七氟烷对胶质瘤U87细胞侵袭能力的影响及机制研究

目的探讨七氟烷对U87细胞侵袭能力的影响及机制。方法于2022年9月—2023年6月,采用徐州医科大学麻醉学实验室提供的U87细胞培养至对数生长期。Transwell实验取对数生长期细胞分成8份,然后随机分为对照(Con)组和七氟烷(Sev)组,每组4份进行平行实验。培养的细胞置于麻醉箱内,七氟烷组通载体气体和1.4%七氟烷4 h,对照组只通载体气体,观察七氟烷对U87细胞侵袭能力的影响;免疫印迹实验取对数生长期细胞分成12份,然后随机分为对照组,七氟烷2 h组和七氟烷4 h组,每组4份进行平行实验,观察七氟烷对pERK1/2、ERK1/2表达水平的影响;细胞免疫荧光化学实验取对数生长期细胞分成8份,然后随机分为对照组和七氟烷组(4 h),每组4份进行平行实验,检测七氟烷对pERK1/2、Nrf2在细胞分布的影响。结果与对照组相比,七氟烷组U87细胞穿过微孔膜的数目减少[Con组(100.000±0.000)%,Sev组(34.180±3.342)%],差异有统计学意义(t=16.697,P<0.05)。与对照组相比,七氟烷组pERK1/2的灰度值下降[Con组(100.000±0.000)%,Sev2 h组(0.196±0.028)%,Sev4 h组(0.073±0.025)%],差异有统计学意义(F=546.886,P<0.05),且核内pERK1/2[Con组(21.903±1.776)%,Sev组(8.412±0.367)%]及核内Nrf2表达水平均显著下降[Con组(18.083±0.788)%,Sev组(12.315±1.604)%],差异有统计学意义(t=7.438、3.228,P均<0.05)。结论七氟烷通过抑制ERK1/2-Nrf2信号通路抑制人胶质细胞瘤U87侵袭能力。

异氟烷抑制星形胶质细胞葡萄糖摄取

本文探讨了异氟烷对星形胶质细胞葡萄糖摄取的影响,应用培养的大鼠星形胶质细胞,通过免疫荧光观察异氟烷对星形胶质细胞结构的影响;利用6-NBDG检测异氟烷对星形胶质细胞葡萄糖吸收影响;通过RT-PCR和免疫印迹检测葡萄糖转运体的变化。与对照组相比,异氟烷诱导GFAP向细胞膜处聚集,抑制星形胶质细胞葡萄糖摄取及GLuT1的表达。异氟烷可以通过抑制星形胶质细胞葡萄糖转运体的表达,抑制葡萄糖摄取。

异氟烷短期内可逆的抑制星形胶质细胞葡萄糖摄取

本文主要探讨了异氟烷处理后复灌对星形胶质细胞葡萄糖吸收的影响。利用培养的大鼠星形胶质细胞,2%异氟烷孵育6h,分别复灌24h、48h、72h,观察星形胶质细胞的形态;利用CCK-8试剂盒检测星形胶质细胞活性;加入荧光标记6-NBDG,观察星形胶质细胞葡萄糖吸收的变化;运用RT-PCR检测葡萄糖转运体GLuT1的变化。实验结果表明,异氟烷处理后复灌的星形胶质细胞形态无明显差别,细胞活性均不受影响;复灌24h葡萄糖摄取受抑制,48h恢复;复灌24h的GLuT1 mRNA水平降低,48h恢复;异氟烷可抑制星形胶质细胞葡萄糖转运体的表达并导致葡萄糖摄取障碍,但在短期可逆转。