点;涉及的主要通路包括肿瘤通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等,弩药可显著降低关节软骨中caspase-9 mRNA的表达。结论:进一步阐明苗医弩药治疗膝骨性关节炎的潜在作用靶点及通路,有利于了解其作用机制,为后续相关研究奠定了基础。

基于网络药理学及分子对接技术探讨大果木姜子挥发油抑菌作用机制

目的:旨在以网络药理学方法和分子对接技术为基础,对大果木姜子挥发油抑菌的主要有效成分和潜在作用机制进行探究。方法:通过TCMSP、CNKI等数据库检索大果木姜子挥发油的化学成分,并预测大果木姜子挥发油和抑菌有关靶点;构建“有效成分-目标靶点”网络;共有靶点被用于GO和KEGG富集分析以及分子对接,预测有效成分与重点目标靶点的结合度。结果:获得大果木姜子挥发油化学成分9个、相关靶点151个,与抑菌的共有靶点54个,参与癌症的途径、IL-17信号通路等信号通路;分子对接结果显示核心成分7,8-环氧-α-紫罗兰酮与PTGS2、Thymol与ALB有较高的结合活性。结论:大果木姜子挥发油可能通过7,8-环氧-α-紫罗兰酮、百里香酚等成分与靶点结合,参与癌症、炎症等相关信号通路起到抑菌作用。

基于网络药理学-分子对接技术探讨高粱泡叶抗炎作用的分子机制

目的:本研究旨在采用网络药理学与分子对接技术,揭示高粱泡叶在抗炎治疗中的潜在作用机制。方法:通过网络药理学数据库筛选识别出高粱泡叶关联的抗炎靶点,并进行蛋白互作网络(PPI)、基因本体论(GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析;同时,利用Autodock软件对关键靶点进行分子对接模拟。结果:从高粱泡叶中鉴定了30种活性成分,涉及493个潜在靶点和2004个疾病相关靶点,其中直接参与抗炎治疗的核心靶点共计131个,如IL-6、TNF-α、IL-1β、ALB、AKT1、EGFR、SRC、TP53、ATAT3、PTGS2等。GO功能富集与KEGG通路分析表明,高粱泡叶抗炎效应可能与PI3K-AKT信号通路、MAPK信号传导途径以及cAMP信号通路在内的170条生物通路密切相关。分子对接实验证实这些主要活性成分与相应靶蛋白间具有良好的结合亲和力。结论:高粱泡叶可能通过多种成分、多靶点、多信号通路发挥抗炎作用与机制,为深入研究高粱泡叶及其活性成分抗炎的作用机制提供实验依据和理论参考。

苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响

目的:研究苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位(CADF)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响,探讨CADF抗RA的作用机制。方法:将MH7A细胞分为空白组、TNF-α模型组、甲氨蝶呤组(阳性对照,20 mg/L)和CADF不同质量浓度组(50、100、200、400 mg/L),除空白组外,其余各组均以50μg/L TNF-α刺激活化MH7A细胞。以TNF-α与相应药物的混合液共同作用24 h后,检测细胞的增殖情况和培养液中一氧化氮(NO)、前列腺素E_2(PGE_2)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量。结果:与空白组比较,TNF-α模型组细胞增殖活性显著增强(P<0.01),培养液中NO、PGE2、IL-1β、IL-6含量显著增加(P<0.01);与TNF-α模型组比较,各给药组细胞的增殖均受到显著抑制(P<0.05或P<0.01),培养液中NO、PGE2、IL-1β、IL-6含量均显著减少(P<0.01),且与CADF具有一定的量效关系。结论:CADF可通过抑制TNF-α诱导的MH7A细胞增殖,减少炎症因子NO、PGE2、IL-1β、IL-6的分泌,从而发挥其抗RA的作用。

苗药了哥王不同炮制品乙醇提取物对小鼠的急性毒性作用比较

目的:比较苗药了哥王生品、不同炮制品乙醇提取物对小鼠的急性毒性,为了哥王汗渍法炮制工艺优选及其安全用药提供依据。方法:采用汗渍法对了哥王的饮片炮制30d得炮制品一,对了哥王粗粉分别炮制14、7d得炮制品二和炮制品三。以70%乙醇为溶剂,采用渗漉法对了哥王生品及不同炮制品进行提取,并对不同乙醇提取物进行小鼠急性毒性实验。结果:了哥王生品、炮制品一乙醇提取物的半数致死量(LD_(50))分别为4.05、6.65 g/kg,相当于临床70kg成人日用量的19、32倍。而了哥王炮制品二、炮制品三乙醇提取物的LD50无法测出;最大耐受量(MTD)分别为20.0、15.0 g/kg,相当于临床70 kg成人日用量的95、71倍;最大给药量(MLD)分别近似为30.0、20.0 g/kg,相当于临床70kg成人日用量的143、95倍。结论:了哥王炮制品的毒性明显低于生品,且了歌王粗粉炮制14d后毒性低于炮制7d。

苗药黑骨藤石油醚部位化学成分研究

目的:研究苗药黑骨藤石油醚部位的化学成分。方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱色谱以及重结晶等方法分离纯化,运用波谱分析技术并结合文献鉴定化合物结构。结果:从苗药黑骨藤石油醚部位分离鉴定得到11个化合物,分别为:丁酰鲸鱼醇(1)、tirucalla-7,23,25-trien-3β-ol(2)、24,24-dimethyl-9,19-cyclolanostan-3β-ol(3)、β-谷甾醇棕榈酸酯(4)、羽扇豆醇乙酸酯(5)、环阿屯-25-烯-3β,24-二醇(6)、熊果酸(7)、常春藤皂苷元(8)、β-香树脂醇乙酸酯(9)、β-谷甾醇(10)、油酸(11)。结论:其中,化合物1～6为首次从该植物中分离得到,化合物1～4为首次从该属植物中分离得到。

苗药大果木姜子总黄酮与糖类成分含量测定

[目的]建立测定大果木姜子中总黄酮、总糖、还原糖、多糖含量的方法。[方法]以芦丁和葡萄糖为对照品,采用紫外分光光度计测定大果木姜子中总黄酮、总糖、还原糖、多糖的含量并进行方法学考察。[结果]大果木姜子中总黄酮含量为(8.02±0.19)mg/g,总糖含量为(35.26±0.96)%,还原糖含量为(4.78±0.95)%,多糖含量为(30.53±0.69)%。[结论]该方法快速、简便、准确,可以用于大果木姜子中总黄酮、总糖、还原糖、多糖的含量测定。

苗药艾纳香糖类成分的含量测定

目的考察不同产地艾纳香中糖类成分的含量。方法采用紫外可见分光光度计进行艾纳香糖类成分的含量测定。结果不同产地艾纳香所得的总糖、还原糖和多糖的含量差别不大,2号和6号产地的含糖量相对较高。结论贵州红水河所栽培的艾纳香含糖量相对较高,其他产地的没有明显区别。采用上述分析方法简便快速可靠,为建立艾纳香的多指标质量评价体系提供了科学参考。

苗药芭蕉根化学成分研究

目的:研究芭蕉根的化学成分。方法:采用大孔吸附树脂、硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱等多种色谱技术进行分离纯化,通过波谱数据鉴定化合物结构。结果:从芭蕉根70%乙醇提取物中分离鉴定得到15个化合物,分别为:(1R*,2S*,3R*)-2,3-dihydro-1,2,3-trihydroxy-4-(4′-methoxyphenyl)-1H-phenalene(1)、4-hydroxy-2-methoxy-9-phenyl-1H-phenalen-1-one(2)、trans-(1S,2S)-3-(4′-methoxyphenyl)-acenaphthene-1,2-diol(3)、(4E,6E)-1,7-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)hepta-4,6-dien-3-one(4)、irenolone(5)、bis-demethoxycurcumin(6)、rel-(3S,4aR,10bR)-8-hydroxy-3-(4-hydroxyphenyl)-9-methoxy-4a,5,6,10b-tetrahydro-3H-naphtho[2,1-b]pyran(7)、cis-3-phenyl-acenaphthene-1,2-diol(8)、2-methoxy-9-phenyl-phenalen-l-one(9)、bis-(2-ethylhexyl)terephthalate(10)、胡萝卜苷(11)、2-(4-methoxyphenyl)naphthalene-1,8-dicarboxylic anhydride(12)、lasiodiplodin(13)、4′-dehydroxy-irenolone(14)、2-hydroxy-4-(p-methoxyphenyl)-phenalen-1-one(15)。结论:其中,化合物4、6、10、13为首次从芭蕉科植物中分离得到,化合物3为首次从芭蕉属植物中分离得到,化合物1、2、7、9、12、15为首次从该植物中分离得到。

苗药黑骨藤不同极性提取部位急性毒性及抗氧化研究

[目的]对黑骨藤不同极性部位进行急性毒性试验及抗氧化研究,确定其临床用药安全性及活性部位。[方法]急性经口毒性试验采用SD(180～220 g)大鼠,连续灌胃给药7 d(9.75 g/kg)后,测定血清中的肝功能和肾功能等相关指标,观察其肝脏、肾脏毒性反应,采用ABTS(agreement of basic telecommunications services)法测定肝脏中的总抗氧化能力。[结果]黑骨藤不同极性部位给药7 d后,大鼠未出现死亡,石油醚部位、氯仿部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位组对肝脏和肾脏生化指标均无显著性影响(P>0.05),水部位组大鼠血清中的ALP和BUN显著升高(P<0.05)。[结论]黑骨藤的不同极性部位中的石油醚部位、氯仿部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位未出现毒性反应,水部位中的ALP和BUN升高,可能表现出微低毒性。氯仿部位和正丁醇部位表现出较强的抗氧化能力。

苗药透骨香的质量标准研究

目的:建立透骨香药材的质量标准。方法:采用薄层色谱法(TLC)对药材进行定性鉴别;测定药材水分、总灰分和酸不溶性灰分;采用高效液相色谱法测定药材中水杨酸甲酯的含量:色谱柱为Eclipse XDB-C18,流动相为甲醇-水(62∶38,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为307 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:药材的TLC图斑点清晰,分离度好。药材水分为8.2%~10.8%,总灰分为0.9%~4.0%,酸不溶性灰分为0.1%~0.9%。水杨酸甲酯检测进样量线性范围为0.045~0.73μg(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.0%;水杨酸甲酯加样回收率为97.8%~104.3%(RSD=2.6%,n=9)。结论:该研究所建标准可用于透骨香药材的质量控制。

苗药消疤草抗肝纤维化活性成分研究

目的:明确苗药消疤草(地锦苗)抗肝纤维化的物质基础。方法:采用溶剂萃取结合酸碱处理法将消疤草提取物分为石油醚萃取(P)、乙酸乙酯并三氯甲烷萃取(C)、三氯甲烷萃取后乙酸乙酯部位(EE)以及正丁醇萃取(B)四个组分,以人肝星状细胞株HSC-LX2作为模型,用MTT法检测各组分对HSC-LX2细胞增殖的影响,筛选出活性组分;以硅胶、MCI、Sephadex LH-20柱层析和半制备HPLC等色谱技术对活性组分进行分离纯化,根据各种波谱学技术对化合物进行结构鉴定,并通过MTT法评价化合物的抗肝纤维化活性。结果:组分EE和C分别在31和15μg/mL时有显著的抗肝纤维化活性,从这两个组分中分离并鉴定了8个化合物,分别为:原阿片碱(1)、β-卡波林(2)、降氧化北美黄连次碱(3)、对乙氧基乙酰苯胺(4)、3-亚乙基-2-吡咯烷酮(5)、(6S,7E)-6-hydroxy-4,7-megastigmadien-3,9-dione(6)、macleayin E(7)、2-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3-[N-2-(4-羟基苯基)乙基]氨基甲酰-5-[N-2-(4-羟基苯基)乙基]氨基甲酰乙烯基-7-甲氧基苯并二氢呋喃(8)。其中,化合物1、2、3、6、7和8具有抗肝纤维化活性,且化合物1、7、8在较低浓度下亦具有明显的活性。结论:组分EE和C是消疤草抗肝纤维化的有效组分;化合物2~8为首次从该植物中分离得到,化合物1、7、8是消疤草抗肝纤维化的主要物质基础。

苗药朱砂根的HPLC指纹图谱研究

目的:建立苗药朱砂根的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:采用HPLC法。色谱柱为Diamonsil C_(18),流动相为甲醇-水(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为220 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以11-O-(3′,4′,5′-三羟基没食子酰基)-岩白菜素为参照,测定16批药材样品的HPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)进行共有峰指认和相似度评价,并就指纹图谱进行聚类分析。结果:16批朱砂根药材的HPLC图谱有6个共有峰,其中8批药材样品的相似度均>0.9;16批朱砂根药材可聚为4类。结论:该研究所建指纹图谱可为朱砂根药材的鉴别和质量评价提供参考。

苗药黑骨藤多指标的含量测定及聚类分析

目的:建立同时测定苗药黑骨藤中绿原酸和杠柳毒苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Xtimate C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为220 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。采用SPSS 23.0统计软件根据药材样品中绿原酸和杠柳毒苷的含量进行聚类分析。结果:绿原酸、杠柳毒苷检测进样量线性范围分别为0.040 6~1.8μg(r=0.999 4)、0.016 8~2.3μg(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于5.0%;定量限分别为0.918 0、0.084 3μg/mL,检测限分别为0.102 0、0.025 3μg/mL;加样回收率分别为102.66%~104.00%(RSD=0.53%,n=6)、96.44%~100.79%(RSD=1.73%,n=6);耐用性试验的RSD均小于3.0%。18份药材样品可聚为三大类,即S2、S4、S10、S12、S14~S18聚为一类,S1、S3、S5~S7、S9、S11、S13聚为一类,S8为一类。结论:该方法可用于黑骨藤药材的质量控制和品质评价;不同产地黑骨藤药材中绿原酸和杠柳毒苷的含量有较大差异,各成分含量与产地有一定关联。

苗药了哥王“汗渍法”炮制前后抗小鼠免疫性炎症的“量-效-毒”关系研究

目的:探讨苗药了哥王炮制前后抗小鼠免疫性炎症的"量-效-毒"关系。方法:将小鼠分成空白组、模型组、了哥王生品醇提物1~6组、了哥王"汗渍法"炮制品醇提物1~6组(以下分别简称为"生品1~6组""炮制品1~6组",剂量均分别为0.13、0.20、0.26、0.52、1.04、2.6 g/kg)和阳性组(环磷酰胺,36.4 mg/kg),每组10只。除空白组外,其余各组小鼠均以1%2,4-二硝基氟苯-丙酮-麻油混合溶液复制迟发型超敏反应模型。造模后,空白组和模型组小鼠均灌胃等容1.0%羧甲基纤维素钠溶液,各给药组小鼠灌胃相应药液20 mL/kg,每日1次,连续5 d。末次给药后,记录各组小鼠耳肿胀度,并计算生品及炮制品的肿胀抑制率、半数有效剂量(ED50)及其95%置信区间(CI);称定小鼠心、肝、脾、肺、肾的质量,并计算各脏器指数;采用酶联免疫吸附测定法、改良化学氧化法分别检测小鼠血清中炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)]和肝肾功能指标[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、尿素氮(BUN)、血肌酐(CREA)]水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠耳肿胀度显著升高(P<0.05);与模型组比较,了哥王生药及炮制品醇提物各剂量组小鼠耳肿胀度均显著降低(P<0.05),其肿胀抑制率均有随剂量增加而升高的趋势,两者抗小鼠迟发型超敏反应耳肿胀的ED50及95%CI分别为0.2396(0.1290,0.4452)g/kg、0.1473(0.0768,0.2827)g/kg。与空白组比较,模型组小鼠肝指数、血清TNF-α水平均显著升高,肺指数、血清IL-10水平均显著降低(P<0.05);与模型组比较,不同给药组小鼠肝指数(阳性组、生品3组和炮制品1~6组)、血清TNF-α水平(阳性组、生品1~3组及炮制品1~4组)均显著降低,肺指数(阳性组、生品3~6组及炮制品3~6组)、血清IL-10水平(生品1、2、4、5组以及炮制品2~6组)以及ALT、AST、BUN、CREA水平(生品4~6组)和TBIL水平(生品3~6组)均显著升高(P<0.05)。结论:了哥王生品醇提物具有一定的抗免疫炎症活性,且对小鼠具有肝肾毒性,呈一定的"量-效-毒"关系;炮制品醇提物也具有一定的抗免疫炎症活性,但肝肾毒性弱于生品。"汗渍法"具有"存效减毒"的效果。

经皮给药系统促渗新技术新方法的研究进展

经皮给药可以避免口服给药后的胃肠道消化反应和肝脏首过效应、注射给药引起的疼痛,具有简、便、效、廉的特点,受到越来越多人的关注。但经皮给药吸收效率低的问题阻碍了经皮药物的广泛应用。通过查阅相关文献发现,近年来纳米载体促渗、中药挥发油促渗、物理促渗新方法新技术,为提高经皮给药制剂的开发提供了新策略。重点从这3个方面进行归纳总结并分析存在的问题,以期为经皮给药的制剂开发提供借鉴和参考。

苗药了哥王不同部位提取物的肾毒性研究

目的研究苗药了哥王不同部位提取物对健康大鼠的肾毒性作用,为了哥王的毒性作用机制及临床用药提供参考。方法以70%乙醇为溶剂,采用渗漉法提取,得了哥王乙醇总提取物;将上述提取物用水分散后,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得相应部位提取物,剩余为水部位提取物。将SD大鼠随机分为乙醇总提取物组、石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、正丁醇部位组、水部位组和空白组,每组12只(雌雄各半)。给药组大鼠灌胃相应剂量的药液(乙醇总提取物317.520 mg/kg、石油醚部位7.875 mg/kg、乙酸乙酯部位78.435 mg/kg、正丁醇部位53.865 mg/kg、水部位76.545 mg/kg),每天1次,连续给药2周,再停药恢复2周;空白组大鼠灌胃等体积1.0%羧甲基纤维素钠溶液。实验期间观察大鼠的一般情况,取尿液(第14、28天)、血清和双肾组织(第15、29天),计算其肾脏指数,检测血清和尿液中的肾功能指标水平并观察肾组织的病理形态学变化。结果给药期间,与空白组比较,乙醇总提取物组、乙酸乙酯部位组大鼠出现精神萎靡、活动量和饮食量减少、大便稀薄、体质量下降等中毒行为活动特征;石油醚部位组、正丁醇部位组和水部位组大鼠精神状态较空白组稍差,活动量和饮食量稍减少,大便稀薄,体质量增长缓慢;但各组大鼠肛温无较大变化。给药2周后,乙醇总提取物组大鼠的肾脏指数,乙醇总提取物组、乙酸乙酯部位组大鼠血清中N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平,正丁醇部位组大鼠血清中NAG水平,水部位组大鼠血清中Cr水平,以及乙醇总提取物组、石油醚部位组大鼠尿液中NAG水平,乙酸乙酯部位组大鼠尿液中NAG、尿蛋白水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);在病理形态学观察中,乙醇总提取物组、石油醚部位组和乙酸乙酯部位组大鼠有不同程度的肾小管结构不清、细胞肿胀、少数细胞坏死,伴有肾小球固缩、肾小管硬化、炎症细胞浸润。停药后,大鼠以上症状逐渐好转,精神状态有明显改善,活动量和饮食量增加,大便趋于正常。停药恢复2周后,各给药组大鼠血清和尿液中上述指标水平均恢复至与空白组接近(P>0.05);各给药组大鼠的肾小球结构逐渐恢复清晰,乙醇总提取物组、石油醚部位组和乙酸乙酯部位组大鼠少见细胞肿胀和炎症细胞浸润。结论苗药了哥王乙醇总提取物、石油醚部位和乙酸乙酯部位均具有一定的肾毒性,且具有一定的可逆性。其毒性成分可能为脂溶性成分。

苗药了哥王提取物对斑马鱼的毒性作用

目的研究苗药了哥王提取物对斑马鱼的毒性作用。方法以斑马鱼胚胎模型为对象,经10、20、40μg/mL了哥王提取物暴露处理后,检测并记录1 min内自主抽动次数、10 s内心率及其畸形、死亡发生情况;以斑马鱼模型为对象,经10~100μg/mL了哥王提取物暴露处理24、48、72 h后,计算各时间点了哥王提取物对斑马鱼的半数致死浓度(LC50);经低、中、高质量浓度(27、37、51μg/mL)了哥王提取物暴露处理后,观察斑马鱼肝脏表型和细胞凋亡、脂质沉积情况,检测其肝组织中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果与空白组比较,了哥王提取物10、20、40μg/mL组斑马鱼胚胎的自主抽动次数、畸形率(10μg/mL组除外)、死亡率均显著升高,胚胎心率(10、20μg/mL组除外)均显著降低(P<0.05);了哥王提取物干预24、48、72 h对斑马鱼的LC50分别为39.850、28.300、21.490μg/mL;了哥王提取物低、中、高质量浓度组斑马鱼的肝脏区域透明度降低、形态膨大,细胞凋亡和脂质沉积均有所增加,肝组织中ALT、AST、LDH活性均较空白组显著升高(P<0.05)。结论了哥王提取物对斑马鱼胚胎具有发育毒性,对斑马鱼具有肝损伤毒性。

基于网络药理学和分子对接探讨苗药黑骨藤治疗阿尔茨海默病的作用机制

目的运用网络药理学及分子对接技术,探究苗药黑骨藤治疗阿尔茨海默病(AD)的活性成分和潜在作用机制。方法通过文献搜集苗药黑骨藤的化学成分,利用中药系统药理学数据库(TCMSP)和Swiss ADME数据库筛选黑骨藤的主要活性成分,采用Swiss Target Prediction和SEA数据库预测活性成分的作用靶点。通过GeneCards、OMIM数据库检索AD相关靶点,经Venny2.1.0获取成分-疾病交集靶点,结合STRING数据库和Cytoscape3.8.0软件对交集靶点进行蛋白互作(PPI)网络分析。再借助HIPLOT数据库对交集靶点进行基因本体(GO)分析和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。最后,利用AutoDock Tools1.5.6软件将潜在成分与核心靶点进行分子对接。结果苗药黑骨藤的活性成分共24个,对应靶点574个,1513个AD靶点,交集靶点159个;GO分析得到2661条生物过程,587条分子功能,311条细胞成分;KEGG分析得到AD主要参与神经退行性疾病-多发性疾病途径、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、癌症中的蛋白多糖等相关通路。分子对接结果显示,山柰酚、槲皮素、汉黄芩素、丹参酮ⅡA、杠柳苷元等与类固醇受体辅助活化因子(SRC)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)3、血管内皮生长因子(VEGF)A蛋白等具有较强结合能力。结论通过成分-靶点-通路网络及分子对接验证,筛选出黑骨藤抗AD的有效成分,并探究其抗AD作用机制,为苗药黑骨藤抗AD的新药开发和应用提供思路和理论依据。