鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型在中药研究中应用方法探讨

本文对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型 (鸡胚CAM )进行改良 ,尝试用中药血清药理学方法、组织匀浆、中药多糖及生药等给药方式 ,将本血管活性整体模型引入中医药研究中。

早孕蜕膜组织血管内皮细胞的分离与培养

我们成功地建立了应用荆豆素-Ⅰ标记的磁珠(UEA-I-Dynabeads)分离纯化早孕蜕膜组织血管内皮细胞的新技术。荆豆素-Ⅰ型可特异性地与血管内皮细胞膜表面糖蛋白上的岩藻糖基结合,用胶原酶和胰蛋白酶消化蜕膜组织成单细胞悬液,其内皮细胞阳性率在2%左右,经UEA-I-Dynabeads 纯化后,内皮细胞纯度可达90%以上并试培养成功。实验证明此项细胞分离新技术简单、快速且有效,为进一步研究血管内皮细胞的功能与作用打下了良好的基础。

精浆聚集素在大鼠体内分布的免疫组织化学研究

用免疫组织化学ＡＢＣ法对精浆聚集素（ｓｅｍｉｎａｌｃｌｕｓｔｅｒｉｎ，ＳＣ）在大鼠体内分布进行了研究。结果表明，ＳＣ在附睾的分布因区域不同而异，附睾头起始段上皮无ＳＣ免疫反应性，自中段至附睾体的上皮细胞则表现为强ＳＣ免疫反应性；在附睾尾，阳性反应物质主要集中在管腔内精子和上皮表面静纤毛，而胞质顶部仅显示少量ＳＣ反应物。在肾远曲小管上皮细胞、小肠绒毛上皮的杯状细胞以及间质中巨噬细胞，肝血窦的星状细胞、脾白髓中巨噬细胞、肺间质中的巨噬细胞以及大脑脑室脉络膜上皮细胞均有ＳＣ免疫反应性。在女性生殖系统中，输卵管和子宫上皮为阳性，卵巢中初级和次级卵泡中的卵细胞呈强阳性；黄体细胞弱阳性；心肌、骨骼肌及内脏（子宫）平滑肌均为阴性。以上结果表明：ＳＣ并非睾丸的一种特异性蛋白，它在大鼠体内分布广泛。

补肾生血中药血管生成活性整体效应的初步探讨

以鸡胚绒毛尿囊膜模型(鸡胚CAM)用中药血清药理学方法,研究补肾生血中药对血管生成活性的影响,并用IPP计算机图像处理系统分析新生血管。结果表明,补肾生血中药含药血清可促进鸡胚CAM的血管增加,并以细小血管为主,这符合新生血管特征。提示补肾生血中药有促进血管生成和血管生成活性样作用。提出中医肾生髓理论可能与血脉生成有关,补肾生血与血脉生成的关系值得探讨。

IGF-Ⅰ及其受体、IGF结合蛋白-2和LH受体mRNA在卵泡中的表达

利用原位杂交和原位DNA－3’末端标记的方法研究了胰岛素样生长因子河（IG－I）、IGF－I受体、IGF结合蛋白－2、和促性腺激素受体的信使核糖核酸（mRNA）在不同生长与闭锁阶段的大鼠卵巢卵泡中表达的变化。结果表明：IGF－I主要在正常生长的初级卵泡、窦前卵泡和小窦状卵泡中表达。在各生长与成熟阶段的卵泡中都检测到IGF－I受体mRNA，闭锁卵泡的IGF－I受体表达降低。窦前与窦状的生长和闭锁卵泡均表达IGFBP－2。促卵泡激素（FSH）受体在窦前和小窦状卵泡的表达水平比其在大卵泡中的高。窦前与小窦状卵泡仅在膜细胞中表达黄体生成素（LH）受体mRNA，大卵泡的膜细胞与颗粒细胞均表达LH受体，在闭锁卵泡中仅在膜细胞中观察到LH受体的信号。综上结果，提示IGF－I，IGF－I受体和FSH受体在窦前和小窦状卵泡中的协同表达对卵泡的早期发育有重要作用。LH受体mRNA特异地在大卵泡的颗粒细胞中表达可能与优势卵泡选择相关。

释放左旋十八甲基炔诺酮宫内节育器对子宫内膜DNA含量的影响

为了研究释放左旋十八甲基炔诺酮（２０μｇ／天）宫内节育器（ＬＮＧ－ＩＵＤ－２０）对子宫内膜细胞ＤＮＡ含量的影响。将置器后子宫内膜剪碎后涂片，Ｆｅｕｌｇｅｎ染色，用显微分光光度计测量内膜单细胞核ＤＮＡ含量。结果显示，放置ＩＵＤ后内膜细胞ＤＮＡ含量显著下降（Ｐ＜０．００１）。鉴于低释放量的（２μｇ／天）ＬＮＧ－ＩＵＤ（ＬＮＧ－ＩＵＤ－２）并不影响内膜细胞的ＤＮＡ含量。认为，ＬＮＧ－ＩＵＤ对内膜增殖活性的影响同释放量密切相关。