STZ诱导的2型糖尿病大鼠心肌组织TRPC7的表达上调

目的:观察2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌组织损伤过程中,TRPC7的表达变化。方法:以高脂饲料喂养并辅以腹腔注射小剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)来建立T2DM大鼠模型,采用蛋白印迹及免疫组化染色方法检测TRPC7在T2DM大鼠心肌组织的表达变化。结果:1T2DM大鼠造模成功且T2DM大鼠心肌组织发生损伤性变化:与正常组大鼠相比,T2DM组大鼠血糖明显升高且体重显著降低(P<0.05);T2DM组大鼠心脏体积与质量显著减小(P<0.05);T2DM组大鼠心脏质量指数(heart weight index,HWI)明显高于正常组(P<0.05);2在T2DM大鼠心肌损伤过程中TRPC7表达上调:TRPC7在正常及T2DM大鼠心肌组织中均有表达,但与正常大鼠相比,T2DM大鼠心肌组织TRPC7蛋白的表达显著增高(P<0.05)。结论:首次证实在损伤的T2DM大鼠心肌组织中,TRPC7的表达显著上调。

乌司他丁对肠道上皮细胞屏障损伤的保护作用分析

目的探讨乌司他丁(UTI)对肠道上皮细胞屏障损伤的保护作用及其机制。方法培养Caco-2细胞,并建立肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的单层上皮细胞模型,随机分为空白对照组、TNF-α模型组、UTI低剂量组(5万U/kg)、UTI中剂量组(10万U/kg)、UTI高剂量组(20万U/kg)。采用Millicell电阻仪和多功能读板仪分别测定各组上皮细胞电阻(TER)和异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran),酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平,流式细胞仪测定细胞凋亡率,免疫蛋白质印记(Western blot)技术测定紧密连接蛋白闭合蛋白(occludin)和紧密黏连蛋白1(ZO-1)表达水平。结果与空白对照组相比,TNF-α模型组TER、FITC-dextran、occludin和ZO-1表达水平均明显下降,IL-6、IL-10、细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与TNF-α模型组比较,经UTI处理后,TER、FITC-dextran、occludin和ZO-1表达水平升高,IL-6、IL-10、细胞凋亡率降低(P<0.05),其中以UTI高剂量组变化最显著(P<0.05)。结论 UTI可能通过抑制炎性介质释放,调节紧密连接相关蛋白表达,抑制TNF-α诱导的肠道上皮细胞屏障功能损伤。

槲皮素对人肾癌细胞增殖、凋亡及stat3、survivin表达的影响

目的探讨槲皮素对人肾癌细胞增殖、凋亡及stat3、survivin表达的影响。方法在肾癌细胞体外培养的基础上，根据不同浓度槲皮素（20μmol／L、40μmol／L和80μmol／L）分别3组，即低、中、高浓度干预组；另设空白对照组。观察不同浓度的槲皮素对肾癌细胞增殖、凋亡及stat3、survivin的mRNA和蛋白表达的影响。采用MTT法检测槲皮素对细胞的毒性作用。用流式细胞仪检测细胞凋亡。Real Time PCR检测stag和survivin的mRNA表达，采用Western blot检测star3和survivin的蛋白表达。结果随作用时间延长和浓度增高，槲皮素对细胞增殖的抑制作用增强。各槲皮素干预组与空白对照组比较均具有统计学差异（P〈0．05）。在槲皮素作用48h时检测，槲皮素（20μmol／L）组细胞早期凋亡率为20．17％、槲皮素（40μmol／L）组细胞早期凋亡率为61．93％、槲皮素（80μmol／L）组细胞早期凋亡率为82．24％。各槲皮素干预组与空白对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。stat3与survivin mRNA之间呈直线相关关系（r=0．697，P=0．002），且磷酸化staG（p-staG）和survivin蛋白也呈直线相关关系（r=0．748，P=0．003）。结论槲皮素可抑制肾癌细胞的增殖，诱导细胞凋亡，下调stat3和survivin的mRNA和蛋白表达。

大黄素对高糖介导的大鼠NRK52E TSP1和TGF-β_1表达的影响

目的:探讨大黄素对高糖介导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,TSP1)和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)表达的影响。方法:在NRK52E体外培养的基础上,观察高糖(30mmol/L)诱导下低、中和高浓度的大黄素(10ug/ml、20ug/ml和40ug/ml)对NRK52E TSP1、TGF-β1的mRNA和蛋白表达的影响。采用Real Time PCR检测TSP1、TGF-β1mRNA表达,采用Western blot检测TSP1、TGF-β1蛋白表达。总TGF-β1和活性TGF-β1检测采用ELISA法。结果:与空白对照组比较,高糖(30mmol/L)明显上调了NRK52E TSP1的mRNA表达(3.34±0.18 vs 1.12±0.13;P<20.05)、伴有TGF-β1的mRNA表达增加(3.52±0.22 vs 1.24±0.09;P<20.05)。同时高糖(30mmol/L)也上调了TSP1蛋白表达(0.5184±0.0736 vs 0.1204±0.0376;P<20.01),伴有TGF-β1蛋白表达的增加(0.5698±0.0324 vs 0.1032±0.0322;P<20.01)。与高糖阳性对照组比较,中浓度和高浓度大黄素明显抑制了高糖(30mmol/L)诱导的TSP1、TGF-β1的mRNA(P<20.05;P<20.01)和蛋白表达(P<0.05;P<20.01)。中浓度大黄素干预组总的TGF-β1含量和活性TGF-β1含量均减少,(P<20.05);高浓度大黄素干预组总的TGF-β1含量和活性TGF-β1含量均明显减少(P<20.01)。结论:大黄素能抑制大鼠肾小管上皮细胞TSP1、TGF-β1的mRNA和蛋白表达,并下调总的和活性TGF-β1。

Six1在结肠癌组织高表达并增强结肠癌细胞侵袭能力

目的探讨同源异形框基因Six1(sine oculis homeobox homolog1)在结肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞侵袭能力的影响。方法免疫组织化学法检测90例结肠癌及癌旁正常组织中 Six1的蛋白阳性表达率。以Six1小分子干扰RNA(siRNA)沉默Six1,应用Transwell小室实验检测细胞侵袭力。结果Six1蛋白在结肠癌组织中的阳性表达率高于其在癌旁正常组织中的阳性表达率。沉默Six1后,Six1 mRNA和Six1蛋白表达水平显著降低,HT-29细胞穿膜细胞数也明显降低。结论Six1表达与结肠癌发展密切相关,抑制Six1的表达可抑制结肠癌细胞的侵袭能力。

KCNJ11基因多态与糖尿病前期人群运动干预敏感性的相关性研究

目的研究钾离子通道蛋白KCNJ11基因区的3个标签单核苷酸多态性位点(SNP),及其组成的单体型与糖尿病前期人群运动干预前后糖脂代谢相关指标变化的关系,探讨其作为糖代谢异常人群对运动干预敏感的分子标记。方法对70名糖尿病前期人群进行为期12周的有氧耐力运动干预,测定其干预前后糖脂代谢相关生化指标。采用MALDI-TOF MS方法解析受试者基因组DNA多态位点基因型,分析干预前后相关指标的变化与单个位点及多个位点组成的单体型的相关性。结果 rs5219位点的CC基因型与HOMA-IR、TC、TG指标的下降、与HDL-C指标的升高相关,rs2285676位点的GG基因型与FPG、HbA1c、HOMA-IR、TC的下降相关;rs5219-rs2285676-rs5218位点组成的T-A-G单体型与HOMA-IR的下降相关,C-G-A单体型与TC指标的下降相关,rs5219-rs5218位点组成的C-A单体型与FPG的下降相关,rs2285676-rs5218位点组成的G-G单体型与HDL-C的升高相关。结论KCNJ11基因rs5219位点的CC基因型、rs2285676位点的GG基因型及部分单体型与运动干预前后糖脂代谢的不同指标变化有相关性,可作为评价糖尿病前期人群对运动干预敏感性的参考指标。

腹腔镜手术治疗中低位直肠癌的临床疗效及对机体免疫功能的影响

为探讨腹腔镜手术治疗中低位直肠癌的临床疗效及对机体免疫功能的影响,将2016年1月至2018年12月收治的96例中低位直肠癌随机分为观察组和对照组,各48例,观察组行腹腔镜直肠癌根治术,对照组行开腹直肠癌根治术,对比2组临床疗效及手术前后免疫指标水平。结果显示,观察组术中出血量、术后肛门排气时间、下床活动时间、住院时间及并发症发生率均明显少于对照组,P<0.05。2组术前外周血T淋巴细胞CD3^+、CD4^+及血清IgA、IgM水平比较差异均无统计学意义,P>0.05;术后2组CD3^+、CD4^+、IgA、IgM水平均降低,但观察组各指标水平明显高于对照组,P<0.05。结果表明,腹腔镜手术治疗中低位直肠癌患者创伤小、术后恢复快、对机体免疫功能影响小,值得临床推广应用。