多功能蛋白质稳定性分析仪在人纤维蛋白原制品质量控制中的应用

目的采用多功能蛋白质稳定性分析仪测定人纤维蛋白原制品热稳定性,并将稳定性结果与纯度结果进行相关性分析。方法采用多功能蛋白质稳定性分析仪对全国7家企业共21批样品进行测定,同时采用全自动凯氏定氮仪对产品纯度进行测定,将二者数据进行相关性分析,并采用高效分子排阻色谱-多角度激光光散射法测定纯度最高与最低产品的组分分布。结果7家企业的产品热稳定性相差较大,蛋白质热变性中点温度(T m值)为51.20~53.31℃;21批样品纯度80.3%~95.9%;产品纯度与T m值显著相关,相关系数0.729,P<0.05;企业F产品热稳定性最好,寡聚物少,纯度最高;企业A产品热稳定性最差,寡聚物多,纯度最低。结论多功能蛋白质稳定性分析仪可以测定产品纯度与稳定性,为人纤维蛋白原产品保护剂的筛选和生产工艺优化提供相应数据参考,且能对不同企业产品的质量进行初步分析,仪器操作简便,检测时间短,检测效率高。

胃蛋白酶片质量分析及探索性研究

目的:评价国内不同企业生产的胃蛋白酶片的质量,并从溶出曲线、纯度、比活力等方面进行探索性研究,为企业提高产品质量提供改进方法。方法:采用4种溶出介质考察各企业产品的溶出行为;采用HPLC法,以1.7 mol·L^-1硫酸铵磷酸盐缓冲液(pH 7.0)为流动相,梯度洗脱的方法测定胃蛋白酶片的纯度,并与SDS-PAGE蛋白电泳进行比对;采用蛋白质测定法与效价测定法对比活力进行研究。结果:(1)53批样品中,溶出度最大值为112%,最小值为28%;(2)HPLC结果与SDS-PAGE电泳结果显示胃蛋白酶为多组分物质;(3)原料比活力为12.2~13.2 U·mg-1蛋白,片剂比活力为8.0~15.3 U·mg-1蛋白。结论:胃蛋白酶片现行质量标准安全性和有效性指标控制不足,建议企业加强药品生产全过程风险管理,降低产品批次间的差异,进一步提高制剂工艺的稳定性。本文为全面评价胃蛋白酶片的质量和完善其质量标准提供借鉴和参考。

高效液相色谱法检测乙酰半胱氨酸原料药中有关物质

目的建立检测乙酰半胱氨酸原料药中L-胱氨酸、L-半胱氨酸、N,N’-二乙酰-L-胱氨酸、N,S-二乙酰-L-胱氨酸4种已知杂质及其他未知杂质的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱为Thermo ODS Hypersil C_(18)柱(250 mm×4.0 mm,5μm),流动相为水(用磷酸调pH至3.0)-乙腈(97∶3,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为220 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果 L-胱氨酸、L-半胱氨酸、N,N’-二乙酰-L-胱氨酸、N,S-二乙酰-L-胱氨酸的进样量分别在80.32~2 409.59 ng、81.58~2 447.38 ng、83.84~2 515.20 ng、80.64~2 419.20 ng范围内与峰面积线性关系良好;检测限分别为5.04,8.64,3.70,5.69 ng,定量限分别为60.48,28.80,12.32,18.96 ng;精密度试验的RSD均小于2.0%(n=6);供试品溶液稳定性不好,需临用现配;平均加样回收率分别为101.03%,93.90%,98.23%,97.96%,RSD分别为5.21%,3.34%,4.91%,5.65%(n=6)。结论该方法灵敏度高,准确度和重复性均较好,可用于检测乙酰半胱氨酸原料药中有关物质。

静注人免疫球蛋白质量评价与研究

目的评价国内上市不同企业生产的静注人免疫球蛋白(pH4)的质量状况及发现存在的问题。方法对20家生产企业115批次静注人免疫球蛋白(pH4)依据法定质量标准进行检验。同时开展了不良反应影响因素(IgA残留量、促凝血物质残留)、病毒残留风险及Fc段生物学活性等3个方面的探索性研究。对检验及探索性研究所得的结果进行统计分析,综合评价静注人免疫球蛋白(pH4)的质量现状。结果 115批样品合格率为100.0%。IgA含量分布为(1~571)μg·mL;,活化的人凝血因子Ⅺ(FⅪa)活性分布为(0.4~120.7) mIU·mL;,不同企业产品的IgA含量与FⅪa活性差异较大。59批样品Fc活性结果分布78%~319%,均高于药典要求的60%的限度。115批样品均无艾滋病毒、乙肝病毒、丙肝病毒及人细小病毒B19残留。结论本品的总体质量状况较好。但不同企业间产品的IgA残留量、FⅪa活性、抗补体活性及Fc段生物活性等指标上有较大差异,不同企业间产品质量仍有一定的差距。质量标准可进一步完善,可增订IgA含量项。企业应定期对产品开展Fc段生物学活性检测。