艾滋病疫苗研究进展

艾滋病自20世纪80年代被发现以来,给人类健康带来了极大威胁,但是迄今为止仍未有相关疫苗上市。高效抗逆转录病毒疗法使得艾滋病成为一种慢性疾病,但由于潜在病毒库的存在,患者体内HIV病毒无法完全清除。因此,研制一款有效的艾滋病疫苗来预防疾病的需求愈发迫切。本文将对HIV疫苗的主要类型、难点及新的疫苗研究方向作一综述。

水包油型乳剂作为佐剂的研究进展

随着现代生物技术的发展,重组蛋白疫苗、合成肽疫苗等新型疫苗不断涌现,迫切需要安全有效的佐剂来增强其免疫原性。水包油型乳剂是新型佐剂中的一个研发热点,如MF59和AS03已在欧盟和美国获批用于人用疫苗,且均被证实具有良好的效果和可靠的安全性。此文就水包油型佐剂的研究进展做一综述,以期为开发高效、低毒的新型佐剂提供参考。

单磷酸脂质A(MPLA)pH敏感脂质体制备及免疫增强作用研究

目的制备pH敏感脂质体,避免溶酶体对单磷酸脂质A(monophosphoryl lipid A,MPLA)的降解,提高MPLA的利用率。方法以DOPE、CHEMS为载体材料,采用薄膜分散法制备pH敏感脂质体。应用动态光散射仪测定脂质体的粒径及Zeta电位,透射电镜观察不同pH值条件下pH敏感脂质体的外观形态,应用流式细胞术评价THP-1、DC2.4细胞对脂质体的吞噬效果,激光共聚焦显微镜下观察脂质体与溶酶体的共定位情况。以乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)为模式抗原,配伍MPLA pH敏感脂质体免疫BALB/c小鼠,ELISA定量检测血清乙型肝炎表面抗体(anti-HBs)水平,ELISPOT检测小鼠脾淋巴细胞IFN-γ、IL-2斑点形成细胞数(spot forming cells,SFCs)。结果制备的pH敏感脂质体的平均粒径为(90.90±1.13)nm,多分散指数(polydispersity index,PDI)为0.076±0.013,Zeta电位为(-27.900±0.666)mV,随着溶液的pH值减小粒径明显增大,呈现不规则形态,具备显著的pH敏感性。THP-1细胞吞噬pH敏感荧光脂质体的吞噬率为10.40%,DC2.4细胞的吞噬率为12.40%,吞噬荧光脂质体的吞噬率分别为1.09%和0.28%。激光共聚焦显微镜观察到pH敏感荧光脂质体被THP-1细胞吞噬后,存在于细胞质中,而荧光脂质体存在于溶酶体中,MPLA pH敏感脂质体与MPLA脂质体比较可以显著提高小鼠细胞免疫应答水平,MPLA pH敏感脂质体组的IFN-γ和IL-2 SFCs水平均显著高于MPLA脂质体组(P<0.01)和无佐剂组(P<0.001)。结论pH敏感脂质体递送系统可以提高MPLA的利用率,使MPLA更好地发挥佐剂作用。

环化二核苷酸对鼻喷流感疫苗免疫增强作用初步评价

目的评价环化二核苷酸(cyclic dinucleotides,CDN)对鼻腔喷雾流感病毒裂解疫苗的免疫增强作用,探讨将CDN用作黏膜佐剂的可能性。方法不同CDN配伍H1N1流感裂解疫苗免疫小鼠,免疫剂量血凝素(hemagglutinin,HA)4.5 μg/只,CDN 10 μg/只,两针滴鼻免疫间隔21 d,末次免疫后21 d检测免疫原性指标,包括血清血凝抑制(hemagglutination inhibition,HI)抗体效价、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)sIgA效价及血清IgG效价,比较不同CDN的免疫增强作用;环二鸟苷酸(cyclic di-GMP,c-di-GMP)与壳聚糖(chitosan,CSN)分别配伍H1N1和H7N9流感裂解疫苗免疫小鼠,通过检测免疫原性指标,比较其对不同亚型流感病毒疫苗的免疫增强作用;c-di-GMP与CSN分别配伍H1N1流感疫苗,于末次免疫后21 d以10倍病毒半数致死量(median lethal dose,LD50)A/Puerto Rico/8/34(H1N1)流感毒株进行攻毒试验,连续14 d观察小鼠生存率的变化。结果3种CDN均能诱导较对照组更强的血清抗体、IgG、BALF sIgA和HI抗体阳转率;配伍H1N1和H7N9两种抗原,c-di-GMP与CSN佐剂组相比能诱导更高的血清HI、BALF sIgA水平;H1N1流感疫苗CDN免疫组和CSN佐剂组具有更高的攻毒保护率。结论CDN能增强流感抗原的免疫原性,且效果优于CSN佐剂。