腕踝针与物理疗法治疗腰椎间盘突出症疗效对比研究

目的比较腕踝针与物理疗法治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法将50例腰椎间盘突出症患者随机分为治疗组20例和对照组30例。治疗组采用腕踝针治疗,对照组采用牵引和干扰电治疗。比较两组治疗前后简式Mc Gill疼痛问卷(SF-MPQ)评分及日本骨科学会(JOA)腰痛评分系统评分的变化情况。结果两组治疗5、10、15 d后及随访时SF-MPQ总分和JOA总分与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.01)。治疗组治疗5、10、15 d后及随访时SF-MPQ总分和JOA总分与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论腕踝针与物理疗法均为治疗腰椎间盘突出症的有效方法,均能缓解患者疼痛症状。

PDGF受体β亚单位2个不同切割位点核酶的体外切割效率的比较

目的研究针对大鼠PDGF受体β亚单位基因2个不同切割位点核酶的体外切割活性并加以比较。方法应用计算机对大鼠PDGF受体β亚单位mRNA二级结构进行模拟,设计针对PDGF受体β亚单位mRNA 4 5位CUU和2 5 2位CUU的锤头状(Hammerhead)核酶(Ribozyme)基因RZ1和RZ2 ,定点克隆于自我切割型核酶载体P1 5的5′cis核酶和3′- cis核酶之间;将大鼠PDGF受体β亚单位cDNA6 0 8bp的PCR片段克隆于pGEM T载体T7启动子下游,在T7启动子作用下分别体外转录成RZ1、RZ2和70 6nt的PDGF受体β亚单位mRNA ,比较RZ1和RZ2对70 6nt的PDGF受体β亚单位mRNA的切割活性的差异。结果RZ1在体外有较高的切割活性,而RZ2在体外无切割活性。结论提示在应用核酶技术进行基因治疗时,应选择有效的核酶切割位点,以达到有效的治疗目的。

反义抑制结缔组织生长因子对实验性肝纤维化的影响

目的观察结缔组织生长因子（CTGF）反义RNA对实验性肝纤维化的影响。方法应用分子生物学技术构建CTGF反义RNA真核表达质粒，经腹腔注射入CCl4诱导的肝纤维化模型大鼠体内;通过RT—PCR、Western blot及免疫组织化学等方法检测CTGF反义RNA基因转染前后CTGFmRNA和蛋白质在肝组织中含量的变化；并通过检测肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的变化，观察CTGF反义RNA对大鼠肝纤维化的影响。结果转染CTGF反义RNA后，可抑制CTGFmRNA和蛋白质的表达（P〈0．01），减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积（P〈0．01），并在一定程度上促进肝组织的改善（P〈0.01）。结论CTGF反义RNA对肝纤维化有一定的治疗作用。

抗血小板衍生生长因子受体的核酶对肝星状细胞生物学特性的影响

目的 研究抗血小板衍生生长因子受体β亚单位(PDGFR-β)核酶在肝星状细胞(HSC)内的切割活性及其对HSC生物学特性的影响。 方法 构建抗PDGFR-β核酶的真核表达载体,将其转染入HSC-T6细胞,G418筛选出阳性细胞克隆;分别用northern blot、western blot和免疫细胞化学检测PDGFR-β表达,用MTT法检测细胞增殖,免疫细胞化学检测α-F滑肌肌动蛋白(α-sMA)和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达,用流式细胞仪、吖啶噔荧光染色和电镜分析细胞凋亡。 结果 转染核酶的HSC的PDGFR-β在mRNA和蛋白水平的表达量均显著降低,仅为对照组的43％～51％(t≥3.95 7,P<0.05);增殖活性显著低于对照组(t≥3.858,P<0.0 5),且对血小板衍生生长因子(PDGF)促增殖效应的敏感性显著减弱;Ⅰ、Ⅲ型胶原和α-SMA的表达显著减少(t≥6.790,P<0.01);凋亡发生率显著高于对照组(x2≥14.157,P<0.01),电镜下可见典型凋亡细胞。 结论 抗PDGFR-β核酶的真核表达载体可在细胞内稳定表达,能有效切割靶RNA,抑制HSC增殖及胶原合成,并诱导其凋亡。为抗肝纤维化治疗提供了新的靶点和手段。

抗血小板衍生生长因子受体β亚单位核酶的体外制备与活性鉴定

目的 研究针对血小板衍生生长因子（PDGF）受体β亚单位基因的核酶的制备与体外切割活性鉴定。 方法 将大鼠PDGF受体β亚单位基因的PCR片段克隆于T载体T7启动子下游，32P标记的体外转录物作为靶RNA；设计并合成针对大鼠PDGF受体β亚单位胞外区的核酶，将核酶基因克隆于自我切割核酶载体P1.5的5′-cis核酶和3′-cis核酶之间，并进行32P标记的转录。核酶与靶RNA按一定比例和条件进行切割反应电泳，放射自显影。 结果 核酶制备正确，在最适条件下具有切割活性。其Km＝13.20nM，Kcat＝0.28min-1。最高切割效率达78.3%。 结论 体外制备的核酶具有良好的特异催化切割活性。